ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อ

PCR - หนึ่งในวิธีการสำหรับการวินิจฉัยดีเอ็นเอที่ช่วยให้การเพิ่มจำนวนของสำเนาของส่วนที่ตรวจพบของจีโนม (DNA) ของเชื้อแบคทีเรียหรือไวรัสเป็นล้านครั้งโดยใช้เอนไซม์ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ การทดสอบสำหรับส่วนนี้เฉพาะจีโนมนิวคลีอิกกรดคูณซ้ำ ๆ (ขยาย) ที่ช่วยให้การระบุตัวตนของมัน ครั้งแรกโมเลกุลดีเอ็นเอของเชื้อแบคทีเรียหรือไวรัสโดยใช้ความร้อนแบ่งออกเป็นสองโซ่แล้วในการปรากฏตัวของการสังเคราะห์ไพรเมอร์ดีเอ็นเอ (ลำดับนิวคลีโอที่เฉพาะเจาะจงกับจีโนมที่กำหนดไว้) จะมีผลผูกพันพวกเขาด้วยการเหยียดเสริมดีเอ็นเอสังเคราะห์เส้นใยที่สองของกรดนิวคลีอิกหลังจากแต่ละไพรเมอร์ในการปรากฏตัวของดีเอ็นเอโพลิเมอร์ความร้อน . มีสองโมเลกุลดีเอ็นเอ กระบวนการนี้จะทำซ้ำหลาย ๆ ครั้ง สำหรับการวินิจฉัยเพียงหนึ่งโมเลกุลดีเอ็นเอนั่นคือหนึ่งแบคทีเรียหรือไวรัสอนุภาค ปฏิกิริยาขั้นตอนเพิ่มเติม - การสังเคราะห์ดีเอ็นเอโมเลกุล RNA โดยใช้เอนไซม์ transcriptase ย้อนกลับ - ได้รับอนุญาตให้ทดสอบไวรัส RNA เช่นไวรัสตับอักเสบซี PCR - ขั้นตอนสามขั้นตอนวงจรซ้ำของ denaturation หลอมของไพรเมอร์สังเคราะห์ดีเอ็นเอ (พอลิเมอ) ปริมาณของดีเอ็นเอสังเคราะห์ที่ถูกระบุโดยวิธี ELISA หรือ electrophoresis

PCR สามารถนำมาใช้ในวัสดุชีวภาพที่แตกต่างกัน - เซรั่มหรือพลาสม่าในเลือดขูดของท่อปัสสาวะตรวจชิ้นเนื้อปอดของเหลวน้ำไขสันหลังเป็นต้น ครั้งแรก PCR ที่ใช้สำหรับการวินิจฉัยโรคติดเชื้อเช่นไวรัสตับอักเสบบี, ไวรัสตับอักเสบซีไวรัสตับอักเสบ D, การติดเชื้อ CMV ติดเชื้อติดต่อทางเพศสัมพันธ์การติดเชื้อ (หนอง diynaya ถังขยะ, Mycoplasma ติดเชื้อ ureaplasma) วัณโรคเอชไอวี การฆ่าเชื้อ ฯลฯ

ข้อดีของ PCR ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อมากกว่าวิธีการวิจัยอื่น ๆ มีดังนี้

• สาเหตุของการติดเชื้อสามารถพบได้ในสภาพแวดล้อมทางชีวภาพของร่างกายรวมทั้งวัสดุที่ได้จากการตรวจชิ้นเนื้อ;
• เป็นไปได้ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อในระยะแรกของโรค
• การประเมินผลเชิงปริมาณของผลการวิจัยเป็นไปได้ (จำนวนไวรัสหรือแบคทีเรียที่มีอยู่ในวัสดุภายใต้การตรวจสอบ);
• ความไวสูงของวิธีการ; เช่นความไวของ PCR ในการตรวจหาดีเอ็นเอของไวรัสตับอักเสบบีในเลือดเป็น 0,001 หน้า / ml (ประมาณ 4 × 10 ² copies / ml) ในขณะที่ความไวของวิธี DNA hybridization โดยใช้ยานสำรวจกิ่ง - 2.1 PG / ml (โดยประมาณ 7 × 10 ⁵ copies / ml)

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8]