โรคอะไมลอยโดซิสในลำไส้: การวินิจฉัยและการยืนยัน

ภาวะอะไมลอยโดซิสในลำไส้ หมายถึงการสะสมของเส้นใยอะไมลอยด์ในผนังทางเดินอาหาร ซึ่งมักเป็นส่วนหนึ่งของภาวะอะไมลอยโดซิสทั่วร่างกาย อาการทางคลินิกมักไม่จำเพาะเจาะจง ดังนั้นการวินิจฉัยจึงแทบจะไม่เกิดขึ้นจากอาการหรือการตรวจเลือดเพียงอย่างเดียวโดยปราศจากการยืนยันทางสัณฐานวิทยา [1]

หลักการสำคัญของการยืนยันนั้นเหมือนกันสำหรับทุกรูปแบบ: ประการแรก จำเป็นต้องพิสูจน์การมีอยู่ของอะไมลอยด์ในเนื้อเยื่อ จากนั้นจึงกำหนดโปรตีนที่เป็นส่วนประกอบของอะไมลอยด์ ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญ เนื่องจากกลยุทธ์การรักษาแตกต่างกันอย่างมากสำหรับโรคอะไมลอยด์ชนิดสายโซ่เบาของอิมมูโนโกลบูลิน โรคอะไมลอยด์ที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบเรื้อรัง และรูปแบบทางพันธุกรรม [2]

สำหรับลำไส้ ความแม่นยำ "สองเท่า" มีความสำคัญเป็นพิเศษ เนื่องจากโรคนี้สามารถเลียนแบบโรคลำไส้อักเสบ โรคเซลิแอค การติดเชื้อเรื้อรัง ลำไส้ใหญ่อักเสบจากภาวะขาดเลือด ความผิดปกติในการทำงาน และโรคลำไส้ที่เกิดจากยา ข้อผิดพลาดในการพิมพ์อาจนำไปสู่การรักษาที่ไม่เหมาะสมและเสียเวลา [3]

การวินิจฉัยสมัยใหม่นั้นอาศัยลำดับของความสงสัยทางคลินิก การตรวจชิ้นเนื้อแบบเจาะจง การย้อมสีคองโกเรดด้วยโพลาไรเซชัน จากนั้นจึงทำการจำแนกประเภทอะไมลอยด์ด้วยอิมมูโนฮิสโตเคมีหรือแมสสเปกโทรเมตรี ตามด้วยการประเมินการมีส่วนร่วมของระบบและการค้นหาสาเหตุพื้นฐานของอะไมลอยโดซิสชนิดเฉพาะ [4]

ตารางที่ 1. สิ่งที่ถือว่าเป็นการยืนยันการวินิจฉัยในทางปฏิบัติ [5]

ระดับ	ควรจะได้รับอะไรบ้าง	สิ่งนี้พิสูจน์อะไร?
1	อะไมลอยด์ในชิ้นเนื้อตรวจวินิจฉัย ย้อมติดสีคองโกเรด และแสดงการเรืองแสงลักษณะเฉพาะเมื่อมองด้วยแสงโพลาไรซ์	ข้อเท็จจริงเกี่ยวกับอะไมลอยโดซิส
2	การจำแนกประเภทโปรตีนอะไมลอยด์ (เช่น ไลท์เชน เซรั่มอะไมลอยด์เอ ทรานส์ไทเรติน และอื่นๆ)	โรคอะไมลอยโดซิสชนิดใด และต้องใช้การรักษาขั้นพื้นฐานอะไรบ้าง?
3	การยืนยันความเสียหายของระบบและอวัยวะ รวมถึงการค้นหาแหล่งที่มาของโปรตีน	การวินิจฉัยและแผนการรักษาที่ครบถ้วน

ควรสงสัยว่ามีภาวะอะไมลอยโดซิสในลำไส้เมื่อใด?

