เซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดจากสายสะดือของ Hemopoietic

เลือดจากเลือดเป็นแหล่งของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดที่มีศักยภาพในการขยายตัวและความสามารถในการ repopulation ของเซลล์เม็ดเลือด มีการแสดงให้เห็นซ้ำ ๆ ว่าในช่วงที่มีการคลอดเลือดจากสายสะดือมีจำนวนเซลล์ก่อมะเร็งที่ก่อให้เกิดเม็ดเลือดแดงจำนวนมากพอสมควร ผู้เขียนบางคนเชื่อว่าข้อดีของการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดแดงของเลือดจากสายสะดือคือไม่จำเป็นต้องค้นหาผู้บริจาคที่เข้ากันได้กับแอนติเจน HLA ตามที่พวกเขายังไม่บรรลุนิติภาวะของสาเหตุของระบบภูมิคุ้มกันของทารกแรกเกิดลดลงกิจกรรมการทำงานของเซลล์ immunocompetent และตามต่ำกว่าในการปลูกถ่ายไขกระดูกอุบัติการณ์ของการเกิดปฏิกิริยาอย่างรุนแรง "รับสินบนเมื่อเทียบกับโฮสต์ที่" ในการนี้การอยู่รอดของเซลล์ปลูกถ่ายเลือดสายสะดือไม่ต่ำกว่าเซลล์ไขกระดูกแม้ในกรณีของการใช้จำนวนที่น้อยกว่าของ GSK ยาต่อ 1 กิโลกรัมของน้ำหนักผู้ป่วย อย่างไรก็ตามในมุมมองของเราจำนวนที่เหมาะสมของคำถามที่ปลูกถ่ายเซลล์เลือดจากสายสะดือที่จำเป็นสำหรับ engraftment ที่มีประสิทธิภาพในร่างกายของผู้รับการทำงานร่วมกันของระบบภูมิคุ้มกันของพวกเขาและจำนวนของด้านอื่น ๆ ของการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดของสายสะดือเลือดต้องใช้การวิเคราะห์ที่รุนแรงมากขึ้น

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

การได้รับเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดขาวของสายสะดือ

ขั้นตอนสำหรับการได้รับเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดเลือดสายสะดือต้องบริโภคทันทีหลังคลอดและการแยกจากรกเมื่อรกอยู่ในมดลูกหรือมดลูกอดีตเช่นเดียวกับซีซาร์ส่วน แต่ยังอดีตมดลูก แสดงให้เห็นว่าในกรณีของการลดเวลาตั้งแต่แรกเกิดถึงการแยกทารกแรกเกิดออกจากรกไปเป็น 30 วินาทีปริมาตรของเลือดจากสายสะดือเพิ่มขึ้นเฉลี่ย 25-40 มิลลิลิตร ด้วยขั้นตอนต่อมาปริมาณเลือดที่เท่ากันจะหายไป เป็นที่ยอมรับว่าการแยกเด็กแรกจาก afterburn ไม่ก่อให้เกิดผลเสียใด ๆ สำหรับทารกแรกเกิด

การวิจัยรัสเซียสถาบันโลหิตวิทยาและการถ่ายเลือดการพัฒนาที่มีประสิทธิภาพและต้นทุนต่ำเทคโนโลยีเลือดทั้งสองสายที่ lineages สรีรวิทยา ((70.2 + 25.8) มล.) และการผ่าตัดคลอด ((73.4 + 25.1) มล.) วิธีการสำหรับการแยกเลือดสายสะดือด้วยอัตราผลตอบแทนที่สูงพอสมควรของเซลล์โมโนนิวเคลียร์และ nucleated - (83.1 + 9.6) และ (83.4 + 14.1%) ตามลำดับ วิธีการที่ดีขึ้นสำหรับการเก็บรักษาของเลือดจากสายสะดือซึ่งมั่นใจความปลอดภัยสูงของเซลล์โมโนนิวเคลียร์และ CFU-GM - (+ 96,8 5,7) และ (89.6 + 22.6%) ตามลำดับ ประสิทธิภาพของวิธีการสุ่มตัวอย่างการระบายน้ำสายเลือดใช้คอนเทนเนอร์ "Kompoplast-300" (รัสเซีย) ผู้เขียนเลือดจากสายสะดือรั้วดำเนินการทันทีหลังคลอดและการแยกจากรกในแง่ของการวางรกในมดลูกหรือมดลูกอดีต ก่อนที่จะเจาะสะดือของหลอดเลือดดำสายสะดือรับการรักษาครั้งกับทิงเจอร์ 5% ของไอโอดีนแล้วสองครั้ง - เอทิลแอลกอฮอล์ 70% เลือดไหลผ่านท่อเชื่อมต่อไปยังภาชนะที่เป็นธรรมชาติ ระยะเวลาของรั้วใช้เวลาไม่เกิน 10 นาที 66 วิธีการเก็บรวบรวมปริมาณการระบายน้ำตัวอย่างเลือดสายสะดือเฉลี่ย (72 + 28) มล. และจำนวนของเม็ดเลือดขาวในตัวอย่างเฉลี่ยเต็ม - (1.1 + 0.6) x 107 x การวิเคราะห์เลือดสายสะดือสำหรับหมัน (การปนเปื้อนเชื้อแบคทีเรีย HIV-1 ไวรัสตับอักเสบ B และ C ซิฟิลิสและการติดเชื้อ cytomegalovirus) ในเพียงหนึ่งตัวอย่างที่ถูกระบุ IgG-แอนติบอดีต่อไวรัสตับอักเสบซีในการศึกษาอีกครั้งหนึ่งรกหลังคลอดพื้นผิวของทารกในครรภ์ถูกวางลงบนกรอบพิเศษ downwardly, สายได้รับการรักษาด้วย 5% โซเดียม ไอโอดีนและ 75% เอทิล เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ TH หลอดเลือดดำของสายสะดือถูกระบายด้วยเข็มจากระบบถ่ายเลือด (G16) เลือดไหลเข้าไปในภาชนะอย่างเป็นธรรมชาติ ปริมาตรของเลือดที่ถ่ายด้วยวิธีนี้เป็นค่าเฉลี่ย (55 + 25) มล. กระดาษกรัม Kogler, et al (1996) เลือดจากสายสะดือนำวิธีปิดและได้รับปริมาณมากในเลือด - โดยเฉลี่ย (79 + 26) มล. ผู้เขียนทราบว่าในหมู่ 574 ตัวอย่างเลือดจากสายสะดือมีประมาณ 7% น้อยกว่า 40 มิลลิลิตรของเลือดซึ่งไม่อนุญาตให้ใช้พวกเขาสำหรับการปลูกถ่าย เค Isoyama, et al (1996), การถ่ายเลือดจากสายสะดือโดย exfusion ใช้งานโดยใช้เข็มฉีดยารับค่าเฉลี่ยของ 69.1 มิลลิลิตรของเลือด (ปริมาตรเลือดจากสายสะดือที่แตกต่างกัน 15-135 มล.) สุดท้ายเอลอับเดล-Mageed PI ทำงานร่วมกัน (1997) โดย punovinnoy เส้นเลือดสวนที่ได้รับในค่าเฉลี่ย 94 มิลลิลิตรของเลือดจากสายสะดือ (56-143 มล.)

