ไวรัสตับอักเสบเอ

ไวรัสตับอักเสบ Aเป็นโรคติดเชื้อของมนุษย์ที่มีความเสียหายของตับเด่นและแสดงอาการมึนเมาทางคลินิกและโรคดีซ่าน ไวรัสตับอักเสบเอได้รับการตรวจพบเมื่อปีพ. ศ. 2516 โดย S. Feinstone (และคนอื่น ๆ ) โดยใช้วิธีการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนด้วยภูมิคุ้มกันและการติดเชื้อลิง - ลิงชิมแปนซีและลิงชนิดหนึ่ง กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนระบบภูมิคุ้มกันคืออุจจาระเพื่อกรองถูกเพิ่มตับอักเสบผู้ป่วยแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจง (พักฟื้นซีรั่ม) และตะกอนที่ถูกยัดเยียดให้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน เนื่องจากปฏิสัมพันธ์ของไวรัสกับแอนติบอดีจำเพาะพวกเขาจึงได้รับการผสมผสานเฉพาะ ในกรณีนี้พวกเขาจะง่ายต่อการตรวจจับและรวมภายใต้อิทธิพลของแอนติบอดียืนยันความจำเพาะของเชื้อโรค การค้นพบ S. Feinstone ได้รับการยืนยันในการทดลองกับอาสาสมัคร

ไวรัสตับอักเสบชนิด A มีรูปทรงกลมเส้นผ่าศูนย์กลางของ virion เท่ากับ 27 นาโนเมตร จีโนมนี้แสดงด้วย RNA บวกเดียวที่มีมวล 2.6 MD ไม่ปรากฏ Supercapsid ประเภทความสมมาตรคือ cubic - icosahedron capsid มี 32 capsomers ซึ่งประกอบด้วย polypeptides 4 ตัว (VP1-VP4) โดยคุณสมบัติของไวรัสตับอักเสบเป็นของสกุล Heparnovirus ครอบครัว Picornaviridae แอนติเจนเชื้อไวรัสตับอักเสบเอ (HAV - ไวรัสตับอักเสบเอ) เป็นเนื้อเดียวกัน HAV ดีขึ้นในร่างกายของลิงชิมแปนซีลิงบาบูน hamadryls และลิงเล่นการพนัน (marmosets) เป็นเวลานานไวรัสไม่สามารถปลูกฝัง เฉพาะในทศวรรษ 1980 เท่านั้น มันเป็นไปได้ที่จะได้รับวัฒนธรรมเซลล์ที่ HAV แพร่กระจาย สมัยก่อนใช้สำหรับวัตถุประสงค์เหล่านี้ immortalized สายพันธุ์ของเซลล์ตัวอ่อนในไตจำพวกแสม (วัฒนธรรม FRhK-4) และตอนนี้ - สายพันธุ์ของเซลล์ปลูกถ่ายไตลิงสีเขียว (วัฒนธรรม 4647)

ตามคำแนะนำของผู้เชี่ยวชาญที่ให้นำศัพท์ต่อไปนี้ของไวรัสตับอักเสบเอเครื่องหมายไวรัสตับอักเสบไวรัส - แอนติบอดี NAU เพื่อไวรัสตับอักเสบ A: Anti-HAV IgM และ anti-HAV IgG

HAV เป็นอนุภาคขนาดเล็กที่มีเส้นผ่านศูนย์กลาง 27-30 นาโนเมตรซึ่งมีความสมมาตรแบบ icosahedral และมีความเป็นเนื้อเดียวกัน ในรูปแบบการเลี้ยวเบนของอิเล็กตรอนที่ได้จากวิธีการรวมตัวของภูมิคุ้มกันพบอนุภาคอิเล็กตรอนหนาแน่นที่มีตำแหน่งแคปซูลเรียงตัวสมมาตรอย่างเผินๆ มีการตรวจจับอนุภาคที่สมบูรณ์และว่างเปล่าในการเตรียมการ Nucleocapsid NAV ซึ่งแตกต่างจากของไข้หวัดใหญ่ไม่มีการยื่นออกมาจากพื้นผิวและเยื่อหุ้มปอด สิ่งสำคัญก็คือ virion HAV ไม่มีโครงสร้างรูปหัวใจ

ตามคุณสมบัติทางกายภาพและทางเคมีของไวรัสตับอักเสบเอมีความเกี่ยวข้องกับครอบครัวของ Picornaviridae ที่ประเภท Enterovirus มีเลขอะตอม 72 อย่างไรก็ตามอนุกรมวิธานนี้เป็นเรื่องผิดปกติมากเกินไปและที่พบว่ามันเป็นไปได้ที่จะออกคำศัพท์ "ไวรัสตับอักเสบเอ"