ความสงสัยจะเพิ่มสูงขึ้นเมื่อมีอาการทางลำไส้เรื้อรังร่วมกับสัญญาณของกระบวนการทั่วร่างกาย โดยทั่วไปแล้ว ภาวะอะไมลอยโดซิสในระบบทางเดินอาหารจะมีลักษณะเฉพาะคือ ท้องเสียเรื้อรัง การดูดซึมสารอาหารผิดปกติ น้ำหนักลด คลื่นไส้ ปวดท้อง ท้องอืด และการเคลื่อนไหวผิดปกติ รวมถึงภาวะลำไส้อุดตันเทียม [6]

อาการทางคลินิกที่สำคัญคืออาการทางลำไส้ที่เกิดขึ้นร่วมกับภาวะเสี่ยงที่ทราบ สำหรับโรคอะไมลอยโดซิสชนิด AL มักจะมีตัวบ่งชี้ของโรคเซลล์พลาสมาและความเสียหายต่อหัวใจ ไต และเส้นประสาทส่วนปลาย สำหรับโรคอะไมลอยโดซิสชนิด AA มักจะมีโรคอักเสบเรื้อรังในระยะยาวและมีสัญญาณของการอักเสบเรื้อรัง [7]

อาการสำคัญของภาวะลำไส้สูญเสียโปรตีน ได้แก่ อาการบวมน้ำ ระดับอัลบูมินต่ำโดยไม่มีอาการกลุ่มอาการเนโฟรติกที่เด่นชัดและภาวะตับแข็งรุนแรง และอาการท้องเสียเรื้อรัง อะไมลอยด์สามารถสะสมรอบหลอดเลือดและในชั้นใต้เยื่อบุผิว ทำให้เกิดการรบกวนของสิ่งกีดขวางและการระบายน้ำเหลือง ซึ่งส่งผลให้เกิดการสูญเสียโปรตีน [8]

เบาะแสเพิ่มเติม ได้แก่ เลือดออกและภาวะโลหิตจาง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่มีเลือดออกใต้เยื่อบุผิวหลายจุดและหลอดเลือดเปราะบาง ภาพที่ได้จากการส่องกล้องอาจแตกต่างกันไป ดังนั้นหากยังคงสงสัยอยู่ การตรวจชิ้นเนื้อด้วยการย้อมสีที่เหมาะสมจึงมีความสำคัญอย่างยิ่ง [9]

ตารางที่ 2 อาการและเบาะแสทางคลินิกที่เพิ่มโอกาสในการเกิดอะไมลอยโดซิสในลำไส้ [10]

การสำแดง	สิ่งที่น่าตกใจ	ทำไมเรื่องนี้ถึงสำคัญ?
ท้องเสียต่อเนื่องนานกว่า 4 สัปดาห์ และไม่ตอบสนองต่อการรักษาตามมาตรฐาน	ความเพียรพยายามและความก้าวหน้า	โรคอะไมลอยโดซิส มักมีอาการคล้ายคลึงกับสาเหตุอื่นๆ ของอาการท้องเสียเรื้อรัง
น้ำหนักลด สัญญาณของภาวะดูดซึมสารอาหารบกพร่อง	ภาวะขาดสารอาหาร, อุจจาระเป็นไขมัน, อ่อนเพลีย	รอยโรคในลำไส้เล็กและการดูดซึมสารอาหารผิดปกติ
อาการบวมน้ำร่วมกับระดับอัลบูมินต่ำ	โรคลำไส้สูญเสียโปรตีน	สถานการณ์ทั่วไปในกรณีที่ผนังลำไส้ได้รับความเสียหาย
เลือดออก, โลหิตจางจากการขาดธาตุเหล็ก	อาการกำเริบซ้ำ หรือเลือดออกภายในช่องคลอด	ความเปราะบางของหลอดเลือดและการแทรกซึมของเยื่อบุ
สัญญาณของภาวะอะไมลอยโดซิสทั่วร่างกาย	ไต หัวใจ เส้นประสาท ตับ	อาการทางลำไส้มักเป็นส่วนหนึ่งของกระบวนการที่เกิดขึ้นทั่วร่างกาย

การตรวจคัดกรองก่อนการตัดชิ้นเนื้อเพื่อตรวจ: อะไรคือสิ่งที่ช่วยชี้นำการวินิจฉัยได้อย่างแท้จริง

การทดสอบเบื้องต้นไม่ได้ยืนยันภาวะอะไมลอยโดซิสโดยตรง แต่จะช่วยประเมินความรุนแรง ระบุภาวะแทรกซ้อน และเลือกวิธีการวินิจฉัยที่เหมาะสม การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วน การตรวจทางชีวเคมีที่มีอัลบูมินและอิเล็กโทรไลต์ ระดับธาตุเหล็ก เครื่องหมายการอักเสบ และการประเมินการทำงานของไตและตับเป็นสิ่งที่มีประโยชน์ [11]