เพื่อลดความเสี่ยงของการติดเชื้อ iatrogenic และการปนเปื้อนจากสารคัดหลั่งของมารดาพัฒนาเก็บเลือดระบบปิดบนพื้นฐานของการใช้กันอย่างแพร่หลายระบบ transfuzioinoy แบ็กซ์เตอร์เฮลธ์แคร์คอร์ปเดียร์ฟิลด์, อิลลินอยส์ (USA) ซึ่งมี 62.5 มิลลิลิตร CPDA (ซิเตรทฟอสเฟต-เดกซ์โทรสกับ adenine) เช่น สารกันเลือดแข็ง เทคโนโลยีในการผลิตวัสดุที่มีความสำคัญยิ่งในการจัดทำตัวอย่างที่มีคุณภาพเมื่อเทียบกับปริมาณของเนื้อหาและความบริสุทธิ์ของเซลล์แขวนลอยที่ ในวิธีการที่มีอยู่ของคอลเลกชันเลือดจากสายสะดือ, kotoryeuslovno แบ่งเป็นปิดกึ่งเปิดและเปิดระบบการตั้งค่า sleduetotdavat แรกเป็นในระบบปิดอย่างมีนัยสำคัญจะช่วยลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ของวัสดุเช่นเดียวกับการปนเปื้อนของเซลล์แขวนลอยของเซลล์แม่

A. Nagler และผู้ร่วมวิจัย (1998) ได้ทำการวิเคราะห์เปรียบเทียบประสิทธิภาพของระบบการเก็บตัวอย่างเลือดจากสายสะดือทั้งสามแบบ ในตัวแปรแรกขั้นตอนได้ดำเนินการในระบบปิดโดยการเติมเลือดโดยตรงลงในภาชนะ ในรูปแบบที่สองเลือดจากสายสะดือได้รับโดยวิธีการไหลเวียนโลหิตของหลอดฉีดยาด้วยการล้างหลอดเลือดดำของรกและการไหลเวียนโลหิตไปยังภาชนะบรรจุพร้อมกัน (วิธีเปิด) ในตัวแปรที่สามเลือดถูกถอนออกในระบบกึ่งเปิดโดยการดึงอย่างแข็งขันด้วยเข็มฉีดยาและล้างผ่านหลอดเลือดแดงของสายสะดือที่มีการไหลเข้าพร้อมกันลงในภาชนะ ในรุ่นแรกผู้เขียนได้รับเลือดจากสายสะดือในปริมาตร (76.4 + 32.1) มิลลิลิตรด้วยจำนวนเม็ดเลือดขาว (10.5 + 3.6) x 10 ⁶ต่อเลือด 1 มิลลิลิตร ในตัวแปรที่สองดัชนีที่เกี่ยวข้องคือ (174.4 + 42.8) มิลลิลิตรและ (8.8 + 3.4) x 10 ⁶ / ml; ในสาม - (173.7 + 41.3) มล. และ (9.3 + 3.8) x 10 ⁶ / ml การติดเชื้อบ่อยที่สุดของตัวอย่างเลือดจากสายสะดือถูกบันทึกไว้เมื่อใช้ระบบเปิด ความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างมวลรกและปริมาตรของเลือดที่สกัดได้มีการเพิ่มปริมาณของรกและปริมาณเลือดที่สะสมเพิ่มขึ้น

หลังจากการสุ่มตัวอย่างของเลือดจากสายสะดือขั้นตอนการแยกตัวดังต่อไปนี้คือการแยกเซลล์โมโนนิวเคลียร์และการทำให้เซลล์หยุดชะงักจากเม็ดเลือดแดง ภายใต้เงื่อนไขการทดลอง nucleated เซลล์ที่แยกได้จากการตกตะกอนสลายเมทิลเม็ดเลือดแดงของพวกเขาด้วยแอมโมเนียมคลอไร อย่างไรก็ตามสำหรับวัตถุประสงค์ทางคลินิกไม่ควรใช้เมธิลเซลลูโลสเนื่องจากการสูญเสียเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดขาวถึง 50-90% lysing เซลล์เม็ดเลือดแดงในการเชื่อมต่อที่มีปริมาณขนาดใหญ่ของการแก้ปัญหาการทำงานในคลินิกยังแทบจะไม่ดำเนินการแม้ว่าร้อยละของการแยกในลักษณะนี้ nucleated เซลล์ที่มีฟีโนไทป์ของ CD34 + และเซลล์ต้นกำเนิดฟังก์ชั่น CFU-GM และ CFU-GEMM สูงขึ้นมาก มีการรายงานตัวใหม่สำหรับการแยกเซลล์โมโนนิวเคลียร์ออกจากสารละลายความหนาแน่นของผู้ซื้อความหนาแน่น (BDS72) สารนี้มีค่าทางสรีรวิทยาดังนี้ pH - 7.4, osmolality - 280 mosm / kg ความหนาแน่น 1.0720 g / ml ตามที่ผู้เขียนด้วยความช่วยเหลือของมันเป็นไปได้ที่จะแยกได้ถึง 100% ของเซลล์ CD34 บวกและลบ 98% ของเซลล์เม็ดเลือดแดง อย่างไรก็ตามคลินิกยังไม่ได้ใช้ BDS72

วิธีการแยกการทดสอบเซลล์นิวเคลียสจากเลือดสายสะดือโดยปกติจะใช้วิธีการแก้ปัญหา HES 10% หรือสารละลายเจลาติน 3% ประสิทธิภาพของการตกตะกอนของเม็ดเลือดแดงและการแยกเซลล์นิวเคลียสในทั้งสองกรณีคือเท่ากันโดยประมาณ อย่างไรก็ตามในกรณีที่มีการใช้เป็นเจลาตินตัวแทนการตกตะกอนเป็นไปได้ที่จะได้รับเป็นจำนวนค่อนข้างใหญ่ของ CFU-GM กว่าเมื่อใช้ HES สันนิษฐานว่าเป็นความแตกต่างในประสิทธิภาพการกู้คืน CFU-GM ความเร็วไม่เท่ากันเนื่องจากการสะสมของเศษส่วนของแต่ละบุคคลหรือเซลล์ nucleated ความสามารถในโมเลกุลของ HES ดูดซึมในเม็ดเลือดเซลล์ผิวและทำให้ป้องกันความไวของพวกเขาเพื่ออาณานิคมกระตุ้นปัจจัยซึ่งจะใช้เมื่อการเพาะเลี้ยง CFU-GM ในหลอดทดลอง อย่างไรก็ตามทั้งสองแบบนี้อาจเหมาะสำหรับการแยกเซลล์นิวเคลียสเมื่อสร้างธนาคารเลือดสายสะดือขนาดใหญ่

วิธีการแยกและการเก็บรักษา cryopreservation ของเลือดจากสายสะดือในหลักการไม่แตกต่างจากที่ใช้ในการทำงานกับเซลล์ต้นกำเนิดโลหิตของเลือดและไขกระดูกของผู้บริจาคผู้ใหญ่ แต่เมื่อเตรียมตัวอย่างเลือดจากสายสะดือจำนวนมากสำหรับธนาคารของตนวิธีการแยกต้องเป็นเรื่องแรกต้นทุนต่ำ ดังนั้นตอนนี้โชคไม่ดีสำหรับความต้องการทางคลินิกแล้วใช้วิธีการตามปกติของการแยกและการเก็บรักษา cryopreservation ของเซลล์เม็ดเลือดแดงสายสะดือถูกนำมาใช้และมีประสิทธิภาพมากขึ้น แต่วิธีการที่มีประสิทธิภาพทางการเงินยังคงอยู่มากนักทดลอง

