PCR เป็นวิธีการวินิจฉัยโรคทางพันธุกรรม

PCR เป็นความสำเร็จใหม่ของพันธุศาสตร์ระดับโมเลกุล ซึ่งใช้สำหรับการขยาย DNA และช่วยให้สามารถขยาย DNA เฉพาะบางส่วน (เช่น ยีนใดๆ ที่สนใจ) ได้อย่างรวดเร็วในหลอดทดลองมากกว่า 200,000 ครั้ง ในการทำปฏิกิริยา เพียงแค่มีวัสดุ DNA จากเซลล์เดียวก็เพียงพอแล้ว ปริมาณ DNA ที่ขยายโดย PCR นั้นมากพอที่จะย้อม DNA ได้อย่างง่ายดาย (ไม่จำเป็นต้องใช้โพรบกัมมันตภาพรังสีหลังอิเล็กโทรโฟรีซิส) ข้อกำหนดเบื้องต้นสำหรับการทำ PCR คือ ความรู้เกี่ยวกับลำดับนิวคลีโอไทด์ของส่วน DNA ที่ขยาย เพื่อคัดเลือกไพรเมอร์ที่สังเคราะห์ขึ้นโดยเทียมอย่างถูกต้อง

ปัจจุบัน PCR เป็นกระบวนการหลอดเดียวที่ประกอบด้วยวงจรซ้ำของการขยาย (การสืบพันธุ์ การคัดลอก) ของลำดับโมเลกุล DNA เฉพาะเพื่อให้ได้สำเนาจำนวนมากเพียงพอที่จะระบุได้ด้วยอิเล็กโทรโฟเรซิส หนึ่งในส่วนประกอบสำคัญของปฏิกิริยาคือ "ไพรเมอร์" ซึ่งเป็นโอลิโกนิวคลีโอไทด์สังเคราะห์ที่ประกอบด้วยเบส 20-30 ตัวที่เสริมกับ "ไซต์" (พื้นที่) ของการแอนนีลลิ่ง (การยึด) บนพื้นที่ที่ระบุของเมทริกซ์ DNA

PCR เกิดขึ้นโดยอัตโนมัติในเทอร์โมสตัทที่ตั้งโปรแกรมได้ - วงจรความร้อน (เครื่องขยายสัญญาณ) วงจรสามขั้นตอนซึ่งส่งผลให้ได้สำเนาที่แน่นอนของส่วนที่ระบุของดีเอ็นเอเมทริกซ์ จะถูกทำซ้ำ 30-50 ครั้งตามโปรแกรมวงจรความร้อนที่ระบุ ในรอบแรก โอลิโกไพรเมอร์จะไฮบริดกับดีเอ็นเอเมทริกซ์ดั้งเดิม จากนั้น (ในรอบต่อมา) กับโมเลกุลดีเอ็นเอที่สังเคราะห์ใหม่ในขณะที่สะสมในส่วนผสมของปฏิกิริยา ในกรณีหลัง การสังเคราะห์ดีเอ็นเอจะสิ้นสุดลงไม่ใช่เป็นผลจากการเปลี่ยนแปลงของอุณหภูมิ แต่เมื่อถึงขีดจำกัดของดีเอ็นเอโพลีเมอเรสของส่วนที่ขยายสัญญาณ ซึ่งจะกำหนดขนาดของส่วนดีเอ็นเอที่สังเคราะห์ใหม่ด้วยความแม่นยำหนึ่งนิวคลีโอไทด์

การใช้อิเล็กโทรโฟเรซิสเป็นวิธีการตรวจจับโมเลกุล DNA ที่ได้ โดยจะช่วยแยกวัสดุที่ขยายตามขนาดของแอมพลิคอน (ผลิตภัณฑ์จากการขยาย)

PCR สามารถใช้ตรวจสอบตำแหน่งของการกลายพันธุ์หรือตำแหน่งโพลีมอร์ฟิกที่ต้องสงสัยโดยตรง รวมถึงศึกษาการมีอยู่ของลักษณะเฉพาะอื่นๆ ของ DNA

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]