การวินิจฉัยโรคเริม

การวินิจฉัยของโรคเริมจะขึ้นอยู่กับการดำเนินการของการไหลไวรัสคลาสสิกในเซลล์เพาะเลี้ยงที่สำคัญอิมมูโนและวิธีการทางภูมิคุ้มกันที่ดำเนินการศึกษา colposcopic ใช้ที่ทันสมัยวิธีโมเลกุลชีวภาพ (PCR, dot-hybridization) ซึ่งช่วยให้คุณสามารถวิเคราะห์ทุกกลุ่ม herpesvirus รวมทั้ง HHV-6 และ HHV-7 ประเภทของ.

วิธีการตรวจทางห้องปฏิบัติการในการติดเชื้อ herpetic

วิธีการหลักที่มีวัตถุประสงค์เพื่อ secreting HSV หรือการตรวจจับอนุภาคไวรัสและ / หรือส่วนประกอบของพวกเขา	วิธีการเสริมเพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อ HSV ในของเหลวในร่างกายมนุษย์
การแยก HSV ในเซลล์ที่มีความสำคัญของเซลล์และสัตว์ การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนโดยตรงและภูมิคุ้มกัน ตัวเลือก MFA ทางตรงและทางอ้อม ที่ปรึกษาทางการเงิน วิธีการทางชีววิทยาระดับโมเลกุล ปฏิกิริยาการตกตะกอนของลาเท็กซ์	ปฏิกิริยาเป็นกลาง RSK การตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน HSV ที่ไม่ใช่โครงสร้าง-1,2

พบว่า 76% ของผู้ป่วยมีเริมอวัยวะเพศ (GH) ที่เกิดจาก HSV-2 และ 24% - ประเภท HSV-1 และ GG เป็น monoinfection เฉพาะที่เกิดขึ้นใน 22% ของผู้ป่วยใน 78% ของกรณีสมาคมจุลินทรีย์ถูกตรวจพบ ใน 46% ของผู้ป่วยพบ parasitocenosis ที่เกิดจากเชื้อโรคสองชนิด ได้แก่ chlamydia ใน 40% ของผู้ป่วย น้อยกว่าปกติในรอยเปื้อน gardnerella, trichomonas, gonococci.

У 27% ผู้ป่วย parasitocenosis ถูกแทนที่โดยสาม, 5,2% - สี่เชื้อโรค และบ่อยครั้งมีการรวมกันของ Chlamydia กับ Gardnerella และเชื้อราของสกุล Candida. ข้อมูลเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงความจำเป็นในการตรวจสอบอย่างละเอียดแบคทีเรียของผู้ป่วย YY เพื่อแจ้งชุดตัวแทนที่ทำให้เกิดโรคเช่นเดียวกับการศึกษาในเชิงลึกของการเกิดโรคจากการติดเชื้อผสมของระบบทางเดินปัสสาวะซึ่งจะช่วยให้การรักษาที่ซับซ้อนที่แตกต่างของการติดเชื้อ HSV.

วัสดุที่ต้องศึกษาในการแยก HSV ขึ้นอยู่กับตำแหน่งของ herpetic lesions

การ จำกัด ความพ่ายแพ้	เนื้อหา ตุ่ม	ขูดเซลล์				SMZ	ดูดซึมจากหลอดลม	ตัวอย่างการตรวจชิ้นเนื้อ	เลือด
		1	2	3	4
หนังสัตว์	+								+
ตา			+						+
องคชาต				+					+
ทวารหนัก	+				+				+
ปาก	+	+							+
ระบบประสาทส่วนกลาง	+					+		+	+
ปอด		+					+		+
ตับ								+	+
แต่กำเนิด เริม	+	+	+				+		+

วิธีการตรวจทางห้องปฏิบัติการของการติดเชื้อ cytomegalovirus

วิธีการ	เวลาที่ต้องการเพื่อให้ได้ผลลัพธ์	บันทึก
ที่เกี่ยวกับไวรัสวิทยา
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน	3 ชั่วโมง	Malodostupen
การแยกไวรัสในการเพาะเลี้ยงเซลล์ (CPD))	4-20 วัน	มาตรฐาน, ช้า
ยับยั้งการสร้างภูมิคุ้มกันของ monoglonal antibody	6 ชั่วโมง	น้อยกว่า โดยเฉพาะ
TSITOLOGICHESKIY	2-3 ชั่วโมง	น้อยกว่า โดยเฉพาะ
SEROLOGICHESKIY
RSK	2 วัน	มาตรฐาน
ssubsistence	1 วัน	ต้องใช้เวลามาก
RIF	6 ชั่วโมง	ง่าย, โดยเฉพาะ
NRIF	6 ชั่วโมง	ซับซ้อน
RIMF	6 ชั่วโมง	ซับซ้อน
IFA (IgM, TO)	6 ชั่วโมง	รวดเร็วง่าย
immunoblot	6 ชั่วโมง	แพง
อณูชีววิทยา
МГ	5-7 วัน	แพง, ต้องใช้เวลามาก
PCR	3 ชั่วโมง	แพง