ในกรณีที่มีอาการท้องเสียและสงสัยว่ามีการดูดซึมผิดปกติ การประเมินการสูญเสียโปรตีนและไขมันถือว่าเหมาะสม เช่นเดียวกับการตรวจอุจจาระเบื้องต้นเพื่อแยกการติดเชื้อ ขึ้นอยู่กับบริบททางคลินิก ขั้นตอนเหล่านี้จำเป็นเพื่อหลีกเลี่ยงการพลาดสาเหตุที่พบบ่อยกว่าของอาการท้องเสียเรื้อรัง และการตีความผลการตรวจทุกอย่างว่าเป็นอะไมลอยโดซิส [12]

หากภาพทางคลินิกมีลักษณะคล้ายกับโรคอะไมลอยโดซิส AL ทั่วร่างกาย ควรแนะนำให้ค้นหาโปรตีนโมโนโคลนอลควบคู่ไปกับการตรวจระบบทางเดินอาหารทันที ได้แก่ การตรวจอิมมูโนฟิกเซชันในซีรั่มและปัสสาวะ รวมถึงการวิเคราะห์สายโซ่เบาอิสระในซีรั่ม การทดสอบเหล่านี้ไม่ได้ทดแทนการตรวจชิ้นเนื้อลำไส้ แต่จะช่วยเพิ่มความน่าจะเป็นก่อนการทดสอบและเร่งการจำแนกประเภทที่แม่นยำได้อย่างมีนัยสำคัญ [13]

หากสงสัยว่าเป็นโรคอะไมลอยโดซิสทั่วร่างกาย การตรวจชิ้นเนื้อจากเนื้อเยื่อที่เข้าถึงได้ เช่น การดูดไขมันใต้ผิวหนัง มักจะเป็นประโยชน์สำหรับการยืนยันเบื้องต้น วิธีนี้รุกล้ำน้อยกว่าการตรวจชิ้นเนื้อจากอวัยวะ แต่ความไวขึ้นอยู่กับชนิดของอะไมลอยด์และปริมาณอะไมลอยด์ทั้งหมด ดังนั้นผลลัพธ์ที่เป็นลบไม่ได้หมายความว่าไม่มีโรค และหากสงสัยอย่างมาก จำเป็นต้องตรวจชิ้นเนื้อจากอวัยวะที่ได้รับผลกระทบ [14]

ตารางที่ 3. ชุดการวินิจฉัยเบื้องต้นสำหรับภาวะอะไมลอยโดซิสในลำไส้ที่สงสัย [15]

เป้า	การตรวจสอบ	มันให้ประโยชน์อะไรบ้าง?
ประเมินภาวะแทรกซ้อน	ตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วน ตรวจระดับอัลบูมิน อิเล็กโทรไลต์ และการทำงานของตับและไต	ภาวะโลหิตจาง, ภาวะอัลบูมินในเลือดต่ำ, ความผิดปกติของอิเล็กโทรไลต์
สนับสนุนข้อสงสัยเกี่ยวกับกระบวนการที่เป็นระบบ	ตัวบ่งชี้การอักเสบ การประเมินอวัยวะที่เกี่ยวข้อง	ช่วยแยกแยะความแตกต่างระหว่างภาวะอักเสบและความรุนแรงของอาการ
อย่าพลาดตัวเลือก AL	การตรวจหาโปรตีนด้วยวิธีอิมมูโนฟิกเซชันในซีรั่มและปัสสาวะ พบว่าเป็นสายโซ่เบาอิสระ	ค้นหาแหล่งโปรตีนโมโนโคลนอล
การยืนยันภาวะอะไมลอยโดซิสทั่วร่างกายอย่างรวดเร็วและไม่รุกรานร่างกาย	การดูดไขมันใต้ผิวหนังด้วยการย้อมสีคองโกเรด	การตรวจคัดกรองภาวะอะไมลอยโดซิสทั่วร่างกาย แต่ผลตรวจอาจไม่เป็นลบเสมอไป
ตัดสินใจเกี่ยวกับการตรวจชิ้นเนื้อลำไส้	แผนการปรึกษาแพทย์ผู้เชี่ยวชาญด้านระบบทางเดินอาหารและการส่องกล้องตรวจลำไส้	การเลือกบริเวณและปริมาตรของชิ้นเนื้อที่จะทำการตัดตรวจ