เช่นเดียวกับไวรัสทุกตัวในตระกูล Picornaviridae ไวรัสตับอักเสบเอมีกรด ribonucleic ห้องทดลองบางแห่งได้แสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ในการโคลนนิ่งจีโนมของไวรัสตับอักเสบเอซึ่งเป็นโอกาสในการได้รับวัคซีน

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7],

ความต้านทานต่อไวรัสตับอักเสบชนิดเอ

ไวรัสค่อนข้างทนต่ออุณหภูมิสูงกรดตัวทำละลายไขมัน (ไม่มี lipids), disinfectants ทนอุณหภูมิต่ำได้ดี สิ่งนี้ก่อให้เกิดการรักษาในระยะยาวต่อสิ่งแวดล้อมภายนอก ที่อุณหภูมิห้องจะอยู่รอดเป็นเวลาหลายสัปดาห์ที่ 60 ° C บางส่วนสูญเสียการติดต่อหลังจาก 4-12 ชั่วโมงสมบูรณ์ - หลังจากไม่กี่นาทีที่ 85 ° C ทนต่อคลอรีนสูงเนื่องจากสามารถเจาะน้ำประปาผ่านอุปสรรคของโรงบำบัดน้ำได้

สรุปข้อมูลทั้งหมดเราสามารถระบุลักษณะของไวรัสตับอักเสบเอได้ดังนี้:

• ต้นแบบธรรมชาติคือมนุษย์
• สัตว์ทดลอง - marmozet, ชิมแปนซี;
• แหล่งที่มาของการติดเชื้อ - อุจจาระ;
• โรค - ระบาดและถิ่น;
• เส้นทางการส่งผ่านคืออุจจาระปากเปล่า;
• ระยะฟักตัว 14-40 วัน
• การเปลี่ยนแปลงไปสู่โรคตับอักเสบเรื้อรัง - ไม่ได้ระบุไว้

คุณสมบัติทางภูมิคุ้มกันของ NAV มีดังนี้

• สายพันธุ์ต้นแบบ - Ms-l, CR-326, GVG ทั้งหมดมีลักษณะทางภูมิคุ้มกันหรือเหมือนกัน
• แอนติบอดี - IgM และ IgG ผลิตขึ้นเพื่อตอบสนองต่อการสร้างโปรตีนโครงสร้างของไวรัสและเป็นตัวป้องกัน
• I การกระทำทางโภชนาหารของ serum y-globulin ของมนุษย์ - ช่วยปกป้องหรือลดทอนโรคภายใต้สภาวะของการให้ยาก่อนที่จะติดเชื้อหรือในระหว่างระยะฟักตัว

ลักษณะทางกายภาพและเคมีของ NAU มีดังนี้

• สัณฐานวิทยาเป็นเปลือกทรงกลมที่ไม่ใช่เปลือกทรงกลมที่มีสัดส่วนสมมาตรที่ประกอบด้วยแคปซิด 32 capsomers;
• เส้นผ่านศูนย์กลาง 27-30 นาโนเมตร;
• ความหนาแน่นของ CsCl (g / cm3) คือ 1.38-1.46 (open particles), 1.33-1.34 (mature virion), 1.29-1.31 (virions ที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ, อนุภาคว่างเปล่า);
• ค่าสัมประสิทธิ์การตกตะกอนเท่ากับ 156-160
• กรดนิวคลีอิก - single-stranded, RNA เส้น;
• น้ำหนักโมเลกุลสัมพัทธ์ - 2,25 106-2,8 106KD;
• จำนวนของนิวคลีโอไทด์คือ 6,500-8,100

ความมีเสถียรภาพของ NAV ในทางเคมีกายภาพมีดังนี้

• คลอโรฟอร์มอีเทอร์ - มีเสถียรภาพ
• คลอรีน 0.5-1.5 มก. / ลิตร, 5 องศาเซลเซียส, 15 นาที - การระงับกลิ่นกายบางส่วน
• คลอมีน, 1 กรัม / ลิตร, 20 องศาเซลเซียส, 15 นาที - การใช้งานที่สมบูรณ์
• Formalin, 1: 4000, 35-37 ° C, 72 ชั่วโมง - การเลิกใช้งานที่สมบูรณ์แบบ 1: 350, 20 ° C, 60 นาที - การเลิกใช้งานบางส่วน

อุณหภูมิ:

• 20-70 องศาเซลเซียส - มีเสถียรภาพ
• 56 °С, 30 นาที - มีเสถียรภาพ
• 60 ° C, 12 ชั่วโมง - การใช้งานเป็นส่วนหนึ่ง
• 85 °С, 1 นาที - การใช้งานที่ไม่สมบูรณ์;
• การแช่แข็ง 120 องศาเซลเซียส 20 นาที - หยุดการใช้งานเสร็จสิ้น
• ความร้อนที่แห้ง 180 ° C, 1 ชั่วโมง - การใช้งานที่ไม่สมบูรณ์
• UV, 1.1 W, 1 นาที - การใช้งานที่ไม่สมบูรณ์

ข้อมูลที่นำเสนอแสดงให้เห็นว่าสมบัติทางเคมีกายภาพของไวรัสตับอักเสบเอมีความใกล้เคียงกับ enteroviruses มากที่สุด เช่นเดียวกับ enterovirus อื่น ๆ HAV สามารถทนต่อสารฆ่าเชื้อโรคหลายชนิดได้โดยไม่มีการใช้งานเป็นเวลาหลายนาทีที่อุณหภูมิ 85 องศาเซลเซียสและถูกแช่แข็ง

ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าไวรัสตับอักเสบเอสามารถทำซ้ำได้ในสายพันธุ์เดียวและเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์ลิงและมนุษย์ การสืบพันธุ์ของเชื้อไวรัสตับอักเสบเอโดยเฉพาะอย่างยิ่งในวัฒนธรรมในหลอดทดลองพบได้เมื่อใช้สารสกัดจากตับของผู้ป่วยลิงเป็นวัสดุเริ่มต้น แต่ก็ควรจะตั้งข้อสังเกตว่าในทุกการทดลองตามสืบพันธุ์ของไวรัสตับอักเสบเอในในหลอดทดลองวัฒนธรรมที่น่าสังเกตระยะฟักตัวนานในการทางเดินหลัก (-10 ถึง 4 สัปดาห์) ภายหลังการสะสมของสารพันธุกรรมของเชื้อไวรัสที่เพิ่มขึ้น แต่ค่าที่แน่นอนเป็นอย่างมาก ไม่สำคัญซึ่งเป็นเหตุผลให้นักวิจัยจำนวนมากพูดถึงการจำลองไวรัสไวรัสตับอักเสบเอในเนื้อเยื่อที่ไม่สมบูรณ์

สรุปข้อมูลจากวรรณคดีเกี่ยวกับการสืบพันธุ์ของเชื้อไวรัสตับอักเสบเอจากเชื้อที่ไม่ใช่รากอาจกล่าวได้ว่าประสบการณ์ที่ได้รับ HAV ในหลอดทดลองเป็นเวลานาน สภาวะที่เหมาะสมสำหรับการจำลองแบบไวรัสที่มีเสถียรภาพในระดับสูงยังไม่ได้รับการระบุในที่สุดและข้อ จำกัด เหล่านี้ได้ศึกษาถึงคุณสมบัติทางชีววิทยาการผลิตแหล่งที่มาของน้ำยาสำหรับการผลิตการวินิจฉัยและการออกแบบวัคซีน

ในเวลาเดียวกันการตัดสินในแง่ดีมากขึ้นเกี่ยวกับปัญหานี้สามารถพบได้ในวรรณคดี การแก้ปัญหาทุกประเด็นที่เกี่ยวข้องกับการเพาะปลูกไวรัสตับอักเสบเอเป็นเรื่องสำคัญสำหรับอนาคตอันใกล้นี้ เมื่อศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการขยายพันธุ์ HAV ในเซลล์เพาะเลี้ยงตัวอ่อนไตลิงวอกเปิดเผยสองขั้นตอนขั้นตอนของการผลิตการติดเชื้อไวรัส (ไม่เกิน 6-8 วันที่ทาง 5) และขั้นตอนของการสะสมเข้มข้นของแอนติเจนของไวรัส นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่าการสะสมที่สำคัญที่สุดของแอนติเจนไวรัสเกิดขึ้นภายใต้เงื่อนไขของการเพาะปลูกลูกกลิ้งที่เรียกว่า (rotating bottle) วิธีนี้จะเปิดกว้างขึ้นความเป็นไปได้ของการได้รับแอนติเจนทางวัฒนธรรมในปริมาณมากและดังนั้นจึงเป็นวัสดุเริ่มต้นสำหรับการเตรียมระบบการวินิจฉัยและการผลิตของการเตรียมวัคซีนจะปรากฏขึ้น