วิธีการวินิจฉัยโรคเริมงูสวัด

วิธีการ วินิจฉัย	ห้องปฏิบัติการ เทคนิค
ทางอ้อม
การจัดสรร	การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อตัวอ่อนไก่สัตว์ทดลองการเพาะปลูกร่วมกับเซลล์ที่อนุญาตหรือไวรัสผู้ช่วยเหลือ
การระบุไอโซเลท	ปฏิกิริยาการเกิดปฏิกิริยาเป็นกลาง, DSC, IF, IPPE, ปฏิกิริยาของสารตกตะกอน, การเกาะติดกัน, IF
ตรง
เซลล์วิทยา	รอยเปื้อน: สี immunofluorescence
จุลกายวิภาคศาสตร์เนื้อเยื่อ	พยาธิสรีรวิทยาของเซลล์
โครงสร้าง	กล้องจุลทรรศน์อิมมูโนอิเล็กโทรนิก
การกำหนดแอนติเจน	ИФ, PIFF, RIM, IFA
การกำหนดปริมาณของแอนติบอดีในท้องถิ่น	Ig М, Ig G, Ig А: IFA, RIA
วิธีการทางชีววิทยาระดับโมเลกุล	การผสมพันธุ์โมเลกุล, PCR

การวินิจฉัยในห้องปฏิบัติการของการติดเชื้อที่เกิดจากไวรัสเริมงูสวัด

การวินิจฉัย ปัญหาที่เกิดขึ้น	วิธีการ	ผลลัพธ์ที่คาดหวัง
การติดเชื้อเฉียบพลันขั้นต้น	1	การตรวจจับหลังจาก 2 ชั่วโมง
	2	ระดับแอนติบอดีเติบโตช้า
	3	ปัจจุบัน 3 วันหลังจากการติดเชื้อ
รุนแรง ฟื้นฟู การติดเชื้อ	1	การตรวจจับ ULV ใน 2 ชั่วโมง
	2	ระดับแอนติบอดีเติบโตช้า
	4	นำเสนอ 4 วันหลังจากเกิดอาการผื่นขึ้น

1. ความมุ่งมั่นในของเหลวของ vesicles ของ WIEF;
2. cระบบทางเดินปัสสาวะ: DSC, ELISA มุ่งเป้าไปที่การระบุ
3. cEroology: ELISA มุ่งตรวจหา IgM;
4. Serology: ELISA เพื่อตรวจหา IgA, IgM.

วิธีการแสดงการตอบสนองภูมิคุ้มกันของการติดเชื้อไวรัสเริมงูสวัด

เข้าใกล้	วิธี
การตรวจวัดระดับแอนติบอดีที่เพิ่มขึ้นในเซรุ่มที่สอง	RSK, RTGA, RPGA, ปฏิกิริยาการทำให้เป็นกลาง IF, RIM, ELISA
การตรวจพบ Ig G, Ig A แอนติบอดีเฉพาะกลุ่มในตัวอย่างเซรุ่มแรก	IFA, IF, RIM, น้ำยางข้น

การตีความผลการตรวจทางซีรัมของซีรั่มผู้ป่วยต่อการติดเชื้อไวรัสเริม (ELISA)

ชื่อ การติดเชื้อ / เครื่องหมาย	เกณฑ์เฉลี่ยสำหรับการติดเชื้อ
	ผลการวิเคราะห์	การตีความ
ป้องกัน Cytomegalia-CMV IgG (1-20 Е/мл) ต่อต้าน-CMV IgM (100-300%)	บวก 1-6 บวก 6-10 บวก >10 เชิงลบ บวก 100-300 เชิงลบ <90 พิรุธ 90-100	การให้อภัย การกำเริบของโรค ระยะเฉียบพลันของโรค ไม่มีการติดเชื้อ (โรค) ระยะเฉียบพลันของโรค ทำซ้ำการวิเคราะห์หลังจาก 2-3 สัปดาห์
เริมง่าย ๆ 1,2 serotypes ต่อต้าน-HSV 1/2 ร่วมกัน. (100-900%)	บวก 100-400 บวก 400-800 บวก >800 เชิงลบ <100	การให้อภัย การกำเริบของโรค ระยะเฉียบพลันของโรค ไม่มีการติดเชื้อ (โรค)