การยืนยันผลในลำไส้: การส่องกล้องและการตัดชิ้นเนื้อไปตรวจ

มาตรฐานทองคำสำหรับการยืนยันภาวะอะไมลอยโดซิสในระบบทางเดินอาหารคือการตรวจชิ้นเนื้อเยื่อบุผิวด้วยการย้อมสีคองโกเรดและการประเมินด้วยแสงโพลาไรซ์ การศึกษาทางรังสีวิทยาอาจบ่งชี้ถึงรอยโรคหรือภาวะแทรกซ้อนจากการเคลื่อนไหวผิดปกติ แต่เพียงอย่างเดียวไม่สามารถยืนยันภาวะอะไมลอยโดซิสได้ [16]

การเลือกวิธีการส่องกล้องขึ้นอยู่กับอาการ หากสงสัยว่ามีรอยโรคในลำไส้ส่วนบน จะทำการส่องกล้องตรวจหลอดอาหาร กระเพาะอาหาร และลำไส้เล็กส่วนต้นพร้อมตัดชิ้นเนื้อไปตรวจ หากมีอาการที่ลำไส้ใหญ่ จะทำการส่องกล้องตรวจลำไส้ใหญ่พร้อมตัดชิ้นเนื้อไปตรวจ ในภาวะอะไมลอยโดซิสทั่วร่างกาย การสะสมของสารอาจเกิดขึ้นได้หลายจุด ดังนั้นจึงนิยมตัดชิ้นเนื้อไปตรวจหลายจุดแม้ว่าจะมีการเปลี่ยนแปลงที่มองเห็นได้เพียงเล็กน้อยก็ตาม [17]

โดยทั่วไปแล้ว ผลการวินิจฉัยจากการตรวจชิ้นเนื้อถือว่าสูงในลำไส้เล็กส่วนต้น รองลงมาคือกระเพาะอาหารและลำไส้ใหญ่ แม้ว่าผลลัพธ์จะแตกต่างกันไปตามประชากรและเทคนิคก็ตาม การศึกษาเกี่ยวกับการตรวจชิ้นเนื้อในระบบทางเดินอาหารแสดงให้เห็นว่ามีการตรวจพบการสะสมของสารในลำไส้เล็กส่วนต้นและทวารหนักบ่อยครั้ง ดังนั้นบริเวณเหล่านี้จึงมักถูกพิจารณาว่ามีความสำคัญเป็นอันดับแรกในกรณีที่มีอาการท้องเสียที่ไม่ทราบสาเหตุและสงสัยว่ามีกระบวนการทางระบบ [18]

ประเด็นเชิงปฏิบัติอีกประการหนึ่งเกี่ยวข้องกับความลึกของการสะสม สำหรับอะไมลอยโดซิสบางรูปแบบ การสะสมอาจเด่นชัดในชั้นใต้เยื่อบุและรอบหลอดเลือด ดังนั้นการตรวจชิ้นเนื้อแบบ "บาง" ที่ผิวเผินบางครั้งอาจให้ผลลบเท็จ นี่เป็นข้อโต้แย้งหนึ่งที่สนับสนุนการเก็บตัวอย่างที่มีคุณภาพสูงหลายตัวอย่าง และหากยังคงสงสัยอยู่ ให้ทำการส่องกล้องซ้ำด้วยเทคนิคที่ละเอียดขึ้น [19]

หากมีข้อสงสัยสูงมากและผลการตรวจชิ้นเนื้อเป็นลบ ควรพิจารณาปัจจัยสามประการใหม่ ได้แก่ ความแม่นยำของการย้อมสีคองโกเรดและการอ่านผล ความเพียงพอของตัวอย่าง และความเป็นไปได้ในการตรวจชิ้นเนื้อจากเนื้อเยื่ออื่น รวมถึงไขมันใต้ผิวหนังหรืออวัยวะนอกลำไส้ที่ได้รับผลกระทบ บทวิจารณ์ระบุว่าผู้ป่วยบางรายอาจมีอาการทางคลินิกของอะไมลอยโดซิสในระบบทางเดินอาหารแม้ว่าผลการตรวจชิ้นเนื้อจะเป็นลบ ซึ่งจำเป็นต้องใช้วิธีการวินิจฉัยที่ครอบคลุมมากขึ้นแทนที่จะตัดโรคนี้ออกไปโดยอัตโนมัติ [20]

