กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอล

ในปัจจุบัน การใช้กล้องจุลทรรศน์แบบคอนโฟคัลถือเป็นวิธีหนึ่งที่มีแนวโน้มมากที่สุดสำหรับการถ่ายภาพผิวหนังในร่างกาย ซึ่งเป็นสาเหตุว่าทำไมแพทย์และตัวแทนจากสถาบันวิจัยจึงให้ความสนใจในวิธีนี้เป็นอย่างมาก

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]

ความสามารถของกล้องจุลทรรศน์แบบคอนโฟคัล

ในโรคผิวหนัง จะใช้กล้องจุลทรรศน์เลเซอร์คอนโฟคัลเพื่อ:

• การศึกษาการแทรกซึมของสารประกอบเข้าสู่ผิวหนัง (เส้นทางการแทรกซึม จลนพลศาสตร์ การกระจายตัวในผิวหนัง)
• การสังเกตการทำงานของต่อม (การกำหนดสถานะทำงานและสถานะเฉย ๆ );
• การศึกษาระบบไหลเวียนโลหิตขนาดเล็ก (รวมถึงแบบเรียลไทม์)
• การวินิจฉัยเนื้องอก

โดยไม่ต้องพูดถึงข้อดีและข้อเสียของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคัลประเภทต่างๆ ที่กล่าวข้างต้น เราทราบว่าในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคัลแบบเลเซอร์เรืองแสงได้รับความนิยมเพิ่มมากขึ้น

[ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสำหรับการตรวจผิวหนัง

กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคัลให้โอกาสอันล้ำค่าสองประการ ได้แก่ การศึกษาเนื้อเยื่อในระดับเซลล์ในสถานะที่มีกิจกรรมทางสรีรวิทยาและการสาธิตผลการศึกษา (เช่น กิจกรรมของเซลล์) ในสี่มิติ ได้แก่ ความสูง ความกว้าง ความลึก และเวลา สำหรับคุณภาพของภาพและความลึกของการศึกษา บทบาทที่สำคัญที่สุดคือความสามารถของเนื้อเยื่อในการส่งผ่านแสง กล่าวอีกนัยหนึ่งคือความโปร่งใส วิธีการใช้กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคัลไม่มีการสัมผัส ลำแสงไม่ก่อให้เกิดอันตรายหรือไม่สบายแก่ผู้ป่วยที่กำลังตรวจหรือสัตว์ทดลอง

การตรวจผิวหนังด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบคอนโฟคัลสแกนเลเซอร์ (CSLM) วิธีนี้ทำให้สามารถมองเห็นชั้นหนังกำพร้าและชั้นปุ่มของชั้นหนังแท้ได้ด้วยความละเอียดที่ใกล้เคียงกับเนื้อเยื่อวิทยา ผลการตรวจทั้งหมดจะแสดงบนจอภาพและบันทึกเป็นชุดไฟล์ภาพ (ในรูปแบบไมโครฟิล์ม (ในไดนามิกส์) หรือไมโครโฟโตกราฟ)

วิธีการนี้มีอยู่ 2 ประเภท:

• การสะท้อนแสง (CSLM) - ขึ้นอยู่กับข้อเท็จจริงที่ว่าโครงสร้างภายในเซลล์และระหว่างเซลล์ต่างๆ มีดัชนีการหักเหแสงต่างกัน ซึ่งช่วยให้ได้ภาพที่มีความคมชัด
• การเรืองแสง (fluorescence CSLM) - ใช้แสงเลเซอร์ที่ทะลุผ่านผิวหนังและกระตุ้นเอ็กโซหรือเอนโดโครโมโฟร์ในผิวหนัง ซึ่งเมื่อตอบสนองแล้วจะเริ่มปล่อยโฟตอน (หรือเรืองแสง)

ความละเอียดตามแนวนอนคือระยะห่างขั้นต่ำระหว่างจุดที่อยู่บนระนาบแนวนอน นั่นคือ ระนาบที่ขนานกับพื้นผิวผิวหนัง ความละเอียดตามแกนคือระยะห่างขั้นต่ำระหว่างจุดที่อยู่บนระนาบที่ตั้งฉากกับพื้นผิวผิวหนัง

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

ประวัติความเป็นมาของกล้องจุลทรรศน์แบบคอนโฟคัล

แนวคิดในการสร้างกล้องจุลทรรศน์ที่สามารถแสดงส่วนของเนื้อเยื่อที่มีชีวิตในระดับเซลล์ได้รับการพัฒนาอย่างจริงจังเมื่อ 130 ปีที่แล้ว องค์ประกอบหลักของกล้องจุลทรรศน์สมัยใหม่ได้รับการออกแบบในช่วงปลายศตวรรษที่ 19 โดยเป็นจานหมุนที่มีรูเล็กๆ เรียงเป็นเกลียว จานหมุนนี้ถูกประดิษฐ์ขึ้นในปี 1883 โดยนักศึกษาชาวเยอรมันชื่อ Paul Nipkow ซึ่งตั้งชื่อตามเขาว่าจานหมุน Nipkow (หรือจานหมุน Nipkow) การประดิษฐ์นี้ใช้ความสามารถของแสงที่ผ่านรูเล็กๆ ในจานหมุนและเลนส์ขยายเพื่อเจาะลึกเข้าไปในเนื้อเยื่อและส่องแสงไปยังชิ้นส่วนเซลล์ที่ระยะห่างจากพื้นผิว เมื่อจานหมุนอย่างรวดเร็ว ชิ้นส่วนเซลล์จะสร้างภาพเดียว โดยการขยับโครงสร้างออกจากหรือเข้าใกล้วัตถุ ทำให้สามารถปรับความลึกของส่วนออปติกของเนื้อเยื่อที่กำลังศึกษาได้

จนกระทั่งการถือกำเนิดของเครื่องบันทึกวิดีโอในทศวรรษที่ 1980 และคอมพิวเตอร์ที่สามารถประมวลผลภาพได้ในช่วงต้นทศวรรษที่ 1990 ทำให้สามารถสร้างและใช้งานกล้องจุลทรรศน์สมัยใหม่ที่ใช้กันในปัจจุบันได้อย่างมีประสิทธิภาพ