การทดสอบยูเรีย 13: การเตรียมการผลบวกลบ

ตั้งแต่บัตรประจำตัวที่เกี่ยวข้องกับโรคกระเพาะเรื้อรังและแผลในกระเพาะอาหารและ Helicobacter duodenum แบคทีเรีย pylori ได้มีการพัฒนาวิธีการวินิจฉัยรวมทั้งการทดสอบ urease ซึ่งสามารถตรวจจับเชื้อจุลินทรีย์ในผู้ป่วยที่ได้รับการยืนยันการมีส่วนร่วมในการพัฒนาของโรคทางเดินอาหารและกำหนดรักษาที่มีประสิทธิภาพ

เอนไซม์ยูรีเอสในฐานะ biomarker ของการติดเชื้อ Helicobacter pylori

แบคทีเรีย H. Pylori ได้รับการปกป้องจากสภาวะที่เป็นกรดในลำไส้ของกระเพาะอาหารในสองวิธี ประการแรกการทำลายเยื่อเมือกด้วยจุลินทรีย์ทำให้จุลินทรีย์ได้รับชั้นล่างลงไปที่เซลล์เยื่อบุผิวซึ่ง pH สูง (นั่นคือความเป็นกรดต่ำ) ประการที่สองแบคทีเรียเป็นตัวกลางในการทำกรดสังเคราะห์ในปริมาณมากใช้เอนไซม์ metalloenzyme urease โมเลกุลสูงที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาหรือยูเรีย amidohydrolase

การใช้ urease ในการวินิจฉัย  Helicobacter เป็น  ไปได้เนื่องจากไม่เพียง แต่กิจกรรม cytoplasmic ของเอนไซม์นี้เท่านั้น แต่ยังมีการปฏิสัมพันธ์ภายนอกกับเซลล์ต้นกำเนิด

ภายใต้อิทธิพลของยูเรียยูเรียยูเรียจะสลายตัวไปเป็นไฮโดรเจนไนไตรด์ (แอมโมเนีย) และคาร์บอนไดออกไซด์ (คาร์บอนไดออกไซด์) พวกเขาตอบสนองกับกรดไฮโดรคลอริกของน้ำในกระเพาะอาหารและให้รอบ H. Pylori โซนที่มีความเป็นกรดเป็นกลางและยังสนับสนุนการเผาผลาญของเซลล์แบคทีเรีย

นั่นคือเหตุผลที่ urease คือการล่าอาณานิคมที่สำคัญของเอช pylori ของเยื่อบุกระเพาะอาหารของมนุษย์และระบุกิจกรรม ureoliticheskoy ถือว่าเป็น biomarker ของความรุนแรงของเชื้อแบคทีเรียที่โรคทางเดินอาหาร - การใช้จ่ายการทดสอบ urease - ใช้สำหรับการวินิจฉัยการติดเชื้อเชื้อ H. Pylori เช่นเดียวกับการตรวจสอบผลของการทำลายยาเสพติดที่เกิดขึ้น (กำจัด) ของเชื้อแบคทีเรีย

การวินิจฉัย H. Pylori รวมถึงการตรวจวินิจฉัยที่รุกรานและไม่รุกรานขึ้นอยู่กับว่าจำเป็นต้องมีการตรวจส่องกล้องในกระเพาะอาหาร (fibrogastroduodenoscopy) หรือไม่ การทดสอบการรุกรานเป็นการทดสอบ urease อย่างรวดเร็วหรือการทดสอบแบบ express test urease (RUT-test) ซึ่งต้องใช้ตัวอย่างเนื้อเยื่อ (biopsies) 13C urease test ทางเดินหายใจ (13C-UBT) - พบได้บ่อยในหมู่การทดสอบที่ไม่รุกราน

มันควรจะตั้งข้อสังเกตว่าการวินิจฉัยไม่รุกรานของเชื้อสามารถดำเนินการได้โดยการตรวจเลือดสำหรับแอนติบอดี (เฉพาะเจาะจงที่ความไว 75% - 84%), การวิเคราะห์วิธี ELISA ของปัสสาวะ (ไว 96% และความจำเพาะ 79%) แอนติเจน coprogram ในแบคทีเรีย ข้อมูลเพิ่มเติม - การ  ติดเชื้อ Helicobacter pylori: แอนติบอดีต่อ Helicobacter pylori ในเลือด

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

ตัวบ่งชี้สำหรับขั้นตอน การทดสอบ urease

การที่อาณานิคมของกระเพาะอาหารเป็นเยื่อบุช่องท้อง H. Pylori ไม่ใช่โรคซึ่งเป็นปัจจัยหนึ่งที่ทำให้แบคทีเรียมีน้ำหนักตัวเพิ่มขึ้นซึ่งในบางสภาวะสามารถทำให้เกิดการพัฒนาทางเดินอาหารในกระเพาะอาหารและทางเดินอาหารได้