ระบาดวิทยาของโรคตับอักเสบชนิดเอ

ไวรัสตับอักเสบเอมีเชื้อโรคที่ก่อให้เกิดโรคได้สูงสำหรับมนุษย์ ตามข้อสรุปขององค์การอนามัยโลก (WHO) (1987) สำหรับการเริ่มระบาดของโรคโรคติดเชื้อไวรัสเพียงตัวเดียว อย่างไรก็ตามปริมาณการติดเชื้อในทางปฏิบัติอาจสูงกว่ามาก แหล่งที่มาของการติดเชื้อเป็นเพียงผู้ติดเชื้อ ไวรัสถูกปล่อยออกมาในปริมาณมากโดยมีอุจจาระ 12-14 วันก่อนที่จะมีอาการของโรคดีซ่านและภายใน 3 สัปดาห์ ระยะเวลา icteric ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในการแยกเชื้อก่อโรคในคนไข้ที่เป็นโรคตับอักเสบชนิดไอ, โรคดีซ่านและไม่แสดงอาการของโรคไวรัสตับอักเสบเอ วิธีการติดเชื้อคืออุจจาระปากเปล่าส่วนใหญ่เป็นน้ำและตามเส้นทางของครัวเรือนและอาหาร วิธีการติดเชื้อคืออุจจาระปากเปล่าส่วนใหญ่เป็นน้ำและตามเส้นทางของครัวเรือนและอาหาร เส้นทางหลักของการแพร่เชื้อไวรัสคือน้ำ นอกจากนี้ยังสามารถติดเชื้อในอากาศได้ ความอ่อนแอของประชากรเป็นสากล ส่วนใหญ่เด็กที่อายุต่ำกว่า 14 ไม่สบาย โรคมีฤดูใบไม้ร่วงฤดูหนาวเด่นชัด

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

อาการของโรคตับอักเสบเอ

ระยะฟักตัวจะแตกต่างกันไปจาก 15 ถึง 50 วันซึ่งขึ้นอยู่กับปริมาณของเชื้อที่ติดเชื้อไวรัส แต่โดยเฉลี่ยอยู่ที่ 28-30 วัน เมื่ออยู่ในร่างกายตับอักเสบไวรัสซ้ำในต่อมน้ำเหลืองในระดับภูมิภาคเข้าสู่กระแสเลือดแล้วไปยังเซลล์ตับและตับอักเสบสาเหตุกระจายเฉียบพลันที่จะมาพร้อมกับแผลของเซลล์ตับตับและเซลล์ reticuloendothelial และลดลงในการล้างสารพิษและสิ่งกีดขวางการทำงานของมัน ความเสียหายต่อเซลล์ตับจะไม่เกิดขึ้นเนื่องจากการดำเนินการของไวรัสโดยตรง แต่เป็นผลมาจากกลไกภูมิคุ้มกันวิทยา ภาพทั่วไปของไวรัสตับอักเสบเอคือรูปแบบ icteric cyclical เฉียบพลัน: ระยะฟักตัว, prodromal (pre-jaundiced), ช่วง icteric และการพักฟื้น อย่างไรก็ตามในจุดโฟกัสของการติดเชื้อเผยให้เห็นเป็นจำนวนมากของผู้ป่วยที่มีรูปแบบไม่แสดงอาการและ anicteric ของการติดเชื้อจำนวนที่ทุกข์ยากกว่า icteric (ปรากฏการณ์ "ภูเขาน้ำแข็ง")

ภูมิคุ้มกันหลังติดเชื้อมีความแข็งแรงและยาวนานเกิดจากเชื้อไวรัสแอนติบอดีและเซลล์หน่วยความจำภูมิคุ้มกัน

