การตรวจ PCR ไวรัสตับอักเสบซี

โดยปกติไม่มี HCV ในวัสดุ

ต่างจากวิธีการตรวจทางซีรั่มที่ใช้ตรวจไวรัสตับอักเสบซี ซึ่งตรวจหาแอนติบอดีต่อ HCV การตรวจ PCR ช่วยให้สามารถตรวจหา HCV RNA ได้โดยตรงและวัดความเข้มข้นในสารทดสอบได้ การทดสอบนี้มีความจำเพาะต่อสปีชีส์และความไวสูง โดยโมเลกุล HCV RNA จำนวน 10 โมเลกุลในสารทดสอบก็เพียงพอที่จะตรวจพบได้ การตรวจหาแอนติบอดีต่อ HCV ยืนยันการติดเชื้อของผู้ป่วยได้เท่านั้น แต่ไม่สามารถตัดสินกิจกรรมของกระบวนการติดเชื้อ (การจำลองของไวรัส) และการพยากรณ์โรคได้ นอกจากนี้ แอนติบอดีต่อ HCV ยังตรวจพบได้ทั้งในเลือดของผู้ป่วยที่เป็นโรคตับอักเสบเฉียบพลันและเรื้อรัง และในผู้ป่วยที่ป่วยและหายจากโรคแล้ว โดยแอนติบอดีในเลือดมักปรากฏให้เห็นเพียงไม่กี่เดือนหลังจากเริ่มมีอาการทางคลินิกของโรค ซึ่งทำให้การวินิจฉัยมีความซับซ้อน การตรวจหา HCV ในเลือดโดยใช้ PCR เป็นวิธีการวินิจฉัยที่ให้ข้อมูลมากกว่า การตรวจหา HCV RNA ใน PCR บ่งชี้ว่ามีไวรัสในเลือด ช่วยให้ตัดสินการเพิ่มจำนวนของไวรัสในร่างกายได้ และถือเป็นเกณฑ์หนึ่งในการวัดประสิทธิภาพของการบำบัดด้วยยาต้านไวรัส การตรวจหา HCV RNA ใน PCR ในระยะเริ่มต้นของการติดเชื้อไวรัสโดยไม่มีเครื่องหมายทางซีรัมใดๆ เลย ถือเป็นหลักฐานแรกสุดของการติดเชื้อ อย่างไรก็ตาม การตรวจหา HCV RNA แยกเดี่ยวโดยไม่มีเครื่องหมายทางซีรัมอื่นๆ เลยไม่สามารถแยกแยะผล PCR ที่เป็นบวกปลอมได้อย่างสมบูรณ์ ในกรณีดังกล่าว จำเป็นต้องประเมินการศึกษาทางคลินิก ชีวเคมี และสัณฐานวิทยาอย่างครอบคลุม โดยยืนยันการมีอยู่ของการติดเชื้อด้วย PCR ซ้ำหลายครั้ง

การใช้เทคนิค PCR ในผู้ป่วยไวรัสตับอักเสบซีเรื้อรังมีความสำคัญอย่างยิ่ง เนื่องจากผู้ป่วยส่วนใหญ่มักไม่มีความสัมพันธ์ระหว่างการมีอยู่ของการจำลองแบบของไวรัสกับการทำงานของเอนไซม์ตับ ในกรณีดังกล่าว มีเพียงเทคนิค PCR เท่านั้นที่ช่วยให้เราตัดสินการมีอยู่ของการจำลองแบบของไวรัสได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งหากผลลัพธ์สุดท้ายแสดงออกมาในเชิงปริมาณ ในกรณีส่วนใหญ่ของโรคนี้ RNA ของ HCV จะหายไปจากซีรั่มในเลือดช้ากว่าการกลับสู่ปกติของเอนไซม์ตับ ดังนั้นการกลับสู่ปกติของ RNA ของ HCV จึงไม่สามารถใช้เป็นพื้นฐานในการหยุดการรักษาด้วยยาต้านไวรัสได้

