ผู้เชี่ยวชาญทางการแพทย์ของบทความ
สิ่งตีพิมพ์ใหม่
PCR เป็นวิธีการวินิจฉัยโรคทางพันธุกรรม
ตรวจสอบล่าสุด: 23.04.2024
เนื้อหา iLive ทั้งหมดได้รับการตรวจสอบทางการแพทย์หรือตรวจสอบข้อเท็จจริงเพื่อให้แน่ใจว่ามีความถูกต้องตามจริงมากที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้
เรามีแนวทางการจัดหาที่เข้มงวดและมีการเชื่อมโยงไปยังเว็บไซต์สื่อที่มีชื่อเสียงสถาบันการวิจัยทางวิชาการและเมื่อใดก็ตามที่เป็นไปได้ โปรดทราบว่าตัวเลขในวงเล็บ ([1], [2], ฯลฯ ) เป็นลิงก์ที่คลิกได้เพื่อการศึกษาเหล่านี้
หากคุณรู้สึกว่าเนื้อหาใด ๆ ของเราไม่ถูกต้องล้าสมัยหรือมีข้อสงสัยอื่น ๆ โปรดเลือกแล้วกด Ctrl + Enter
PCR เป็นผลสัมฤทธิ์ทางการเรียนทางพันธุศาสตร์ระดับโมเลกุลที่ใช้สำหรับการขยายดีเอ็นเอและช่วยให้ดีเอ็นเอเฉพาะ (ยีนที่น่าสนใจ) จะจำลองแบบได้อย่างรวดเร็วในหลอดทดลองมากกว่า 200,000 ครั้ง ในการทำปฏิกิริยานี้ก็เพียงพอที่จะมีสารดีเอ็นเอของเซลล์หนึ่งตัว จำนวน DNA ที่ขยายโดย PCR นั้นใหญ่มากจน DNA นี้สามารถย้อมสีได้ (ไม่ต้องใช้เครื่องตรวจสอบกัมมันตภาพรังสีหลังจากการอิเล็กโตรโฟเรซิส) สิ่งที่จำเป็นสำหรับการทำ PCR คือความรู้เกี่ยวกับลำดับเบสของภูมิภาคดีเอ็นเอที่ได้รับการขยายเพื่อการเลือกไพรเมอร์สังเคราะห์เทียมที่เหมาะสม
ปัจจุบัน PCR เป็นกระบวนการที่เกิดขึ้นในหลอดเดียวและประกอบด้วยวงจรซ้ำของการขยาย (ทำสำเนาคัดลอก) ของลำดับดีเอ็นเอที่เฉพาะเจาะจงในการสั่งซื้อเพื่อให้ได้จำนวนมากพอของสำเนาที่สามารถระบุ electrophoresis หนึ่งในองค์ประกอบสำคัญของการเกิดปฏิกิริยา - "ไพรเมอร์" - oligonucleotides สังเคราะห์ประกอบด้วย 20-30 ฐานเสริม "ไซต์" (พื้นที่) หลอม (ต่อ) ไปยังส่วนที่สามารถระบุตัวตนของดีเอ็นเอแม่แบบ
PCR จะดำเนินการโดยอัตโนมัติในเทอร์โมสตัมเทอร์โมสตัท - เทอร์โมมิเตอร์ (thermocycler) วงจรสามขั้นตอนซึ่งเป็นผลให้สำเนาที่ถูกต้องของส่วนที่สามารถระบุตัวได้ของดีเอ็นเอแม่แบบจะได้รับซ้ำ 30-50 ครั้งตามโปรแกรมที่กำหนดไว้ล่วงหน้าของเครื่องทำ Thermocycler ในรอบแรก oligopramers จะผสมพันธุ์กับดีเอ็นเอของแม่แบบดั้งเดิมและจากนั้น (ในรอบถัดไป) และกับโมเลกุลดีเอ็นเอสังเคราะห์ใหม่ที่พวกเขาสะสมในสารผสมปฏิกิริยา ในกรณีหลังการสังเคราะห์ดีเอ็นเอไม่จบเนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิและเมื่อถึงขยายดีเอ็นเอโพลิเมอร์พื้นที่ชายแดนซึ่งเป็นตัวกำหนดขนาดของภูมิภาคดีเอ็นเอสังเคราะห์ใหม่ภายในหนึ่งเบื่อหน่าย
เป็นวิธีการตรวจจับโมเลกุลของดีเอ็นเอที่ได้รับการใช้การอิเล็กโทรฟิเรสซิสโดยใช้วัสดุขยายที่แบ่งตามขนาดของแอมพิคอน (ผลิตภัณฑ์ขยาย)
ด้วยความช่วยเหลือของ PCR อาจเป็นไปได้ที่จะตรวจสอบไซต์ของการกลายพันธุ์ที่น่าสงสัยหรือไซต์ polymorphic โดยตรงและศึกษาถึงการมีลักษณะเฉพาะอื่น ๆ ของดีเอ็นเอ