วิตามินเอในเลือด

ค่าอ้างอิงของความเข้มข้นของวิตามินเอ (retinol) ในซีรั่มในเลือด: ในเด็ก 1-6 ปี - 0.7-1.5 μmol / l, 7-12 ปี - 0.91-1.71 μmol / l, 13 -19 ปี - 0,91-2,51 μmol / l; ในผู้ใหญ่มันคือ 1.05-2.09 μmol / l

วิตามินเอเกี่ยวข้องกับ liposoluble และมีอยู่ในสองรูปแบบ - วิตามินจริงหรือเรติน (พบได้เฉพาะในผลิตภัณฑ์จากสัตว์) และโปรวิตามิน A, ที่รู้จักกันเป็นแคโรทีน (ที่ทำจากสัตว์หรือพืช) ซึ่งอาจจะถูกแปลงเป็นเรตินในผนัง ระบบทางเดินอาหาร ประมาณ 50-90% ของอาหารที่เข้ามาเรตินจะถูกดูดซึมในลำไส้เล็กและการขนส่งใน chylomicrons ที่เกี่ยวข้องกับการที่ซับซ้อนไปที่ตับที่มันจะถูกเก็บไว้ในรูปแบบของเรตินอ palmitate หากจำเป็นให้ปล่อยออกสู่กระแสเลือดในรูปของเรติโนลซึ่งอยู่ร่วมกับโปรตีนที่มีผลผูกพันกับวิตามินเอ ในซีรั่มโปรตีนที่มีส่วนผสมของเอนไซม์วิตามินบี + เรตินอล จากซีรั่มเรตินจะถูกจับโดยเซลล์เป้าหมายเช่นเซลล์รับแสงและจอประสาทตา

เมื่อวิตามินเอเข้าสู่ร่างกายเกินความต้องการ (วันละ 180-430 ไมโครกรัมต่อวันขึ้นอยู่กับอายุเพศและสถานะทางสรีรวิทยา) ปริมาณที่มากเกินไปจะสะสมอยู่ในตับที่สร้างคลังสารอาหารนี้ การเก็บ retinol จากอาหารจะทำให้ปริมาณไขมันในเลือดลดลงในระดับปกติ (สูงกว่า 0.7 ไมโครโมลต่อลิตร) รูปแบบอื่น ๆ ที่ใช้งานทางชีวภาพของวิตามินเอ (retinal and retinoic acid) มีอยู่ในเลือดที่มีความเข้มข้นต่ำมาก (ต่ำกว่า 0.35 ไมโครโมล / ลิตร) ใน ester ของ retinol คิดเป็นประมาณ 5% ของวิตามินทั้งหมด (0.1-0.1 μmol / l)

วิตามินเอมีบทบาทสำคัญในกระบวนการลดออกซิเดชั่น เรตินอลส่งเสริมการก่อตัวของไกลโคเจนในตับและกล้ามเนื้อส่งเสริมการเพิ่มคอเลสเตอรอลในเลือดมีส่วนร่วมในการสังเคราะห์ฮอร์โมนเตียรอยด์และฮอร์โมนเพศ มันเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตและการพัฒนาของ resynthesis กระดูกโครงกระดูกของ rhodopsin และยังก่อให้เกิดการทำงานปกติของเยื่อเมือกและเยื่อบุผิวของฝาครอบผิวป้องกัน metaplasia ของตุ่มพองและลอกมากเกินไป วิตามินเอช่วยเสริมความแข็งแรงของเส้นผมฟันและเหงือก ในปีที่ผ่านมาก็แสดงให้เห็นบทบาทที่แตกต่างกันของวิตามินเอในการป้องกันโรคมะเร็งและกฎระเบียบของการสร้างภูมิคุ้มกันที่ (ที่จำเป็นสำหรับความสำเร็จของเซลล์ทำลายเพิ่มการสังเคราะห์ของ Ig ที่ช่วยกระตุ้นการผลิตของนักฆ่า T เซลล์กระตุ้น T-ผู้ช่วยชนิด II et al.) วิตามินเอ - สารต้านอนุมูลอิสระที่ใช้งานอยู่ส่วนใหญ่ทำหน้าที่ในการมีวิตามินอี; ช่วยปกป้องวิตามินซีจากการออกซิเดชั่น การขาดวิตามินเอถือเป็นปัจจัยเสี่ยงสำหรับเนื้องอกมะเร็ง ในการทดลองแสดงให้เห็นว่าการเพิ่มขึ้นของวิตามินเอในอาหารจะเพิ่มระยะเวลาในการดำเนินชีวิตเฉลี่ย 17.5% สังกะสีเป็นปัจจัยร่วมที่สำคัญในการเผาผลาญวิตามินเอ (จำเป็นสำหรับการสังเคราะห์โปรตีนที่มีวิตามิน A)