โดยทั่วไปแล้วเกณฑ์สำหรับการประมาณจำนวนเซลล์เม็ดเลือดและความต้องการในการศึกษาตัวอย่างเลือดจากสายสะดือถูกสร้างขึ้นเพื่อระบุตัวบ่งชี้การติดเชื้อ เพื่อรักษาความปลอดภัยการปลูกถ่ายเซลล์เม็ดเลือดขาวเลือดเม็ดเลือดต้องตรวจหาตัวอย่างเลือดทั้งหมดสำหรับการติดเชื้อและโรคทางพันธุกรรมแบบฮีโมโกเมอร์ นักเขียนบางคนแนะนำวิธีการพิเศษที่เพิ่มขึ้นของการศึกษาของเลือดสายสะดือเพื่อวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัยโรคทางพันธุกรรมเช่นธาลัสซีและเคียวเซลล์โรคโลหิตจางขาด deaminase adenosine, agammaglobulinemia Bruton โรค Harlera และม้า

ตามคำแนะนำของ Ticheli ลิตร, et al (1998) ในตัวอย่างเลือดจากสายสะดือแต่ละที่มีความจำเป็นในการกำหนดจำนวนของเซลล์นิวเคลียสเซลล์ SB34 บวกและ CFU-GM ดำเนิน HLA-พิมพ์เพื่อตรวจสอบกลุ่มเลือด ABO และ Rh สมาชิก นอกจากนี้จะดำเนินการเพาะแบคทีเรียการทดสอบทางภูมิคุ้มกันเอชไอวีและการติดเชื้อ CMV, HBsAg, ไวรัสตับอักเสบซี, HTLY-I และ HTLV-II (มะเร็งเม็ดเลือดขาว T-cell ของมนุษย์), ซิฟิลิส, toxoplasmosis ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสกับ cytomegalovirus และการติดเชื้อเอชไอวีมีผลบังคับใช้

ขั้นตอนการรับเลือดจากสายสะดืออย่างมากควรดำเนินการอย่างเคร่งครัดตามหลักการของการแพทย์ทางชีวภาพ ก่อนที่จะเริ่มการเก็บรวบรวมเลือดจำเป็นต้องได้รับความยินยอมจากหญิงตั้งครรภ์เพื่อนำไปใช้ การสัมภาษณ์เบื้องต้นกับหญิงตั้งครรภ์เพื่อให้ได้รับความยินยอมในการดำเนินการทั้งหมดจากการไหลเวียนโลหิตจนเสร็จสิ้นการจัดทำเอกสารจะดำเนินการโดยบุคลากรทางการแพทย์เท่านั้น ในกรณีใด ๆ ไม่สามารถจะยอมรับการดำเนินการขั้นตอนใด ๆ เหล่านี้โดยบุคลากรที่มีทางชีวภาพ, เคมี, ยาและการศึกษาที่ไม่ใช่แพทย์อื่น ๆ ในมุมมองของการละเมิดบรรทัดฐานที่จัดตั้งขึ้นของธิคส์และสิทธิมนุษยชน สำหรับการทดสอบในเชิงบวกสำหรับผู้ให้บริการ HBsAg, แอนติบอดีเพื่อสาเหตุเจ้าหน้าที่ของไวรัสตับอักเสบซีเอชไอวีและโรคซิฟิลิสเลือดจากสายสะดือไม่ได้ถ่ายและตัวอย่างเลือดที่เก็บรวบรวมจะถูกยกเลิกไปแล้วและถูกทำลาย มันควรจะตั้งข้อสังเกตว่าสายการบินของการติดเชื้อที่แฝงอยู่ในทารกแรกเกิดที่มีมากยากกว่าในผู้ใหญ่จึงน่าจะเป็นของการถ่ายโอน hematogenous และการพัฒนาของภาวะแทรกซ้อนติดเชื้อของเงินทุนเม็ดเลือดของเซลล์เลือดจากสายสะดือมีนัยสำคัญต่ำกว่าในกรณีของการปลูกถ่ายไขกระดูกจากผู้บริจาคผู้ใหญ่

จุดสำคัญในการใช้เลือดจากสายสะดือในคลินิกคือการประเมินผลการปลูกถ่ายซึ่งขึ้นอยู่กับการกำหนดจำนวนเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดในตัวอย่างเลือดจากสายสะดือและปริมาณเซลล์ที่จำเป็นสำหรับการปลูกถ่าย ยังไม่ได้มีการกำหนดมาตรฐานสำหรับจำนวนเม็ดเลือดไขสันหลังหลังที่จำเป็นสำหรับการปลูกถ่าย ไม่มีมุมมองที่เป็นที่ยอมรับโดยทั่วไปแม้จะเป็นพารามิเตอร์ตามปกติเช่นจำนวนเซลล์ที่มี CD34 บวกและ CFU-GM นักเขียนบางคนประเมินศักยภาพของเซลล์เม็ดเลือดโดยการวิเคราะห์ของวัฒนธรรมในระยะยาวด้วยความมุ่งมั่นของเนื้อหาของอดีตอาณานิคมหน่วยร่วมกันเพื่อ granulocytes เม็ดเลือดแดง, monocytes และ megakaryocytes - การ CFU-GEMM

อย่างไรก็ตามในการตั้งค่าทางคลินิกการประเมินมาตรฐานของการปลูกถ่ายไขกระดูกมักจะมีเพียงการกำหนดจำนวนเซลล์ nucleated หรือ mononuclear เท่านั้น

การเก็บรักษาเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดแดงของสายสะดือ

ปัญหาบางอย่างเกิดขึ้นในเทคโนโลยีการจัดเก็บเซลล์เม็ดเลือดแดงเลือดเลี้ยงลูกโลหิต เมื่อเก็บรักษาของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดเพื่อให้บรรลุโหมดการแช่แข็งของพวกเขาที่ดีที่สุดจะต้องลดปริมาณของเลือดจากสายสะดือและเซลล์เม็ดเลือดแดงถูกลบออกไปก่อนหน้านี้เพื่อหลีกเลี่ยงภาวะเม็ดเลือดแดงแตกและความเสี่ยงของการเกิดปฏิกิริยาความไม่ลงรอยกันของแอนติเจนของเม็ดเลือดแดง (ABO, Rh) ที่ เพื่อวัตถุประสงค์เหล่านี้วิธีต่างๆในการแยกเซลล์ nucleated เหมาะสม ในช่วงต้นยุค 90 ของศตวรรษที่ผ่านมาใช้กันอย่างแพร่หลายมากที่สุดวิธีการแยกเซลล์นิวเคลียสในการไล่ระดับความหนาแน่นอยู่บนพื้นฐานของ Ficoll มีความหนาแน่น 1.077 g / ml หรือซึมที่มีความหนาแน่น 1.080 g / ml เลือดจากสายสะดือแยกโดยการไล่ระดับความหนาแน่นจะช่วยให้การเลือกเซลล์โมโนนิวเคลียร์ส่วนใหญ่ แต่จะนำไปสู่การสูญเสียมากของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด - ถึง 30-50%