ตารางที่ 4. ตำแหน่งที่จะทำการตรวจชิ้นเนื้อหากสงสัยว่ามีอะไมลอยโดซิสในลำไส้ [21]

สถานการณ์	บริเวณที่มีความสำคัญในการตรวจชิ้นเนื้อ	ทำไม
ท้องเสียเรื้อรัง ภาวะดูดซึมสารอาหารบกพร่อง	ลำไส้เล็กส่วนต้นและกระเพาะอาหาร	มักให้ผลการวินิจฉัยที่แม่นยำสูงในส่วนบนของลำตัว
มีเลือดปนในอุจจาระ, ภาวะโลหิตจาง, การเปลี่ยนแปลงของอุจจาระ	ลำไส้ใหญ่และทวารหนัก	อาจเกิดการสะสมของสารในหลอดเลือดและมีเลือดออกได้
สงสัยว่าเกิดกระบวนการผิดปกติในระบบร่างกายโดยไม่ทราบตำแหน่งที่แน่ชัด	การตัดชิ้นเนื้อหลายชิ้นจากหลายส่วน	โรคอะไมลอยโดซิสสามารถเกิดขึ้นได้หลายจุด
ผลลัพธ์เชิงลบที่น่าสงสัยอย่างมาก	ทำการตัดชิ้นเนื้อไปตรวจซ้ำเพื่อตรวจสอบความลึกและคุณภาพให้ชัดเจน	อาจเกิดผลลบเท็จได้เนื่องจากการกระจายตัวใต้เยื่อบุผิว

การยืนยันทางสัณฐานวิทยาและการจำแนกประเภทของอะไมลอยด์

เกณฑ์ทางสัณฐานวิทยาแบบคลาสสิกคือการย้อมสีคองโกเรดซึ่งมีลักษณะเรืองแสงสีเขียวอมฟ้าภายใต้แสงโพลาไรซ์ เกณฑ์นี้ยังคงเป็นเกณฑ์อ้างอิง แต่คุณภาพของผลลัพธ์ขึ้นอยู่กับการเตรียมตัวอย่างและประสบการณ์ของผู้ตีความ ดังนั้นในกรณีที่คลุมเครือ การตรวจสอบซ้ำในห้องปฏิบัติการเฉพาะทางจึงเป็นสิ่งจำเป็น [22]

การย้อมสีคองโกเรดตอบคำถามว่า "มีอะไมลอยด์หรือไม่" แต่ให้ข้อมูลเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับ "อะไมลอยด์ชนิดใด" เมื่อระบุการสะสมแล้ว จำเป็นต้องมีการจำแนกประเภทโปรตีนไฟบริล เนื่องจากรูปแบบเดียวกันในลำไส้สามารถพบได้ใน AL, AA, ATTR และชนิดที่หายากอื่นๆ และการรักษาขึ้นอยู่กับชนิด [23]

ในทางปฏิบัติ สามารถทำการวิเคราะห์ประเภทโดยใช้อิมมูโนฮิสโตเคมีร่วมกับแอนติบอดีหลายชนิด อย่างไรก็ตาม วิธีนี้ต้องอาศัยประสบการณ์และบางครั้งอาจให้ผลลัพธ์ที่ไม่ชัดเจนเนื่องจากการย้อมสีพื้นหลังและปฏิกิริยาข้ามสายพันธุ์ ดังนั้น การวิเคราะห์ประเภทโปรตีโอมิกส์ด้วยเลเซอร์ไมโครดิสเซกชันและแมสสเปกโทรเมตรี ซึ่งช่วยให้สามารถระบุโปรตีนอะไมลอยด์ได้หลากหลายชนิดในการวิเคราะห์เพียงครั้งเดียว จึงได้รับการพิจารณามากขึ้นเรื่อยๆ ว่าเป็นแนวทางที่เหมาะสมกว่า [24]