ในทางปฏิบัติแล้ว การตรวจเลือดเพื่อหา HCV RNA นั้นไม่เพียงแต่จำเป็นเท่านั้น แต่ยังรวมถึงการตรวจลิมโฟไซต์และชิ้นเนื้อตับด้วย โดยใช้วิธี PCR เพื่อตรวจหาไวรัส RNA ในตับด้วย ไวรัสสามารถตรวจพบได้ในเนื้อเยื่อตับบ่อยกว่าการตรวจเลือดถึง 2-3 เท่า เมื่อประเมินผลการตรวจเลือดหา HCV RNA ในซีรั่ม ควรจำไว้ว่าไวรัสในเลือดสามารถเปลี่ยนแปลงได้ (เช่นเดียวกับการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของเอนไซม์) ดังนั้น เมื่อผลการตรวจเลือดหา HCV RNA เป็นบวก อาจได้ผลลบ และในทางกลับกัน ในกรณีดังกล่าว ควรตรวจชิ้นเนื้อตับเพื่อคลี่คลายข้อสงสัยที่เกิดขึ้น

การตรวจหา HCV RNA ในวัสดุโดยใช้ PCR ใช้เพื่อวัตถุประสงค์ดังต่อไปนี้:

• การแก้ไขผลตรวจทางเซรุ่มวิทยาที่น่าสงสัย
• การแยกความแตกต่างระหว่างไวรัสตับอักเสบซีกับไวรัสตับอักเสบชนิดอื่น
• การระบุระยะเฉียบพลันของโรคเมื่อเปรียบเทียบกับการติดเชื้อหรือการสัมผัสครั้งก่อน; การระบุระยะการติดเชื้อของทารกแรกเกิดจากมารดาที่ตรวจพบเชื้อ HCV
• การติดตามประสิทธิผลการรักษาด้วยยาต้านไวรัส

ผู้ป่วยที่สงสัยว่าติดไวรัสตับอักเสบซี:

• ผู้บริจาค;
• บุคคลที่มีปัจจัยเสี่ยง;
• บุคคลที่มีกิจกรรม ALT สูง
• ผู้ป่วยโรคตับอักเสบเฉียบพลัน

ลักษณะทั้งหมดที่กล่าวข้างต้นของการประเมินผลและแนวทางในการวินิจฉัย HCV โดยใช้ PCR นั้นยังสามารถใช้ได้กับการติดเชื้ออื่น ๆ ด้วย

วิธี PCR ช่วยให้ไม่เพียงแต่ตรวจหา HCV RNA ในวัสดุที่กำลังศึกษาเท่านั้น แต่ยังกำหนดจีโนไทป์ของวัสดุนั้นด้วย การกำหนดจีโนไทป์ของไวรัสมีความสำคัญอย่างยิ่งในการคัดเลือกผู้ป่วยไวรัสตับอักเสบซีเรื้อรังเพื่อรับการรักษาด้วยอินเตอร์เฟอรอนอัลฟาและริบาวิริน ข้อบ่งชี้ทางห้องปฏิบัติการสำหรับการรักษาไวรัสตับอักเสบซีเรื้อรังด้วยอินเตอร์เฟอรอนอัลฟามีดังนี้:

• เพิ่มกิจกรรมของทรานส์อะมิเนส
• การมี HCV RNA ในเลือด
• HCV จีโนไทป์ 1;
• ไวรัสในเลือดสูง (มากกว่า 8×10 ⁵สำเนา/มล.)

ปัจจุบันสามารถตรวจวัดปริมาณ HCV RNA ในซีรั่มเลือดได้โดยใช้เทคนิค PCR ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งในการติดตามการรักษาด้วยอินเตอร์เฟอรอนอัลฟา ระดับไวรัสในเลือดจะประเมินดังนี้: หากปริมาณ HCV RNA ตั้งแต่ 10.2 ^ถึง 10.4 ^{สำเนา} /มล. ถือว่าอ่อน หากปริมาณ HCV RNA ตั้งแต่ 10.5 ^ถึง 10.7 ^{สำเนา} /มล. ถือว่าปานกลาง หากปริมาณมากกว่า 10.8 ^{สำเนา} /มล. ถือว่าสูง หากรักษาได้ผล ระดับไวรัสในเลือดจะลดลง

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]