В ตารางนี้นำเสนอวิธีการหลักในการวินิจฉัยโรคในห้องปฏิบัติการของเชื้อ herpesvirus และแนะนำให้ใช้วัสดุชีวภาพที่ศึกษาในการแยกเชื้อ HSV โดยคำนึงถึงความผิดปกติของ herpetic

ความเชื่อถือได้คือการจัดสรรเริมและ CMV ผ่านการติดเชื้อของเซลล์เพาะเลี้ยงที่มีความสำคัญ ดังนั้นในการตรวจไวรัสวิทยาของผู้ป่วย 26 รายในช่วงที่มีอาการกำเริบของโรค HSV จึงได้รับการแยกตัวจากการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่สำคัญ Vero в 23 กรณี (88,4%). В วัฒนธรรมที่ติดเชื้อก็สังเกตเห็นรูปแบบลักษณะของผล cytopathic ของ HSV - การก่อตัวของเซลล์ยักษ์ polynuclear หรือกลุ่มของโค้งมนและการเพิ่มขึ้นของจำนวนของเซลล์ในรูปแบบของกลุ่ม ใน 52,1% กรณีแล้ว 16-24 ч. หลังจากการติดเชื้อแล้วก็สามารถตรวจจับการเกิด cytopathic ของไวรัสได้ K 48-72 ชั่วโมงของการบ่มเชื้อของเชื้อที่ติดเชื้อร้อยละของวัสดุที่ก่อให้เกิดการทำลายเซลล์ที่เฉพาะเจาะจงเพิ่มขึ้นไป 87%. И เฉพาะใน 13% ของกรณีผลบวกถูกตรวจพบ 96 ชั่วโมงหลังจากการติดเชื้อและมากขึ้นหรือมีการผ่านซ้ำ.

วิธีการตรวจวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการของการติดเชื้อ herpetic ทั่วไป

วิธีการหลักในการตรวจหา (การแยก) herpesviruses, อนุภาคและส่วนประกอบของเชื้อ	วิธีการเสริมเพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสเริมในของเหลวทางชีวภาพการตรวจจับการเปลี่ยนแปลงของเอนไซม์ในซีรั่มในเลือด
การแยกไวรัสเริมในวัฒนธรรมที่มีความสำคัญของเซลล์และสัตว์ การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนโดยตรงและภูมิคุ้มกัน ตัวแปรทางตรงและทางอ้อมของวิธี immunoperoxidase รูปแบบทางตรงและทางอ้อมของวิธีแอนติบอดีเรืองแสง ตัวแปรของการทดสอบ immunosorbent ในเอนไซม์แบบ solid-phase ตัวแปรของวิธีการของการผสมผสานระหว่างโมเลกุล (DNA-DNA) ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ ปฏิกิริยาการตกตะกอนของลาเท็กซ์	ปฏิกิริยาเป็นกลาง ปฏิกิริยาตรึงกระดูกเชิงกราน ปฏิกิริยาการตกตะกอนของลาเท็กซ์ ตัวแปรทางอ้อมของวิธีการของเรืองแสงแอนติบอดี ตัวแปรทางอ้อมของวิธี immunoperoxidase ตัวแปรของการทดสอบ immunosorbent ในเอนไซม์แบบ solid-phase วิธีการของภูมิคุ้มกัน blotting วิธีการยึดแบบรัศมี การกำหนดระดับอะลานีนและแอสพาเทสอะมิโนทรานเฟอเซส

เพื่อวินิจฉัย mononucleosis ติดเชื้อ (การติดเชื้อที่เกิดจาก VEB) ใช้วิธีการทางซีรั่ม ปฏิกิริยาของ Paul-Bunnel กับเม็ดเลือดแดงของราม, titer การวินิจฉัย 1:28 и สูงขึ้นด้วยการศึกษาเพียงครั้งเดียวของซีรั่มหรือเพิ่มแอนติบอดีเพิ่มขึ้น 4 เท่าในการตรวจของชุดตรวจจับคู่ ใช้ปฏิกิริยา Goff-Bauer ด้วยการระงับ 4% ของเซลล์เม็ดเลือดแดงที่เป็นทางการของม้า ผลที่ได้จะถูกนำมาพิจารณาหลังจากผ่านไป 2 นาทีด้วยเชื้อ mononucleosis ที่ติดเชื้อปฏิกิริยานี้มีความจำเพาะเจาะจงมาก.