การตรวจวิเคราะห์ด้วยแมสสเปกโตรเมตริกเหมาะสำหรับการตรวจชิ้นเนื้อและการดูดไขมันใต้ผิวหนัง และการศึกษาต่างๆ ได้แสดงให้เห็นถึงความไวและความจำเพาะสูงสำหรับการวินิจฉัยและการจำแนกประเภทของอะไมลอยโดซิสในระบบ วิธีนี้มีประโยชน์อย่างยิ่งเมื่อการตรวจทางอิมมูโนฮิสโตเคมีให้ผลที่ไม่ชัดเจนหรือลักษณะทางคลินิกไม่สอดคล้องกับประเภทที่สงสัย [25]

หากสงสัยว่าเป็นโรคอะไมลอยโดซิสทางพันธุกรรม การตรวจวิเคราะห์จะเสริมด้วยการทดสอบทางพันธุกรรม เนื่องจากการกลายพันธุ์เฉพาะและการให้คำปรึกษาแก่ครอบครัวมีความสำคัญสำหรับโรคทางพันธุกรรมหลายชนิด การปฏิเสธโรคทางพันธุกรรมโดยอาศัยลักษณะทางคลินิกเพียงอย่างเดียวมีความเสี่ยง หากการตรวจวิเคราะห์เผยให้เห็นโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับโรคทางพันธุกรรม [26]

ตารางที่ 5 วิธีการยืนยันและจำแนกประเภทอะไมลอยด์: ข้อดีและข้อจำกัด [27]

วิธี	สิ่งที่ยืนยัน	จุดแข็ง	ข้อจำกัด
คองโกเรด พลัส โพลาไรเซชัน	การมีอยู่ของอะไมลอยด์	การเข้าถึง, มาตรฐานแบบคลาสสิก	อาจเกิดข้อผิดพลาดทางเทคนิคและแสงสว่างไม่เพียงพอได้
การตรวจทางอิมมูโนฮิสโตเคมีโดยใช้แอนติบอดีหลายชนิด	อะไมลอยด์ชนิดใด	เข้าถึงได้ง่ายกว่าโปรตีโอมิกส์	สีไม่ชัดเจน ต้องตรวจสอบเพิ่มเติม
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนภูมิคุ้มกัน	อะไมลอยด์ชนิดใด	มีความจำเพาะสูงและคุณภาพดี	สินค้ามีจำนวนจำกัด
การตัดชิ้นเนื้อด้วยเลเซอร์ร่วมกับการวิเคราะห์มวลสารด้วยสเปกโทรเมตรี	ชนิดของอะไมลอยด์ที่แน่นอน	วิเคราะห์ครั้งเดียวใช้ได้กับหลายประเภท ความแม่นยำสูง	ความพร้อมให้บริการและค่าใช้จ่ายขึ้นอยู่กับห้องปฏิบัติการ
การตรวจทางพันธุกรรม	รูปแบบทางพันธุกรรม	ยืนยันการกลายพันธุ์และประเภทของโรค	ไม่สามารถใช้แทนการยืนยันเนื้อเยื่อของอะไมลอยด์ได้

การยืนยันรูปแบบระบบและการค้นหาสาเหตุที่แท้จริงหลังจากตรวจพบอะไมลอยด์

หลังจากยืนยันลักษณะทางสัณฐานวิทยาและจำแนกประเภทของอะไมลอยด์แล้ว ขั้นตอนต่อไปคือการพิสูจน์ว่าเป็นโรคที่มีนัยสำคัญทางคลินิก ประเมินความเสียหายของอวัยวะ และระบุแหล่งที่มาของโปรตีน สำหรับรูปแบบระบบ สิ่งสำคัญไม่เพียงแต่ต้องค้นหาอะไมลอยด์ในเนื้อเยื่อ "ทางอ้อม" เท่านั้น แต่ยังต้องเชื่อมโยงกับอาการของอวัยวะและประเภทที่เฉพาะเจาะจงด้วย [28]