ประสิทธิภาพการตกตะกอนของไฮดรอกซีลิกสตาร์ชในกระบวนการแยกสายสะดือเซลล์เม็ดเลือดในวิธีต่าง ๆ ผู้เขียนบางคนระบุว่ามีคุณภาพต่ำในการแยกโดยใช้วิธีนี้ขณะที่นักวิจัยคนอื่น ๆ ตรงกันข้ามในบรรดาวิธีที่เป็นไปได้ทั้งหมดต้องการที่จะจัดสรรเลือดสายสะดือ HSC ได้อย่างแม่นยำโดยใช้สารละลายไฮดรอกซีลิก 6% สิ่งนี้ชี้ให้เห็นถึงประสิทธิภาพการตกตะกอนของเซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีประสิทธิภาพสูงซึ่งขึ้นอยู่กับข้อมูลบางอย่างจาก 84% ถึง 90%

ผู้สนับสนุนของมุมมองอื่นคิดว่าเกือบทุกกระบวนการแยกเกี่ยวข้องกับการสูญเสียที่ยิ่งใหญ่เซลล์ yadrosoderzhashih และนำเสนอเพื่อให้แยกโดยเหวี่ยงแยกเลือดจากสายสะดือเป็น 3 เศษส่วน: เม็ดเลือดแดงเม็ดเลือดขาวและแหวนพลาสม่า การแยกเซลล์ในลักษณะนี้, นักประดิษฐ์ได้พบว่าเนื้อหาของเซลล์โมโนนิวเคลียร์ในช่วงต้นเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดและเซลล์ที่มี CD34 + immunophenotype ในท้ายที่สุดเป็นตามลำดับ 90, 88 และ 100% ของระดับเดิม ปริมาณที่ใกล้เคียงของการเจริญเติบโตบริสุทธิ์ในวิธีการของเซลล์เม็ดเลือดสายสะดือที่ได้จากการวิจัยอื่น ๆ นี้หลังจากตกตะกอน nucleated จัดสรร 92%, 98% - โมโนนิวเคลียร์ 96% - CD34 บวกเซลล์และ 106% ของอดีตอาณานิคมหน่วย

ในช่วงปลายทศวรรษที่ 1990 เจลาตินถูกใช้เป็นสารตกตะกอน ในทางคลินิกด้วยความช่วยเหลือของเจลาตินเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดจากเลือดจากสายสะดือถูกแยกออกมาตั้งแต่ปี 2537 เมื่อใช้สารละลายเจลาตินที่มีความเข้มข้น 3% ประสิทธิภาพในการแยกเซลล์นิวเคลียสออกเป็น 88-94% การใช้เจลาตินอย่างกว้างขวางในการพัฒนาธนาคารเลือดจากสายสะดือได้รับการยืนยันถึงข้อได้เปรียบเหนือสารตกตะกอนอื่น ๆ การวิเคราะห์เปรียบเทียบทั้งหมดของวิธีการดังกล่าวของการแยกตัวของเซลล์นิวเคลียสในแง่ของการใช้งานตามลำดับของพวกเขาในแต่ละตัวอย่างเลือดจากสายการทดสอบแสดงให้เห็นว่าดีที่สุด sedimenter ออกเซลล์โมโนนิวเคลียร์กับฟีโนไทป์ CD34 + / CD45 + เช่นเดียวกับจำนวน CFU-GM และ CFU-GEMM เป็น 3% สารละลายเจลาติน มันพิสูจน์แล้วว่าเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพอย่างมีนัยสำคัญน้อยกว่าการใช้ Ficoll ความหนาแน่นของการไล่ระดับสีและการใช้เซลลูโลสเมธิลและแป้ง hydroxyethyl ที่สูญเสียเซลล์เม็ดเลือดถึง 60%

การขยายตัวของปริมาณการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดจากสายสะดือมีความสัมพันธ์ไม่เพียง แต่กับการพัฒนาวิธีการผลิต แต่ยังรวมถึงการเก็บรักษา มีปัญหามากมายที่เกี่ยวข้องโดยตรงกับการเตรียมเลือดจากสายสะดือเพื่อเก็บรักษาในระยะยาวและเลือกเทคโนโลยีการเก็บรักษาที่เหมาะสมที่สุดสำหรับตัวอย่าง การใช้สื่อการเก็บรักษาความเย็นต่างๆและการใช้วิธีการเตรียมเซลล์ที่ละลายในการปลูกถ่าย การขนส่งตัวอย่างเลือดจากสายสะดือมักถูกนำออกจากพื้นที่ห่างไกลจากศูนย์โลหิตวิทยา ในการเชื่อมต่อนี้ปัญหาเกิดขึ้นในช่วงเวลาที่อนุญาตสำหรับการเก็บเลือดจากเลือดจากช่วงเวลาที่ได้รับไปจนถึงจุดเริ่มต้นของการเก็บรักษาด้วยความเย็นซึ่งมีความสำคัญเป็นพิเศษในการพัฒนาธนาคารเลือดจากสายสะดือ

การศึกษากิจกรรมการทำงานของเซลล์เม็ดเลือดเลือดจากสายสะดือหลังการเก็บรักษาในระยะยาว (ไม่เกิน 12 ปี) ในไนโตรเจนเหลวเปิดเผยว่าประมาณ 95% ของเซลล์เม็ดเลือดในช่วงเวลานี้ไม่ได้สูญเสียความสามารถการเจริญของพวกเขาสูง กระดาษ Yurasova เอส, et al (1997) แสดงให้เห็นถึงเลือดจากสายสะดือที่เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง (22 ° C) หรือที่ 4 ° C เป็นเวลา 24 และ 48 ชั่วโมงไม่ได้ลดศักยภาพของเซลล์เม็ดเลือดที่ระดับเริ่มต้นที่เหมาะสม 92 และ 88% อย่างไรก็ตามถ้าเวลาเก็บรักษาเพิ่มขึ้นถึงสามวันจำนวนเซลล์ที่มีนิวเคลียส nucleated ในเลือดจากสายสะดือลดลงอย่างมาก ในขณะเดียวกันการศึกษาอื่น ๆ ที่พบว่าในระหว่างการจัดเก็บข้อมูลสำหรับ 2-3 วันที่อุณหภูมิ 22 องศาเซลเซียสหรือ 4 ได้รับผลกระทบส่วนใหญ่มีชีวิตของ granulocytes ผู้ใหญ่ แต่ไม่เซลล์ haemopoietic

ความสามารถในการมีชีวิตของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดแดงจากเลือดจากสายสะดืออาจส่งผลกระทบในทางลบต่อส่วนประกอบของระบบในการเก็บรวบรวม การวิเคราะห์ผลกระทบของการ anticoagulants ที่แตกต่างกันซึ่งกลไกการกระทำที่เกิดจากการมีผลผูกพันของแคลเซียมไอออน (ACD, EDTA, XAPD-1) สำหรับเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดในเงื่อนไขการจัดเก็บเลือดจากสายสะดือ 24 ถึง 72 ชั่วโมงเปิดเผยผลกระทบเชิงลบของพวกเขาในชีวิตของเซลล์ nucleated ในการเชื่อมต่อนี้ผู้เขียนขอแนะนำให้ใช้พีบีเอส (ฟอสเฟตสารละลายบัฟเฟอร์) ด้วยนอกเหนือจากเฮพื้นเมืองโดยไม่ต้องสารกันบูดที่ความเข้มข้น 20 U / ml ซึ่งในความเห็นของพวกเขาทำให้มันเป็นไปได้ที่จะเพิ่มระยะเวลาของการจัดเก็บ unfractionated เลือดจากสายสะดือขึ้นถึง 72 ชั่วโมงและบันทึกกิจกรรมการทำงานของอดีตอาณานิคมหน่วยที่ อย่างไรก็ตามเมื่อศึกษาความปลอดภัยของ CFU-GM และ CFU-G พบว่าเวลาในการเก็บเลือดจากสายสะดือก่อนการเก็บรักษาด้วยความเย็นไม่ควรเกินเก้าชั่วโมง เห็นได้ชัดว่าในกรณีนี้ควรจะทำหน้าที่หลักการที่ว่าถ้ามีข้อมูลที่ขัดแย้งกันควรใช้สายอายุการเก็บรักษาเลือดต่ำสุดที่แนะนำและเริ่มต้นการตั้งโปรแกรมการแช่แข็งเซลล์ที่แยกได้อย่างรวดเร็วที่สุดเท่าที่เป็นไปได้

