Karyotyping

สำหรับการศึกษาเกี่ยวกับโครโมโซมมักใช้วัฒนธรรมในระยะสั้นเช่นเดียวกับเซลล์ไขกระดูกและวัฒนธรรมเกี่ยวกับพังผืด เลือดที่ส่งไปยังห้องปฏิบัติการที่มี anticoagulant ต้องผ่านการหมุนเหวี่ยงเพื่อเร่งการเกิดเม็ดเลือดแดงและ leukocytes จะถูกบ่มในอาหารเลี้ยงเชื้อเป็นเวลา 2-3 วัน Phytohemagglutinin ถูกเพิ่มเข้าไปในกลุ่มตัวอย่างเลือดเนื่องจากเร่งการเกาะติดของเม็ดเลือดแดงและกระตุ้นการแบ่งตัวของเม็ดเลือดขาว ขั้นตอนที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการศึกษาโครโมโซมคือ metaphase ของ mitosis ดังนั้น colchicine จึงถูกใช้เพื่อหยุดยั้งการแบ่ง lymphocytes ในขั้นตอนนี้ การเพิ่มยานี้ไปสู่วัฒนธรรมทำให้สัดส่วนของเซลล์ที่อยู่ใน metaphase เพิ่มขึ้นนั่นคือในขั้นตอนนั้นในรอบเซลล์เมื่อโครโมโซมได้รับการเห็นดีที่สุด โครโมโซมแต่ละตัวทำซ้ำ (สร้างสำเนาของตัวเอง) และหลังจากที่สีที่เหมาะสมสามารถมองเห็นได้ในรูปของโครโมโซมสองชนิดที่ยึดติดกับ centromere หรือส่วนกลางรั้ง เซลล์จะได้รับการรักษาด้วยโซเดียมคลอไรด์แก้ปัญหา hypotonic ถาวรและย้อมสี

สำหรับการย้อมสีโครโมโซมมักนิยมใช้ย้อมสี Romanovsky-Giemsa, acetaminomine 2% หรือ acetazarine 2% พวกเขาเปื้อนโครโมโซมทั้งหมดอย่างสม่ำเสมอ (วิธีการตามปกติ) และสามารถใช้เพื่อระบุความผิดปกติเชิงตัวเลขของโครโมโซมของมนุษย์

เพื่อให้ได้ภาพที่มีรายละเอียดของโครงสร้างของโครโมโซมการระบุ (การกำหนด) ของโครโมโซมแต่ละส่วนหรือกลุ่มของพวกเขาใช้วิธีการต่างๆของการย้อมสีแตกต่างกัน วิธีการที่ใช้บ่อยที่สุดคือ Giemsa เช่นเดียวกับ G- และ Q-bending การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของยาตามความยาวของโครโมโซมพบว่ามีแถบเปื้อน (heterochromatin) และไม่เคลือบ (euchromatin) ลักษณะของเส้นใยขวางที่ได้รับในกรณีนี้ช่วยในการระบุโครโมโซมแต่ละชุดในชุดเนื่องจากการสลับแถบและขนาดของพวกเขาเป็นไปอย่างเคร่งครัดและเป็นค่าคงที่สำหรับแต่ละคู่

แผ่นเมตาเฟสของแต่ละเซลล์ถูกถ่ายภาพ แต่ละโครโมโซมถูกตัดออกจากภาพและวางลงในแผ่นกระดาษตามลำดับ เช่นภาพของโครโมโซมเรียกว่า karyotype

การใช้การย้อมสีเพิ่มเติมรวมทั้งวิธีการใหม่สำหรับการได้รับการเตรียมโครโมโซมซึ่งทำให้สามารถยืดโครโมโซมในความยาวได้อย่างมีนัยสำคัญช่วยเพิ่มความแม่นยำในการวินิจฉัยโรคของเซลล์สืบพันธุ์

ศัพท์เฉพาะได้รับการพัฒนาเพื่ออธิบายถึง karyotype มนุษย์ karyotype ปกติของชายและหญิงถูกกำหนดให้เป็น 46, XY และ 46, XX ตามลำดับ ในดาวน์ซินโดรมลักษณะของการปรากฏตัวของโครโมโซมเพิ่มเติม 21 (trisomy 21), karyotype ของผู้หญิงคือ 47, XX 21+ และชาย - 47, XY, 21+ ในกรณีที่มีความผิดปกติของโครงสร้างโครโมโซมมีความจำเป็นต้องระบุแขนยาวหรือสั้นที่เปลี่ยนแปลงไป: ตัวอักษร p หมายถึงแขนสั้นแขนยาวและบริเวณที่มีการโยกย้าย ดังนั้นเมื่อแขนสั้นของโครโมโซม 5 ("แมว - กรี๊ด" ดาวน์ซินโดรม) ถูกลบ karyotype หญิงอธิบายว่าเป็น 46, XX, 5p- มารดาของเด็กที่มีอาการการโยกย้ายดาวน์ซินโดรม - ผู้ให้การเคลื่อนย้ายที่สมดุล 14/21 มี karyotype เท่ากับ 45, XX, t (14q; 21q) โครโมโซมที่เกิดการโยกย้ายจะเกิดขึ้นเมื่อแขนยาวของโครโมโซม 14 และ 21 รวมกันในขณะที่ไหล่สั้นจะหายไป

แต่ละไหล่แบ่งออกเป็นหัวเมืองและเรียงตามลำดับและส่วนที่ถูกกำหนดด้วยเลขอารบิค centromere ของโครโมโซมเป็นจุดเริ่มต้นสำหรับการนับพื้นที่และส่วนต่างๆ

ดังนั้นจึงใช้เครื่องหมายสี่จุดสำหรับภูมิประเทศของโครโมโซม ได้แก่ จำนวนโครโมโซมสัญลักษณ์ไหล่หมายเลขพื้นที่และจำนวนส่วนภายในขอบเขตที่กำหนด ยกตัวอย่างเช่น 6p21.3 บันทึกหมายความว่าเรากำลังพูดถึงคู่ที่ 6 โครโมโซมแขนสั้น, พื้นที่ 21 ส่วนที่ 3 มีตัวละครที่เป็นตัวเลือกมากขึ้นใน pter โดยเฉพาะอย่างยิ่ง - ปลายแขนสั้น, qter - ปลายของแขนยาว

วิธีการวิจัยเกี่ยวกับเซลล์สืบพันธุ์ช่วยในการตรวจหาการลบและการเปลี่ยนแปลงอื่น ๆ ของโครโมโซมในขนาดประมาณ 1 ล้านฐาน (nucleotides)

[1], [2], [3], [4]