การวินิจฉัยโรคตับอักเสบของจุลชีววิทยา A

การวินิจฉัยโรคไวรัสตับอักเสบเอ (ยกเว้นสัตว์ติดเชื้อ - ลิงชิมแปนซี marmozet ลิงบาบูนซึ่งเราได้) ตามวิธีภูมิคุ้มกันต่างๆ: วิธีอิมมูโน DGC, hemagglutination ยึดเกาะภูมิคุ้มกัน (ที่ซับซ้อนของแอนติเจนของไวรัส + แอนติบอดีในการปรากฏตัวของสมบูรณ์ดูดซับบนเม็ดเลือดแดงและทำให้เกิดการยึดเกาะของพวกเขา) . แต่การบังคับใช้วิธีการเหล่านี้จะถูก จำกัด เนื่องจากการขาดการแอนติเจนของไวรัสที่เฉพาะเจาะจงและปฏิกิริยาอิมมูโนต้องขริบตับซึ่งเป็นที่ไม่พึงประสงค์ วิธีการที่เชื่อถือและเฉพาะเจาะจงคือกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนภูมิคุ้มกัน แต่มันเป็นเวลานานมาก ดังนั้นจนกว่าเพียงวิธีการที่ยอมรับได้สำหรับปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันคืออิมมูโน assay ของแข็งในรูปแบบของ IPM หรือ RIM โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการปรับเปลี่ยนของ "จับ" ของอิมมูโนเอ็มในประเทศของเรามีวัตถุประสงค์เพื่อนำเสนอระบบการทดสอบนี้ - "DIAG-A-GEO" หลักการทำงานของระบบทดสอบนี้มีดังต่อไปนี้ บนผนังของสไตรีน lunochek ดูดซับแอนติบอดีแรกที่ภูมิคุ้มกันบกพร่องของ M ชั้น (antiimmunoglobuliny M) จากนั้นจะเพิ่มให้กับซีรั่มผู้ป่วยตรวจสอบ หากมีระดับแอนติบอดี IgM พวกเขาจะผูกกับแอนติบอดี Ti-M แล้วเพิ่มให้กับแอนติเจนโดยเฉพาะอย่างยิ่งไวรัส (ไวรัสตับอักเสบเอ) ซึ่งได้มาจากการเพิ่มขึ้นในการเพาะเลี้ยงเซลล์ ระบบจะล้างและการขออนุญาตมีการเพิ่มภูมิคุ้มกันต้านไวรัสที่มีป้ายกำกับมะรุม peroxidase หากได้มีการทำงานร่วมกันของทั้งสี่องค์ประกอบของระบบที่มีสี่ชั้น "แซนวิช":

• antiimmunoglobulins M,
• immunoglobulins M (ต้านเชื้อไวรัสตับอักเสบเอ - ในซีรั่มทดสอบของผู้ป่วย),
• แอนติเจนไวรัส,
• แอนติบอดีแอนติบอดีที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์

ในการตรวจหาสิ่งที่ซับซ้อนนี้จะมีการเพิ่ม substrate ของเอนไซม์ลงใน lunettes ภายใต้อิทธิพลของเอนไซม์จะถูกทำลายและมีการสร้างผลิตภัณฑ์สี ความเข้มของสีสามารถวัดได้เป็นจำนวนมากด้วยเครื่องวัดสเปกโตรโฟโตมิเตอร์หรือ photocolorimeter

ประโยชน์ของการ "จับ" IgM คือว่าแอนติบอดีของชั้นอิมมูโนจะปรากฏในการตอบสนองภูมิคุ้มกันหลักและบ่งบอกถึงขั้นตอนการใช้งานของการติดเชื้อพวกเขาหายไปหลังจากความทุกข์โรค แอนติบอดีแอนติบอดีที่อยู่ในกลุ่มของ IgG ในทางตรงกันข้ามยังคงมีอยู่เป็นเวลานานหลังจากเกิดโรคทำให้ภูมิคุ้มกันที่ได้รับ สำหรับการตรวจหาเชื้อไวรัสตับอักเสบเอจะมีการเสนอวิธีการตรวจดีเอ็นเอ: มีการใช้โพรบ vRNA แบบเสริมเป็นตัวตรวจ

การรักษาโรคไวรัสตับอักเสบเอ

เนื่องจากการผลิต interferon ถูกรบกวนในไวรัสตับอักเสบการรักษาโรคไวรัสตับอักเสบเอขึ้นอยู่กับการใช้ interferon และ inducer ในการสังเคราะห์ Amixin ภายในร่างกาย

การป้องกันโรคตับอักเสบชนิดเฉพาะ

ก่อนหน้านี้ใช้กันอย่างแพร่หลายตับอักเสบ seroprevention โดยใช้ gammaglobulin ได้รับไม่เป็นธรรม แต่เน้นถูกวางลงบนการสร้างภูมิคุ้มกันการถือครองดำเนินการฉีดวัคซีนป้องกันไวรัสตับอักเสบเอ ด้วยเหตุนี้จึงมีการพัฒนาสายพันธุ์ต่างๆของวัคซีนและใช้อยู่แล้ว ในรัสเซียวัคซีนป้องกันโรคไวรัสตับอักเสบเอได้อย่างมีประสิทธิผลได้รับกลับมาในปีพ. ศ. 2538 และตอนนี้ได้มีการนำมาใช้เรียบร้อยแล้ว