В ปัจจุบันมีการพัฒนาเอนไซม์ immunoassay (ELISA) เพื่อวินิจฉัยโรค mononucleosis ที่ติดเชื้อ ในกรณีนี้ IgG และ IgM แอนติบอดีในซีรั่มของผู้ป่วยจะถูกกำหนดโดยการบ่มเชื้อมันกับ lymphoblasts ที่ติดเชื้อ EBV ตามด้วยการรักษาด้วยแอนติบอดีที่เรืองแสง ในระยะเฉียบพลันของโรคแอนติบอดีต่อแอนติบอดี capsid ของไวรัสจะถูกวัดด้วย titer 1:160 и สูงกว่า.

เมื่อมีการใช้จำนวนของที่นำเข้าระบบทดสอบในเชิงพาณิชย์ที่ปรึกษาทางการเงินสามารถระบุ: แอนติบอดีเพื่อมด Egan EBV แอนติบอดีซองแอนติเจนต้นของ EBV, แอนติบอดีโดยรวมของแอนติเจนต้นของ EBV กำหนดในระยะเฉียบพลันของโรคและในนิวเคลียสและในพลาสซึมและแอนติบอดี จำกัด EBV ต้นที่กำหนดไว้ในระยะเฉียบพลันของโรคและในนิวเคลียสและในพลาสซึมของเซลล์กระโดดแอนติบอดีเพื่อ EBV ต้นแอนติเจนที่กำหนดในท่ามกลางของการเกิดโรคเฉพาะในพลาสซึมของเซลล์และแอนติบอดีต่อแอนติเจน EBV นิวเคลียร์ การใช้ระบบการทดสอบเหล่านี้ช่วยให้สามารถวินิจฉัยโรคได้หลายชนิดที่เกี่ยวกับ EBV.

หลังจากบวก ELISA เพื่อแจ้งแอนติบอดี EBV ให้ immunoblot ยืนยันการตอบสนองซึ่งตรวจสอบสถานะของแอนติบอดีเพื่อแยกโปรตีนเครื่องหมาย EBV (P-โปรตีน) นี้: P23, P54, P72 (การปรากฏตัวของโปรตีนที่แสดงให้เห็นความเป็นไปได้ของการทำสำเนา EBV) ที่พี 138. วิธีการทางห้องปฏิบัติการข้างต้นยังใช้ในการควบคุมประสิทธิภาพของการรักษา.

ความไวของวิธีการทางไวรัสวิทยา 85-100%, ความจำเพาะ 100%, ระยะเวลาการศึกษา 2-5 วัน บ่อยครั้งในทางปฏิบัติใช้วิธี immunofluorescence (PIF) โดยตรงกับ polyclonal หรือ monoclonal antibodies เทียบกับ HSV-1 และ HSV-2 วิธีการของ UIF ทำซ้ำได้อย่างง่ายดายในห้องปฏิบัติการทางคลินิกแบบดั้งเดิมจะไม่เสียค่าใช้จ่ายความไวสูงขึ้น 80%, ความจำเพาะ 90-95%. โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ Immunofluorescent เปิดเผยการปรากฏตัวของนิวเคลียสรวมคุณสมบัติทางสัณฐานวิทยาร้อยละของเซลล์ที่ติดเชื้อในรอยเปื้อนที่ scrapes urethral คลองปากมดลูกปากมดลูกทวารหนัก.

วิธีการ UIF ให้ความคิดเกี่ยวกับคุณสมบัติทางสัณฐานวิทยาของเซลล์และการเปลี่ยนแปลงในการสร้าง HSV แอนติเจน นอกเหนือจากสัญญาณที่แสดงให้เห็นถึงความเสียหายของเซลล์โดยตรงจากไวรัสเริม (การตรวจจับเรืองแสงที่เฉพาะเจาะจง) มีสัญญาณทางอ้อมของการติดเชื้อตามข้อสันนิษฐานตาม UIF:

• การรวมตัวของวัตถุนิวเคลียร์ขัดของ karyolism;
• การปรากฏตัวของที่เรียกว่า นิวเคลียส "หลุม" เมื่อมีเพียงหนึ่ง karyolemma ยังคงอยู่จากนิวเคลียสของเซลล์;
• การปรากฏตัวของการรวมภายในนิวเคลียร์ - ลูกวัว Caudry.