ความต้องการเฉลี่ยต่อวันสำหรับ retinol สำหรับผู้ใหญ่ (20-50 ปี) คือ 1.2 มก. (4000 IU, IU เท่ากับ 0.3 ไมโครกรัมต่อไรติน) สำหรับสตรีมีครรภ์ - 1.5 มก. (5000 IU) สำหรับให้นมบุตร - 1, 8 มก. (6000 IU) สำหรับคนที่มีอายุมากกว่า 60 ปี - 2.5 มก. (10,000 IU) อย่างน้อยหนึ่งในสามของความต้องการในชีวิตประจำวันของเรตินควรจัดส่งให้กับร่างกายในรูปแบบสำเร็จรูป ส่วนที่เหลือสามารถดูดซึมโดยการใช้ carotenoids ซึ่งรูปแบบเรตินในร่างกาย ควรตระหนักว่าประมาณ 30% ของเรตินในอาหารถูกทำลายโดยการบำบัดความร้อนของพวกเขา ฤทธิ์ของ retinol สูงกว่าแคโรทีน 2 เท่านอกจากนี้ยังดูดซึมเข้าไปในลำไส้เพียง 30-40% เท่านั้น ดังนั้นในการประเมินการบริโภคอาหารถือว่าเป็น 1 มิลลิกรัมของ retinol ประมาณ 6 มก. ของ carotenoids

การตรวจสอบ retinol (vitamin A) และ carotenoids ในซีรั่มตาม Bessey ในการปรับตัวของ LA Anisimova

หลักการของวิธีการ

การตรวจวัดปริมาณวิตามินเอและคาโรทีนอยด์ขึ้นอยู่กับการย่อยโปรตีนในสารละลายแอลกอฮอล์อัลคาไลน์โดยการสกัดด้วยตัวทำละลายอินทรีย์

น้ำยา

• สารละลายโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ (KOH) 11 M
• แอลกอฮอล์เอธิล 96%
• สารละลายโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ (KOH) 1 M ในแอลกอฮอล์เอธิล 96%: ปริมาตร 11 M KOH ปริมาณ 1 ลิตรผสมกับแอลกอฮอล์เอทิลีน 96% ปริมาณ 96% สารทำปฏิกิริยานี้จัดทำขึ้นในวันที่ทำการศึกษา ถ้าการย้อมสีเกิดขึ้นระหว่างการผสมเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ต้องทำความสะอาดโดยการกลั่นก่อนใช้
• ไซลิลเอชพี
• Oktan, h.ch.
• ผสมไซลีน - ออกเทน: เตรียมโดยการผสมปริมาณไซลีนและออกเทนเท่ากัน

การศึกษาจะดำเนินการใน spectrophotometer

การกำหนดวิตามินเอ

นำเลือดที่ได้จากนิ้ว (ประมาณ 1 มิลลิลิตร) ลงในฉลากแบบหมุนเหวี่ยงและใส่ถ้วยแก้วด้วยน้ำอุ่น (อุณหภูมิ 40-45 องศาเซลเซียส) เป็นเวลา 20-30 นาที ในการแยกซีรั่มก้อนเลือดจะถูกแผลอย่างระมัดระวังรอบ ๆ ขอบของหลอดด้วยก้านแก้วบาง ๆ และหมุนเหวี่ยงที่ 3000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที

เลือก 0.12 มิลลิลิตรของซีรั่มและถ่ายโอนไปยังหลอดที่มีการยึดเกาะแล้วเพิ่ม 0.12 มิลลิลิตรของสารละลายโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ 1 M เนื้อหาถูกเขย่าอย่างละเอียด

หลอดทดลองที่มีหัววัดจะอยู่ในอ่างน้ำประมาณ 20 นาทีที่อุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียสสำหรับการย่อยสลาย

ตัวอย่างจะถูกระบายความร้อนและเพิ่ม 0.12 มิลลิลิตรของส่วนผสมของไซลีน - ออกเทนลงไปและเขย่าอย่างแรงประมาณ 10-15 วินาที เย็นอีกครั้งและหมุนเหวี่ยง

ค่อยๆเอาชั้นด้านบนที่มีวิตามินเอและ carotenoids ออกด้วย pipette Pasteur ด้วยกระป๋องยางและถ่ายโอนไปยัง microcuvettes

ตัวอย่างคือ spectrophotometric ที่ความยาวคลื่น 328 นาโนเมตรเพื่อหาค่าความเป็นกรด - ด่างและที่ความยาวคลื่น 460 นาโนเมตรเพื่อหา carotenoids

หลังจาก spectrophotometry ตัวอย่างศึกษาอยู่ภายใต้รังสีอัลตราไวโอเลตสำหรับการทำลายของวิตามินเอเพื่อจุดประสงค์นี้ที่ระยะ 15-20 ซม. จาก microcuvettes ควอทซ์ตั้ง (แบคทีเรีย) หลอดไฟเพื่อให้การฉายรังสีสัมผัสส่วนหนึ่งของ cuvette ที่เต็มไปด้วยของเหลว; เวลาการเปิดรับ 45-60 นาที

ตัวอย่างมีการตรวจพบด้วยคลื่นแสงที่ความยาวคลื่น 328 นาโนเมตร เนื้อหาของวิตามินเอจะพิจารณาจากความแตกต่างของค่าการสูญพันธุ์ (ความหนาแน่นของแสง) โดยคำนึงถึงค่าสัมประสิทธิ์ (ปัจจัย) 637 ซึ่งคำนวณโดย Bessey สำหรับวิตามินเอ

การคำนวณจะดำเนินการตามสูตร:

X = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)),

โดยที่ X เป็นปริมาณวิตามินเอμg / dL; 637 เป็นค่าสัมประสิทธิ์ที่คำนวณโดย Bessey สำหรับการกำหนดวิตามินเอ; Е328 (1) - ความหนาแน่นทางแสงของสารละลายก่อนการฉายรังสี E328 (2) คือความหนาแน่นแสงของสารละลายหลังการฉายรังสี

ค่าสัมประสิทธิ์การถ่ายโอนความเข้มข้นของวิตามินเอจากμg / dL ในμmol / l คือ 0.035

เนื้อหาของ carotenoids คำนวณโดยสูตร:

X = 480-Е480,

โดยที่ X คือเนื้อหาของ carotenoids, μg / dL; 480 เป็นค่าสัมประสิทธิ์ที่คำนวณโดย Bessey เพื่อหา carotenoids; E480 เป็นความหนาแน่นแสงของสารละลายทดสอบ

คำพูด

จากการศึกษาของ Bessey พบว่าปริมาตรของซีรั่มอาจมีขนาดใหญ่ขึ้นหรือเล็กลงในระหว่างการศึกษา แต่อัตราส่วนของแอลกอฮอล์ในสารละลายแอลกอฮอล์ควรจะคงที่เมื่อมีการเปลี่ยนแปลงปริมาตร (จำนวน) ของไซลีนออกเทน

บรรทัดฐานในเนื้อหาของวิตามินเอในซีรัมในเลือดคือ: ในทารกแรกคลอดและทารก - 160-270 μg / l; ในผู้ใหญ่ 1.05-2.45 μmol / l (300-700 μg / l) เนื้อหาของ carotenoids ในซีรั่มผู้ใหญ่คือ 800-2300 ไมโครกรัมต่อลิตร