ใน AL amyloidosis จำเป็นต้องมีการยืนยันโคลนเซลล์พลาสมา การวินิจฉัยเกี่ยวข้องกับการตรวจอิมมูโนฟิกเซชันของซีรั่มและปัสสาวะ การวิเคราะห์สายโซ่เบาอิสระ จากนั้น หากจำเป็น ให้ทำการตรวจไขกระดูกและประเมินความเสียหายของอวัยวะ การกำหนดโปรตีนโมโนโคลนอลพร้อมกันมีความสำคัญอย่างยิ่งเพื่อหลีกเลี่ยงความสับสนระหว่าง AL amyloidosis และ transthyretin variant หรือ AA amyloidosis [29]

ในโรคอะไมลอยโดซิสชนิด AA ปัญหาสำคัญคือแหล่งที่มาของการอักเสบเรื้อรังและการสัมผัสกับระดับอะไมลอยด์เอในซีรั่มที่สูงเป็นเวลานาน ดังนั้นหลังจากตรวจหาชนิด AA แล้ว จึงต้องค้นหาโรคอักเสบที่ยังคงดำเนินอยู่ การติดเชื้อเรื้อรัง หรือภาวะอื่นๆ ที่ทำให้เกิดการตอบสนองต่อการอักเสบ และประเมินขอบเขตความเสียหายของอวัยวะไปพร้อมกัน [30]

หากการพิมพ์บ่งชี้ถึงอะไมลอยด์ทรานส์ไทเรติน จำเป็นต้องแยกแยะความแตกต่างระหว่างรูปแบบทางพันธุกรรมและรูปแบบปกติ ซึ่งโดยทั่วไปเกี่ยวข้องกับการทดสอบทางพันธุกรรมและการประเมินการมีส่วนร่วมของหัวใจและเส้นประสาทส่วนปลาย เพื่อยืนยันประเภททรานส์ไทเรติน การพิมพ์เนื้อเยื่อยังคงเป็นวิธีการหลัก ในขณะที่พันธุศาสตร์ช่วยปรับปรุงรูปแบบให้ละเอียดขึ้น [31]

การประเมินการมีส่วนร่วมของระบบจะถูกปรับให้เหมาะสมกับลักษณะทางคลินิก และส่วนใหญ่มักจะรวมถึงการตรวจหัวใจ ไต ตับ และระบบประสาท มีอัลกอริทึมการถ่ายภาพและไบโอมาร์กเกอร์เฉพาะสำหรับหัวใจ ซึ่งช่วยยืนยันการมีส่วนร่วมและสนับสนุนประเภทของอะไมลอยโดซิสทางอ้อม แต่การจำแนกประเภทอะไมลอยด์ยังคงเป็นกุญแจสำคัญในการเลือกวิธีการรักษา [32]

ตารางที่ 6. สิ่งที่ต้องทดสอบหลังจากยืนยันอะไมลอยด์ในลำไส้เพื่อกำหนดประเภทและสาเหตุที่แท้จริง [33]

ประเภทผู้ต้องสงสัย	แหล่งโปรตีนหลัก	ขั้นตอนการยืนยันขั้นพื้นฐาน	สิ่งที่สำคัญอย่างยิ่งและไม่ควรพลาด
อัล	สายโซ่แสงโมโนโคลนอล	การตรวจหาอิมมูโนฟิกเซชันของซีรั่มและปัสสาวะ, สายโซ่แสงอิสระ, การประเมินโคลนเซลล์พลาสมา	การเข้าใจผิดว่าโรคอะไมลอยโดซิสจากทรานส์ไทเรตินเป็นโรค AL และในทางกลับกัน
เอเอ	การอักเสบเรื้อรังที่มีระดับอะไมลอยด์เอในซีรั่มสูง	ค้นหาโรคอักเสบที่กำลังกำเริบ การประเมินอวัยวะ	แหล่งที่มาของการอักเสบที่ซ่อนเร้นและการประเมินความเสียหายของอวัยวะต่ำเกินไป
ATTR แบบดั้งเดิมหรือแบบป่า	ทรานส์ไทเรติน	การตรวจเนื้อเยื่อร่วมกับการตรวจทางพันธุกรรม หากสงสัยว่ามีการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรม	กรณีศึกษาเกี่ยวกับครอบครัวและความจำเป็นในการให้คำปรึกษาทางพันธุกรรม
ประเภทหายากอื่นๆ	โปรตีนต่าง ๆ	การตรวจวิเคราะห์ด้วยเครื่องแมสสเปกโทรเมตรี บางครั้งก็ใช้การตรวจทางพันธุกรรมด้วย	การรักษาที่ไม่เหมาะสมกับประเภทของโรค