เมื่อมีการแช่เย็นเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดแดงของเลือดจากสายสะดือมักใช้สารละลาย DMSO 10% เป็นตัวทำ cryoprotectant อย่างไรก็ตามนอกเหนือจากผลกระทบที่เกิดจากการปกป้องด้วยการทำ cryoprotective แล้ว dimethylsulfoxide ในความเข้มข้นนี้มีผลโดยตรงต่อ cytotoxic แม้ว่าจะอยู่ภายใต้เงื่อนไขของการสัมผัสกับเลือดในเลือดของสายสะดือน้อยที่สุด เพื่อลดผลกระทบจากสารพิษของ DMSO อุณหภูมิในการสัมผัสเป็นศูนย์การเพิ่มความเร็วของเครื่องมือทั้งหมดและการล้างซ้ำหลังจากการละลายของสายสะดือถูกนำมาใช้

สถาบันทางโลหิตวิทยาและทางโลหิตวิทยาของสถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์ของประเทศยูเครนได้รับการพัฒนาทิศทางทางวิทยาศาสตร์ตั้งแต่ปีพศ. 2538 โดยมีเป้าหมายเพื่อศึกษาเลือดสายสะดือเป็นแหล่งกำเนิดของเซลล์เม็ดเลือดแดง โดยเฉพาะอย่างยิ่งเทคโนโลยีใหม่สำหรับการเก็บรักษาอุณหภูมิของเซลล์เลือดแข็งตัวของเลือดจากสายสะดือและเส้นใยที่ไม่ได้จัดเป็นเศษส่วนในอุณหภูมิต่ำ ในฐานะที่เป็น cryoprotectant ใช้โพลิไวนิลไพโรลิโทนทางการแพทย์ที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำ วิธีการเก็บรักษาเลือดจากเส้นโลหิตที่ไม่มีการจัดเก็บอยู่บนพื้นฐานของเทคโนโลยีเดิมในการเตรียมเซลล์ก่อนแช่แข็งและเทคนิคการรักษาเซลล์พิเศษก่อนการปลูกถ่าย

ปัจจัยหนึ่งที่สำคัญที่สุดที่มีผลต่อระดับกิจกรรมการทำงานของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดแดงที่มีการเก็บรักษาด้วยความเย็นแบบ cryopreserved คืออัตราการหล่อลื่นของเซลล์โดยเฉพาะในช่วงการตกผลึก แนวทางซอฟต์แวร์เพื่อแก้ปัญหาความเร็วและเวลาในการแช่แข็งเป็นโอกาสที่ดีในการสร้างวิธีการเก็บรักษาด้วยความเย็นที่เรียบง่ายและมีประสิทธิภาพสูงโดยไม่ต้องชะลนการระงับมือถือจากการแช่แข็งก่อนการปลูกถ่าย

ขั้นตอนของการแช่แข็งและละลายน้ำแข็งในทันทีอันตรายที่สุดสำหรับความมีชีวิตของเซลล์ในระหว่างการเตรียม เมื่อแช่แข็งเซลล์เม็ดเลือดแดงส่วนสำคัญของพวกเขาสามารถทำลายได้ในขณะที่การเปลี่ยนแปลงของสื่อระหว่างเซลล์จากของเหลวไปเป็นของแข็งการตกผลึกของเฟส เพื่อลดเปอร์เซ็นต์ของการตายของเซลล์การใช้งานการป้องกันการรั่วซึมของเซลล์กลไกการทำงานและประสิทธิภาพในการป้องกันการรั่วซึมของสิ่งต่างๆได้รับการคุ้มครองอย่างเพียงพอในเอกสารทางวิทยาศาสตร์

สัญญาเทคนิคทิศทางการเพิ่มประสิทธิภาพของการเก็บรักษาของไขกระดูกและเซลล์เลือดสายสะดือคือการรวมในการแก้ปัญหาเดียวกันกับความเข้มข้นต่ำ cryoprotectants กับกลไกที่แตกต่างกันของการกระทำเช่นการทำหน้าที่ในระดับเซลล์ของ DMSO และแป้ง hydroxyethyl หรือโปรตีนชนิดหนึ่งที่มีผลการปิดล้อม extracellular

สำหรับการเก็บรักษาของเซลล์เลือดจากสายสะดือมีการใช้วิธีการแก้ปัญหาแบบดั้งเดิม DMSO 20% ซึ่งเป็นกลไกถาวรกวนในอ่างน้ำแข็งกำลังค่อย ๆ เทลงในเซลล์แขวนลอยเพื่อให้บรรลุเท่ากับ (1: 1) อัตราส่วนปริมาณของเซลล์แขวนลอยและ cryoprotectant ความเข้มข้นสุดท้ายของ dimethyl sulphoxide คือ 10% ระงับเซลล์ถูกระบายความร้อนในโปรแกรมที่ HS ความเร็ว krioustanovke / นาทีถึง -40 องศาเซลเซียสหลังจากที่อัตราการเย็นตัวเพิ่มขึ้นถึง 10 ° C / นาที หลังจากเก็บถึงอุณหภูมิ -100 องศาเซลเซียสภาชนะที่มีการระงับเซลล์จะถูกใส่ไว้ในไนโตรเจนเหลว (-196 องศาเซลเซียส) ด้วยวิธีการเก็บรักษาด้วยความเย็นนี้ความปลอดภัยของเซลล์โมโนนิวเคลียร์ที่ใช้งานได้หลังจากละลายได้ถึง 85% ของระดับเริ่มต้น

การปรับเปลี่ยนวิธีการเก็บรักษาแบบใช้ความเย็นแบบแช่เย็นมีวัตถุประสงค์เพื่อลดความเข้มข้นของ DMSO โดยการเติมไฮดรอกซีลิกสตาร์ช (ความเข้มข้นสุดท้ายของ dimethyl sulfoxide และ hydroxyethyl starch เท่ากับ 5% และ 6% ตามลำดับ) ประสิทธิภาพของการรวมกันของ cryoprotectants นี้จะสังเกตได้เมื่อการระงับเซลล์ของเยื่อหุ้มปอดมีการแช่แข็งโดยไม่ลดระดับ cytoprotection ลงไปกว่าสารละลาย dimethylsulfoxide เพียง 10% เท่านั้น จำนวนเซลล์นิวเคลียสที่มีชีวิตได้ถึง 96.7% ของระดับพื้นฐานและกิจกรรมการทำงานของพวกเขาซึ่งประเมินโดยจำนวนของ CFU-GM คือ 81.8%