เมื่อตั้งค่า UIF แพทย์จะได้รับการตรวจประเมินสถานะของเซลล์ที่ติดเชื้อซึ่งเราใช้เพื่อประเมินประสิทธิภาพของการรักษาด้วยไวรัสด้วย acyclovir (AC) ดังนั้นผู้ป่วย 80 รายที่มีเริมอวัยวะเพศที่เรียบง่าย (GG) จึงถูกตรวจสอบโดยวิธี UIF ในการเปลี่ยนแปลง แสดงให้เห็นว่าถ้าก่อนการรักษาด้วย acyclovir ในผู้ป่วย 88% มีเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่ติดเชื้อสูง (50-75% и จากการศึกษาพบว่ามีผู้ป่วยร้อยละ 44 มีเซลล์ที่มีสุขภาพดีมีผู้ป่วยร้อยละ 31 มีผู้ป่วยติดเชื้อเพียง 1 รายและร้อยละ 25 มีเซลล์ที่ติดเชื้อร้อยละ 25.

เนื้อหาของเซลล์ที่ติดเชื้อในรอยเปื้อน (PIF reaction) ของผู้ป่วยเริมที่อวัยวะเพศด้วย acyclovir

ระยะเวลาของโรค	เปอร์เซ็นต์ในรอยเปื้อน
	เซลล์ที่ติดเชื้อ					ปกติ เซลล์
	มากกว่า 75%	50-75%	40-50%	10%	เซลล์เดี่ยวใน n / sp
อาการกำเริบ (ก่อนการรักษา)	25%	63%	12%
	(20)	(50)	(10)
การให้อภัย (หลังการรักษา))				25%	31%	44%
				(20)	(25)	(35)

การใช้ UIF เป็นเวลาหลายปีและมีการใช้วิธีการผสมแบบดอต (dot-hybridization) เกือบ 100% กรณีบังเอิญผลการศึกษา มันควรจะตั้งข้อสังเกตว่าเพื่อเพิ่มความน่าเชื่อถือของการวินิจฉัยของ GH เฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่มีการแสดงอาการและรูปแบบ malomanifestnyh ของโรคเริมก็จะแนะนำให้ใช้ 2-3 วิธีการของการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อตรวจสอบหญิงตั้งครรภ์และหญิงที่มีประวัติคลอดบุตรด้อยโอกาสคนที่มีการวินิจฉัยโรคทางนรีเวชไม่ระบุรายละเอียด.

ดังนั้นเมื่อมีการตรวจวินิจฉัย PCR จากการติดเชื้อแบคทีเรียและเชื้อแบคทีเรียของระบบทางเดินปัสสาวะจะต้องมีการประเมินผลบวกที่ได้จากการพิจารณาอาการของโรคที่เฉพาะเจาะจง ถ้าตรวจพบ Chlamydia ด้วย PCR แล้วในกรณีนี้คุณสามารถพูดถึงการติดเชื้อและแก้ปัญหาในการรักษาได้ ในกรณีที่มีการตรวจสอบของไมโคพลาสมา (ureaplasmas) เป็นเชื้อโรคฉวยโอกาสเพื่อยืนยันการวินิจฉัยจะต้องดำเนินวัฒนธรรมการศึกษาต่อที. อีวัสดุพืชที่มีความสำคัญจากผู้ป่วยไปยังเซลล์เพาะเลี้ยง เฉพาะเมื่อได้ผลบวกในการวิเคราะห์วัฒนธรรมเราสามารถพูดเกี่ยวกับห้องปฏิบัติการยืนยันการวินิจฉัย mycoplasmosis วิธีเดียวกันนี้จะช่วยในการตรวจสอบความไวของ mycoplasmas ที่แยกได้จากรูปแบบยาที่ใช้บ่อย (antibiotics, fluoroquinolones เป็นต้น).).

บางทีการติดเชื้อในระยะเดียวกับไวรัสหลายตัวในครอบครัว Nehrresviridae. บ่อยครั้งที่เราตรวจพบการติดเชื้อของผู้ป่วยรายหนึ่งที่มีไวรัส HSV-1, HSV-2 และ CMV การติดเชื้อไวรัสเริมหลายครั้งมากขึ้นคือผู้ป่วยที่มีอาการทางคลินิกและห้องปฏิบัติการในผู้ป่วยที่มีอาการทางระบบทางเดินปัสสาวะผู้ติดเชื้อเอชไอวี ดังนั้นจึงแสดงให้เห็นว่าความผิดปกติทางคลินิกและภูมิคุ้มกันบกพร่องที่เกิดขึ้นกับการติดเชื้อเอชไอวีจะมาพร้อมกับการเพิ่มจำนวนของเชื้อ herpesviruses ที่ตรวจพบโดยการผสมข้ามโมเลกุล ในขั้นตอนนี้มีความหมายมากที่สุดคือการตรวจหาดีเอ็นเอของ HSV-1, CMV และ HHV-6.

[1], [2], [3]