อัลกอริทึมการยืนยันเชิงปฏิบัติ

ตารางที่ 7 แผนภาพขั้นตอน “วิธีการยืนยันภาวะอะไมลอยโดซิสในลำไส้” [34]

ขั้นตอน	การกระทำ	ผลลัพธ์ที่ถือว่าเพียงพอ
1	การวินิจฉัยเบื้องต้นโดยพิจารณาจากอาการและการประเมินสัญญาณทางระบบต่างๆ	มีการกำหนดสมมติฐานการวินิจฉัยและวางแผนการตรวจชิ้นเนื้อ
2	ชุดตรวจทางห้องปฏิบัติการเบื้องต้น พร้อมการตรวจหาโปรตีนโมโนโคลนอลควบคู่กันไป ในกรณีที่สงสัยว่าเป็นโรค AL	ได้มีการประเมินความรุนแรงและเลือกแนวทางการรักษา
3	การส่องกล้องตรวจภายในพร้อมตัดชิ้นเนื้อไปตรวจหลายจุดตามอาการที่พบ	ได้รับวัสดุที่เพียงพอ
4	คองโกเรด พลัส โพลาไรเซชัน	ยืนยันการพบอะไมลอยด์ในเนื้อเยื่อ
5	การจำแนกประเภทอะไมลอยด์โดยวิธีอิมมูโนฮิสโตเคมีหรือแมสสเปกโทรเมตรี	ได้มีการระบุชนิดของโปรตีนแล้ว
6	การประเมินความเสียหายของอวัยวะและการค้นหาสาเหตุที่แท้จริงตามประเภท	ได้ทำการวินิจฉัยทางคลินิกอย่างครบถ้วนแล้ว

สาเหตุทั่วไปของผลบวกเท็จ

ผลลบเท็จมักเกี่ยวข้องกับวัสดุที่ไม่เพียงพอและลักษณะเฉพาะของการกระจายตัวของสารตกค้างในชั้นต่างๆ ของผนังลำไส้ รวมถึงแง่มุมทางเทคนิคของการย้อมสีและการตีความสีคองโกเรด หากยังคงมีข้อสงสัย ควรตรวจสอบสไลด์อีกครั้งและทำการตัดชิ้นเนื้อซ้ำจากบริเวณอื่น [35]

การพิมพ์ผิดพลาดมักเกิดขึ้นได้บ่อยกับแผงอิมมูโนฮิสโตเคมีที่จำกัดหรือพื้นหลังการย้อมสีที่ไม่จำเพาะ ในสถานการณ์เช่นนี้ การพิมพ์โปรตีโอมิกโดยใช้แมสสเปกโทรเมตรีจะช่วยลดความเสี่ยงของข้อผิดพลาดและช่วยตรวจจับอะไมลอยด์ชนิดหายาก [36]

ข้อผิดพลาดอีกประการหนึ่งคือการหยุดการทดสอบหลังจากตรวจพบโปรตีนโมโนโคลนอลในเลือดโดยไม่มีหลักฐานยืนยันว่าเป็นโปรตีนที่ก่อตัวเป็นอะไมลอยด์ โมโนโคลนอลแกมโมพาธีอาจเป็นการค้นพบโดยบังเอิญ ดังนั้นจึงต้องยืนยันชนิดของอะไมลอยด์ในเนื้อเยื่อ [37]

ข้อผิดพลาดทั่วไปอีกประการหนึ่งคือการตีความการค้นพบอะไมลอยด์ในการตรวจชิ้นเนื้อทางอ้อม โดยไม่ประเมินการมีส่วนร่วมของอวัยวะหรือค้นหาสาเหตุ ว่าเป็น "การวินิจฉัยที่สมบูรณ์" เมื่อยืนยันอะไมลอยด์แล้ว จำเป็นต้องมีการประเมินความสำคัญทางคลินิก ความเป็นระบบ และสาเหตุ มิฉะนั้นจะเสียเวลาในการรักษา [38]