ตัวชี้วัดสำหรับการวินิจฉัยของเอช pylori การติดเชื้อโดยเฉพาะอย่างยิ่งการทดสอบ urease ที่เกี่ยวข้องกับโรคกระเพาะที่มีความเป็นกรดสูงและโรคกระเพาะ antral แกร็น, duodenitis, แผลในกระเพาะอาหารและลำไส้เล็กส่วนต้นแผลกระเพาะอาหารมอลต์-โรคมะเร็งต่อมน้ำเหลือง หลังจากการผ่าตัดส่องกล้องในช่วงต้นขั้นตอนมะเร็งกระเพาะอาหารสามารถดำเนินการตรวจสอบทางเนื้อเยื่อร่วมกับการทดสอบ urease อย่างรวดเร็ว - EGD กับการทดสอบ urease

โรคทางเดินอาหารอาจแต่งตั้งทดสอบ urease กับข้อร้องเรียนของผู้ป่วยกับความรู้สึกของความหนักเบาและความรู้สึกไม่สบายในภูมิภาคท้องอิจฉาริษยาบ่อยหลังอาหารเรอเปรี้ยวหรือเน่าเสียที่ขมขื่นในปาก, คลื่นไส้, ความผิดปกติของระบบทางเดินอาหารปวดปวดหรือตะคริวในกระเพาะอาหาร

[8], [9]

การจัดเตรียม

เตรียมความพร้อมสำหรับการทดสอบลมหายใจ 13C ยูเรียคือการที่ผู้ป่วยควรหยุด: ยาปฏิชีวนะเป็นเวลา 4 สัปดาห์ก่อนที่จะมีการทดสอบและการ NSAID ยาเสพติดโปรตอนกลุ่มปั๊มยับยั้ง (ลดความเป็นกรดของกระเพาะอาหาร) และใช้สำหรับการอิจฉาริษยา, ยาลดกรดหรือสารดูดซับ - อย่างน้อยสองสัปดาห์ ควรหยุดยาใด ๆ ใน 5 ถึง 6 วันและใช้เครื่องดื่มแอลกอฮอล์และการสูบบุหรี่ 3 วันก่อนการทดสอบ

นอกจากนี้ประมาณหนึ่งสัปดาห์ก่อนการทดสอบขอแนะนำว่าอย่ารับประทานพืชตระกูลถั่วเพราะว่าถั่วถั่วถั่วถั่วเหลืองและถั่วมียูเรีย (ซึ่งช่วยปกป้องพืชจากโรคและศัตรูพืช)

ในตอนเย็นในวันที่ของการทดสอบอาหารเย็นมื้อค่ำปลายถูกห้าม; ในวันที่ทำการทดสอบคุณจำเป็นต้องทำสุขอนามัยช่องปากตามปกติและเป็นเวลาครึ่งชั่วโมงก่อนการวิเคราะห์ไม่ควรดื่มอะไรหรือใช้สัตว์

[10], [11], [12], [13], [14]

เทคนิค การทดสอบ urease

เทคนิคการ:

• แรกหายใจตัวอย่างพื้นฐาน - หายใจออกเป็นภาชนะพลาสติกอ่อน (และผนึกแน่น);
• ถูกนำมาใช้ภายในกับของเหลวที่มีการเพิ่มของ 13C ยูเรีย;
• หลังจากผ่านไป 25-30 นาทีจะมีตัวอย่างอากาศถ่ายเทออกมาอีกหนึ่งถัง

ตัวอย่างที่ได้จากการทดลองนี้จะถูกนำมาวิเคราะห์ในเครื่องสเปกโตรมิเตอร์โดยการแยกไอโซโทปในตัวอย่างที่สองและการกำหนดความเข้มข้น ความแตกต่างระหว่างค่าในตัวอย่างที่สองและตัวอย่างแรกจะแสดงเป็นเดลต้า (δ) เทียบกับค่าพื้นฐาน ค่าปกตินั่นคือค่าลบที่มีป้ายกำกับอะตอม 13C ในผู้ป่วยที่ติดเชื้อแตกต่างกันไป 0,15-0,46% ในขณะที่ค่าในเชิงบวกสำหรับการปรากฏตัวของการติดเชื้อได้ถึง 1,2-9,5% อัตราการย่อยสลายยูเรียสูงกว่า 12-14 กรัม / นาที

ถ้าง่าย: การตรวจหา 13C ของก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ที่มีข้อความในอากาศที่หายใจออกบ่งชี้ว่ายูเรียก็จะถูกย่อยสลายโดยเอนไซม์ urease H. Pylori ที่ในความเป็นจริงยืนยันว่าการแสดงตนในกระเพาะอาหาร

การทดสอบทางเดินหายใจสำหรับ H. Pylori

การทดสอบหรือ 13C ยูเรียทดสอบลมหายใจ 13C-UBT สำหรับเชื้อ Helicobacter pylori เป็นหนึ่งในสิ่งที่สำคัญที่สุดวิธีการไม่รุกรานสำหรับการตรวจหาการติดเชื้อ: มีความไวและความจำเพาะของความเสี่ยง 98% ของผลลบบวกปลอมและเท็จ 100% เมื่อเทียบกับเนื้อเยื่อและการตรวจเลือดการตรวจหาแอนติบอดีต่ำกว่า 2 , 3%