เมื่อใช้วิธีการแก้ปัญหา sulfoxide dimethyl ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 5-10% ในการรวมกันกับแป้ง hydroxyethyl 4% (ความเข้มข้นสุดท้าย) พบว่าการเก็บรักษาของเซลล์ CD34-ในเชิงบวกในช่วงนี้ Dimethylsulfoxide ไม่เปลี่ยนแปลงจริง ในขณะเดียวกันในเงื่อนไขของการลดความเข้มข้นของ DMSO 5-2.5% เป็นที่สังเกตตายของมวลของเซลล์เลือดจากสายสะดือ - จำนวนหน่วยเซลล์ทำงานได้จะลดลง 85.4-12.2% เขียนคนอื่น ๆ ก็ได้ข้อสรุปว่ามันเป็น 5 และ 10% การแก้ปัญหาของ dimethyl sulfoxide (ในศูนย์รวมลิขสิทธิ์ - ร่วมกับเซรั่ม autologous) อย่างมีประสิทธิภาพสูงสุดให้ไซโตโปรเทคแตนต์ในระหว่างการเก็บรักษาสาย HSC เลือด นอกจากนี้ตามลำดับความปลอดภัยสูงและแช่แข็งเซลล์ละลายมีการทำเครื่องหมายในกรณีของการรวมกันของ 5 หรือ 10% DMSO 4% วิธีการแก้ปัญหาจาก hydroxyethyl starch โดยเฉพาะอย่างยิ่งในอัตราที่ระบายความร้อนควบคุม TOS / นาที ในกระดาษที่ใช้วิธีการแก้ปัญหา cryoprotective ประกอบด้วยสามส่วนผสมแล้ว - DMSO โปรตีนชนิดหนึ่งของมนุษย์บริสุทธิ์และขนาดกลาง RPMI ในอัตราส่วน 1: 4: 5 ซึ่งได้รับการเพิ่มการระงับเซลล์ถึงอัตราส่วนปริมาณเท่ากับ (ความเข้มข้น DMSO สุดท้ายคือ 5%) หลังจากละลายน้ำแข็งในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ + 4 ° C ความปลอดภัยของ CFU-GM เกิน 94%

ผู้เขียนบางคนแนะนำให้ใช้เลือดจากเส้นเลือดที่ไม่ผ่านการคัดเลือกในการเก็บรักษาด้วยความเย็นเนื่องจากเซลล์เม็ดเลือดแดงจำนวนมากจะสูญเสียไปในระหว่างการกำจัดเซลล์เม็ดเลือดแดง ในรูปแบบนี้สารละลาย dimethylsulfoxide 10% ถูกนำมาใช้เพื่อป้องกันเซลล์โมโนนิวเคลียร์จากผลเสียหายที่ตกค้างในกระบวนการ cryocrystallization การแช่แข็งจะดำเนินการที่อัตราการระบายความร้อนที่สม่ำเสมอของ HS / นาทีถึง -80 องศาเซลเซียสหลังจากนั้นการระงับเซลล์เม็ดเลือดแดงสะดือจะแช่อยู่ในไนโตรเจนเหลว ด้วยวิธีการแช่แข็งนี้จะเกิดการย่อยสลายเม็ดเลือดแดงบางส่วนดังนั้นตัวอย่างเลือดจึงไม่จำเป็นต้องมีการแยกตัว หลังจากการละลายแล้วเซลล์จะถูกชะล้างจากเฮโมโกลบินและ dimethylsulfoxide ฟรีในสารละลาย albumin มนุษย์หรือในซีรัม autologous ของผู้ป่วยและใช้สำหรับการปลูกถ่าย

การเก็บรักษาของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดหลังจากละลายน้ำแข็งเลือดจากสายสะดือ unfractionated ย่อมสูงกว่า fractionated แต่ในการเชื่อมต่อกับ krioustoychivostyu ของเซลล์เม็ดเลือดแดงสามารถทำให้เกิดปัญหาร้ายแรงเป็นผลมาจากการถ่ายโพสต์ถ่ายเซลล์เม็ดเลือดแดง ABO-เข้ากันไม่ได้ นอกจากนี้ปริมาตรของเลือดที่ไม่ได้จัดเก็บไว้เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ จากจุดทางคลินิกในมุมมองยังคงมากขึ้นโดยเฉพาะอย่างยิ่งการเก็บรักษาก่อนหน้านี้แยกและบริสุทธิ์จากเศษส่วนโทรศัพท์มือถืออื่น ๆ ของเซลล์เม็ดเลือดเลือดจากสายสะดือ

โดยเฉพาะอย่างยิ่งวิธีการคือการเก็บรักษาของเซลล์เลือดจากสายสะดือ fractionated ช่วยให้ลบเม็ดเลือดแดงในการเตรียมตัวสำหรับการแช่แข็งซึ่งใช้วิธีการแก้ปัญหา 6% ของแป้ง hydroxyethyl ในการแก้ปัญหาองค์ประกอบ plazmozameshchath ว่า "Stabizol" หลังจากการละลายแล้วการระงับเซลล์ที่ได้รับจึงพร้อมสำหรับการใช้งานทางคลินิกโดยไม่มีการจัดการเพิ่มเติม

ดังนั้นในปัจจุบันมีวิธีการที่ค่อนข้างมีประสิทธิภาพในการเก็บรักษาเลือดจากสายสะดือ ความแตกต่างหลักคือตัวอย่างเลือดจะถูกแช่แข็งหรือแยกย่อยออกเป็นเศษส่วนของเซลล์ในระหว่างขั้นตอนการเตรียมและเซลล์นิวเคลียสที่เก็บเกี่ยวได้โดยไม่มีส่วนผสมของ erythrocytes

การปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดโลหิตจางของเลือดจากสายสะดือ

ในช่วงปลายทศวรรษที่ 80 - ต้นปี 90 ของศตวรรษที่ผ่านมาพบว่าเลือดจากสายสะดือที่จัดหาทารกในครรภ์มีเนื้อหาเกี่ยวกับเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดสูง ความเรียบง่ายที่สัมพันธ์กันในการได้รับเซลล์เม็ดเลือดแดงสายสะดือและปัญหาทางจริยธรรมที่เห็นได้ชัดทำให้เกิดการใช้เซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูกในทางการแพทย์ การปลูกถ่ายเลือดจากสายสะดือครั้งแรกที่เกิดขึ้นกับเด็กที่เป็นโรคโลหิตจาง Fanconi เป็นจุดเริ่มต้นในการขยายปริมาณการปลูกถ่ายไขกระดูกและสร้างระบบสำหรับการจัดหาเงินทุนของธนาคาร ในระบบทั่วโลกของธนาคารเลือดจากสายสะดือที่ใหญ่ที่สุดคือ New York Center for Placental Blood ซึ่งอยู่ในงบดุลของ National Institutes of Health จำนวนตัวอย่างเลือดจากสายสะดือที่เก็บไว้ในธนาคารนี้ใกล้ถึง 20 LLC จำนวนผู้รับ (ส่วนใหญ่เป็นเด็ก) เติบโตขึ้นและมีการย้ายปลูกถ่ายที่ประสบความสำเร็จ ตามที่กระทรวงสาธารณสุขสหรัฐฯกำหนดให้ระยะเวลาที่ผู้ป่วย HSC สายสะดือมีชีวิตอยู่ได้นานเกิน 10 ปี