การวิเคราะห์จะขึ้นอยู่กับการย่อยสลายของเอช pylori urease administrable รับประทานยูเรียของเหลวอะตอมที่มีป้ายกำกับ (ไม่ใช่กัมมันตรังสีไอโซโทป) 13C คาร์บอนไดออกไซด์ (50-75 mg ของ 13C-ยูเรียเจือจางด้วย 100 มล. ของของเหลว)

ยูเรียที่ติดฉลากด้วยตัวบ่งชี้ไอโซโทปถูกย่อยสลายในกระเพาะอาหารปล่อยแอมโมเนียและมีอะตอมของคาร์บอนไดออกไซด์ติดฉลากซึ่งแพร่กระจายเข้าไปในเลือดและออกจากปอดเมื่อหายใจ ฉลากคาร์บอนไดออกไซด์ช่วยแก้ไขอุปกรณ์สำหรับการวิเคราะห์ - เครื่องสเปกโตรมิเตอร์มวลซึ่งการกระทำนั้นกระทำบนสเปคโตรสโบรสที่ไม่กระจายตัวหรือตัววิเคราะห์อินฟราเรดสเปกโตรสโกปี

การทดสอบ urease อย่างรวดเร็ว

การทดสอบ urease อย่างรวดเร็ว (Rapid Urease Test หรือ RUT) จะดำเนินการในระหว่างการตรวจร่างกายด้วยกระเพาะและลำไส้เล็กส่วนต้นโดยใช้ endofibroscopes ที่ทันสมัยและการสุ่มตัวอย่างตัวอย่างชิ้นเนื้อ ควรใช้วัสดุชีวภาพจากส่วน antral ของกระเพาะอาหาร ดังนั้นการตรวจทางห้องปฎิบัติการทางหลอดเลือดดำหรือ FGD ด้วยการทดสอบ urease จึงเป็นวิธีการวินิจฉัยที่รุกราน

ตัวอย่างการตรวจชิ้นเนื้อได้ถูกแช่ลงไปในกลางมาตรฐานที่เตรียมไว้มีเจลวุ้นยูเรียเป็นตัวบ่งชี้ของกรดเบสและ phenolsulfonphthalein bacteriostatic (เพิ่มเพื่อป้องกันการเจริญเติบโตของเชื้อจุลินทรีย์ปนเปื้อนและผลบวกปลอม)

ถ้าตัวอย่างของเนื้อเยื่อกระเพาะอาหารแบคทีเรีย H. Pylori ที่ urease ผลิตโดยพวกเขาจะย่อยสลายยูเรียและเพิ่มค่า pH ที่เห็นได้ชัดเจนคือการเปลี่ยนแปลงตัวบ่งชี้สีเหลืองสีส้ม (pH 6.8) และสีม่วง (ที่ pH> 8) 75% การทดสอบในเชิงบวก เปลี่ยนสีใน 120-180 นาทีและตัวบ่งชี้จะเปลี่ยนสีได้เร็วยิ่งขึ้นมีแบคทีเรียมากขึ้น แต่การทดสอบที่มีค่าเป็นลบอยู่นาน 24 ชั่วโมง

การทดสอบ urease อย่างรวดเร็วเป็นบวกสิ่งที่เป็น? การทดสอบ RUT บวกของสีแดงของตัวบ่งชี้บ่งชี้ว่ามีแบคทีเรีย H. Pylori อย่างน้อย 105 ชนิดในชิ้นเนื้อเยื่อที่วางอยู่ในอาหารเลี้ยงเชื้อวุ้นแม้ว่าจะมีความเข้มข้นสูงกว่า

ความไวของการปรับเปลี่ยนการทดสอบแตกต่างกันไปในช่วง 90-98% และความจำเพาะคือ 97-99%

ในฐานะที่เป็นโรคทางเดินอาหารตั้งข้อสังเกตว่าผู้ป่วยอยู่ในสถานกักกันตั้งอย่างรวดเร็วการทดสอบ urease บวก (ใส่สามไม้กางเขน) ก็หมายความว่าค่า pH> 8 และตัวบ่งชี้ที่มีการเปลี่ยนแปลงสีในเวลาน้อยกว่า 60 นาทีหลังจากแช่ตรวจชิ้นเนื้อแสดงให้เห็นว่าจำนวนมากของเชื้อ และระดับสูงของการแสดงออกของ urease จำนวนแบคทีเรียโดยประมาณสามารถคำนวณได้จากการตรวจพยาธิวิทยาทางจุลชีววิทยาของชิ้นเนื้อเยื่อโดยใช้กล้องจุลทรรศน์และถ้าบริเวณที่ถ่ายภาพสูงกว่า 40-50 ระดับการติดเชื้อจะถือว่าสูง

13C ทดสอบยูเรียลมหายใจจะไม่ค่อยให้ผลบวกปลอมและในผู้ป่วยที่มีแผลในกระเพาะอาหารที่น่าสงสัยหรือแผลในลำไส้เล็กส่วนต้นเป็นหนึ่งในการทดสอบในเชิงบวกคือการยืนยันการวินิจฉัยในขณะที่ผลลบจะต้องได้รับการยืนยันโดยผลของ EGD กับการทดสอบ urease