นี้ไม่น่าแปลกใจเช่นการศึกษาจำนวนมากที่มีศักยภาพของเม็ดเลือดเลือดสายสะดือได้แสดงให้เห็นว่าปริมาณและคุณภาพของเซลล์ต้นกำเนิดที่เก่าแก่ที่สุดไม่เพียง แต่ไม่ด้อยกว่าผู้ใหญ่มนุษย์ไขกระดูก แต่ยังตามมาตรการบางอย่างมันเกิน มีศักยภาพในการเจริญสูงขึ้นของเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดจากสายสะดือที่เกิดจากเซลล์สัญญาณคุณสมบัติพัฒนาการการปรากฏตัวของผู้รับ HSCs ปัจจัยการเจริญเติบโตจำเพาะความจุของเซลล์เลือดจากสายสะดือเพื่อ autocrine การผลิตปัจจัยการเจริญเติบโตที่มีขนาดใหญ่และความยาวของ telomeres

ดังนั้นลักษณะทางพันธุกรรมและลักษณะฟีโนไทป์ของเซลล์เม็ดเลือดแดงสายสะดือในเลือดจากลำไส้เล็กจึงเป็นตัวกำหนดการถ่ายภาพเชิงคุณภาพของการปลูกถ่ายที่มีศักยภาพในการฟื้นฟูผู้บริจาคโลหิตในตัวรับ

ข้อดีของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดขาวของสายสะดือ

ระหว่างประโยชน์ที่แท้จริงของการใช้เซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดสายเลือดสำหรับการปลูกกว่าแหล่งอื่น ๆ ของเซลล์เม็ดเลือดมันควรจะตั้งข้อสังเกตเกือบเป็นศูนย์ความเสี่ยงต่อสุขภาพของผู้บริจาค (ถ้าไม่ได้รับการยกย่องว่าเป็นเช่นรก) ในขณะที่การขจัดความจำเป็นของการดมยาสลบ การใช้เลือดจากสายสะดือเพิ่มความเป็นไปได้ในการปลูกถ่ายเซลล์เนื่องจากการปลูกถ่ายร่วมกันบางส่วนในระบบ HLA (การเข้ากันไม่ได้ระหว่างหนึ่งถึงสามแอนติเจน) เทคนิคการจัดเก็บระยะยาวของเซลล์เม็ดเลือดเลือดจากสายสะดืออยู่ในสภาพแช่แข็งซึ่งจะเป็นการเพิ่มความน่าจะเป็นของการได้รับที่หายาก HLA ชนิดและช่วยลดเวลาในการค้นหา HLA ที่จับคู่ปลูก allogeneic ในขณะเดียวกันความเสี่ยงในการเกิดการติดเชื้อแฝงที่ส่งผ่านเส้นทางการส่งผ่านจะลดลงอย่างมาก นอกจากนี้ยังมีรูปแบบการประกันชีวิตทางชีวภาพที่ไม่แพงในแง่ของความเป็นไปได้ที่จะใช้เซลล์เม็ดเลือดแดงจากสายสะดือในการปลูกถ่าย autologous

แต่เนื่องจากปริมาณเล็ก ๆ ของเลือดที่สามารถเก็บได้จากรก (เฉลี่ยไม่เกิน 100 มล.) ก่อนปัญหาของการได้รับจำนวนเงินที่เป็นไปได้สูงสุดของเลือดจากหลอดเลือดดำสายสะดือในการปฏิบัติตามอย่างเคร่งครัดกับเงื่อนไขของความเสี่ยงต่ำสุดของการปนเปื้อนของแบคทีเรียในเลือดที่ได้มาจากสายสะดือกลุ่มตัวอย่าง

เซลล์เม็ดเลือดดั้งเดิมจากเลือดสายสะดือจะมีการระบุโดยทั่วไปโดยการปรากฏตัวบนพื้นผิว CD34 glikofosfoproteina ของพวกเขาและบนพื้นฐานของคุณสมบัติการทำงานของพวกเขาโดยการตรวจสอบการทดสอบ clonogenic หรือก่ออาณานิคมในหลอดทดลอง การวิเคราะห์เปรียบเทียบพบว่าในเลือดจากสายสะดือและไขกระดูกเนื้อหาสูงสุดของ CD34 บวกเซลล์โมโนนิวเคลียร์ในส่วนที่มีตามลำดับ 1.6 และ 5.0% ซึ่งเป็นระดับสูงสุดของการสร้างหน่วยอาณานิคมใน subpopulation ของ CD34 เซลล์ + A - 80 และ 25% มีประสิทธิภาพโคลนรวมของ CD34 + -cells - 88 และ 58% อาณานิคมสูงสุดอดีตเซลล์มีการเจริญที่มีศักยภาพสูง (HPP-CFC ใน -populyatsii CD34 +) - 50 และ 6.5% มันควรจะเสริมว่าประสิทธิภาพโคลน CD34 + CD38 เซลล์และความสามารถในการตอบสนองต่อการกระตุ้นไซโตไคน์ยังสูงในเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดของเลือดจากสายสะดือ

รวมแอนติเจนฟีโนไทป์ของพระองค์-1, CD34 และ CD45RA ยืนยันความจุสูงการเจริญของเซลล์เม็ดเลือดเลือดจากสายสะดือและการแสดงออกของสามแอนติเจนบนพื้นผิวของเซลล์เลือดจากสายสะดือแสดงให้เห็นว่าพวกเขาอยู่ในเซลล์ต้นกำเนิด นอกจากนี้ยังได้มีการระบุว่าเลือดจากสายสะดือมีเซลล์ที่มีลักษณะเป็น CD34 + ที่ไม่มีเครื่องหมายความแตกต่างเชิงเส้น ระดับในเลือดจากสายสะดือของ subpopulations เซลล์ที่มีลักษณะฟีโนไทป์ของ CD34 + / Lin เป็นประมาณ 1% ของจำนวนเซลล์ทั้งหมดที่มี CD34- บวก เซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดก่อให้เกิดเลือดจากสายสะดือเป็นเซลล์ต่อมน้ำเหลืองและจำนวนของ pluripotent แตกต่างของเซลล์เม็ดเลือดขาวชนิดเชิงเส้นซึ่งแสดงให้เห็นว่าพวกเขาอยู่ในเซลล์ต้นกำเนิด

ดังที่ได้กล่าวมาแล้วความแตกต่างที่สำคัญระหว่างไขกระดูกและเลือดจากสายสะดือคือจำนวนเซลล์เม็ดเลือดที่ใช้ในการปลูกถ่ายที่ได้จากขั้นตอนเดียว เมื่อสูญเสียปลูกถ่ายไขกระดูกของมวลเซลล์ในกระบวนการแยก, การเก็บรักษา, การละลายและการทดสอบจะได้รับอนุญาตในช่วง 40-50% ที่เซลล์เลือดจากสายการสูญเสียดังกล่าวเป็นอย่างมากตั้งแต่เมื่อใช้จำนวนไม่เพียงพอของ HSC ปลูกอาจจะไม่สามารถป้องกันได้ ตามที่จี Kogler, et al (1998) สำหรับการปลูกถ่ายเซลล์ในน้ำหนักตัวผู้รับ 10 กิโลกรัมการปลูกที่มีศักยภาพ (จำนวนรวมของการเก็บตัวอย่างเลือดจากสายสะดือ - 2098) อาจจะทั้งหมดตัวอย่างเลือดจากสายสะดือน้ำหนักตัว 35 กก. - 67% และมีเพียง 25% ของตัวอย่างจะสามารถให้การปลูกถ่ายที่มีประสิทธิภาพในผู้ป่วยที่มีน้ำหนักตัว 50-70 กก. สถานการณ์ทางคลินิกนี้บ่งบอกถึงความจำเป็นในการเพิ่มประสิทธิภาพและปรับปรุงประสิทธิภาพของวิธีการสุ่มตัวอย่างการสืบพันธุ์และการเก็บรักษาเซลล์เม็ดเลือดแดงที่สะดือ ดังนั้นประเด็นของมาตรฐานของวิธีการสุ่มตัวอย่างทดสอบการแยกและการเก็บรักษาของเลือดจากสายสะดืออยู่ในขณะนี้มีการหารือกันอย่างแพร่หลายในวรรณกรรมสำหรับการสร้างธนาคารเลือด, การใช้งานในคลินิกเช่นเดียวกับการจัดตั้งและเงื่อนไขของการจัดเก็บของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดของเลือดจากสายสะดือ

[7], [8], [9],

การใช้เซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดขาวของเลือดจากสายสะดือในยา

มักจะมาจากเลือดสายสะดือสามารถแยกได้ถึง 10 ⁶เซลล์เม็ดเลือดลำต้นไม่ค่อยมากขึ้น ในการเชื่อมต่อกับเรื่องนี้จนถึงวันนี้ยังคงมีคำถามเกี่ยวกับความเพียงพอของเซลล์เม็ดเลือดขาวที่เป็นเม็ดเลือดเพื่อให้เซลล์เม็ดเลือดของผู้รับที่เป็นผู้ใหญ่ ความคิดเห็นเกี่ยวกับเรื่องนี้ถูกแบ่งออก นักวิจัยบางคนเชื่อว่าเงินจำนวนนี้จะเพียงพอสำหรับเด็กปลูก แต่มีขนาดเล็กเกินไปที่จะปลูกมนุษย์ผู้ใหญ่ซึ่งการบริหารที่เหมาะสม (7-10) × 10 ⁶เซลล์ CD34 บวกต่อ 1 กิโลกรัมของน้ำหนักร่างกาย - เฉลี่ย 7 × 10 ⁸ต่อการปลูกถ่าย จากการคำนวณดังต่อไปนี้หนึ่งตัวอย่างสายสะดือมีเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดประมาณ 700 เท่าน้อยกว่าที่จำเป็นสำหรับการปลูกถ่ายหนึ่งครั้งต่อผู้ป่วยที่เป็นผู้ใหญ่ อย่างไรก็ตามเช่นการประเมินเชิงปริมาณจะทำโดยการเปรียบเทียบกับจำนวนของเซลล์ที่ถ่ายเซลล์ในไขกระดูกและเพิกเฉยต่อคุณสมบัติของ ontogenetic ของเม็ดเลือดแดง

โดยเฉพาะอย่างยิ่งไม่สนใจความจริงที่กำลังการผลิตที่สูงขึ้นการเจริญของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดของเลือดจากสายสะดือเมื่อเทียบกับเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดของไขกระดูก ผลการศึกษาในหลอดทดลองอดีตอาณานิคมที่อาจเกิดขึ้นแสดงให้เห็นว่ายาเดียวสามารถให้สะดือปฏิสังขรณ์สายเม็ดเลือดโลหิตของผู้รับผู้ใหญ่ บนมืออื่น ๆ ที่เราไม่ควรลืมว่าจำนวน HSCs ลดลงแม้จะอยู่ในกระบวนการของการพัฒนาตัวอ่อน: เนื้อหาของเซลล์ CD34 บวกในเลือดสายสะดือจะลดลงเป็นเส้นตรง 5 ครั้งในระยะเวลา 20 สัปดาห์ที่ผ่านมา (เลือดสำหรับการศึกษาที่ได้รับในกรณีที่มีการเลิกจ้างก่อนวัยอันควรของการตั้งครรภ์) ถึง 40 สัปดาห์ของการตั้งครรภ์ (ระยะเวลาของการเกิดทางสรีรวิทยา) ซึ่งมาพร้อมกับขนานเพิ่มขึ้นอย่างถาวรในการแสดงออกของเครื่องหมาย cytotifferentiation เชิงเส้น

เนื่องจากไม่มีวิธีมาตรฐานในการหาปริมาณของเซลล์ต้นกำเนิดในตัวอย่างเลือดจากสายสะดือการถกเถียงเกี่ยวกับปริมาณรังสีคอสมิกในเลือดจากสายสะดือที่ดีที่สุด นักวิจัยบางคนเชื่อว่าจำนวนเซลล์นิวเคลียสและเซลล์โมโนนิวเคลียร์ที่คำนวณใหม่สำหรับน้ำหนักตัวของผู้รับคือขนาดของยานี้สามารถใช้เป็นเกณฑ์ในการเลือกตัวอย่างสะดือได้ ผู้เขียนบางคนเชื่อว่าเกณฑ์ขั้นต่ำอย่างน้อยของเซลล์ CD34 + ถึงแม้จะใช้ในการทำ autologous transplantation ของ HSC คือ 2 x 10 ⁶ / kg การเพิ่มขึ้นของปริมาณของเซลล์เม็ดเลือดถึง 5 × 10 ⁶เซลล์ / กิโลกรัม (รวม 2.5) แล้วยังมีมากขึ้นเหมาะสำหรับช่วงหลังปลูกต้นจะช่วยลดอุบัติการณ์ของภาวะแทรกซ้อนติดเชื้อและลดระยะเวลาในช่วงเวลาของการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะป้องกัน

ตามที่อี Gluckman, et al (1998) ในโลหิตวิทยาสำหรับการปลูกที่ประสบความสำเร็จของเซลล์เม็ดเลือดสายสะดือมันคือการแนะนำของอย่างน้อย 3.7 × 10 ⁷เซลล์ nucleated ต่อน้ำหนักตัว 1 กิโลกรัมของผู้รับ ด้วยการลดขนาดของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดให้เป็น 1 x 10 ⁷และเซลล์นิวเคลียสน้อยลงต่อน้ำหนักตัว 1 กิโลกรัมความเสี่ยงต่อความล้มเหลวของการทวารหนักและการกลับเป็นซ้ำของมะเร็งจะเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว ควรตระหนักว่าจำนวนเซลล์ต้นกำเนิดขั้นต่ำที่จำเป็นสำหรับการฟื้นตัวอย่างรวดเร็วของ hemopoiesis หลังการปลูกถ่าย allogenic GSG ยังไม่ทราบ ในทางทฤษฎีนี้สามารถทำได้โดยใช้เซลล์เดียว แต่ในทางคลินิกการปลูกถ่ายไขกระดูกอย่างรวดเร็วและมีเสถียรภาพ engraftment ถ่ายรับประกันอย่างน้อย (1-3) × 10 ⁸เซลล์นิวเคลียสต่อ 1 กิโลกรัมของน้ำหนักร่างกายของผู้ป่วย

การศึกษารายละเอียดล่าสุดเพื่อหาจำนวน HSC ที่เหมาะสมที่สุดในการรักษาด้วยโลหิตวิทยารวมถึงการสังเกตผู้ป่วยในกลุ่มที่แยกได้สามกลุ่มขึ้นอยู่กับเนื้อหาของเซลล์ CD34 ที่เป็นบวกในวัสดุปลูกถ่าย ผู้ป่วยกลุ่มแรกได้รับ (3-5) x 10 ⁶เซลล์ / กิโลกรัม ปริมาณของ HSC ในผู้ป่วยในกลุ่มที่สองคือ (5-10) x 10 ⁶เซลล์ / กิโลกรัมและผู้ป่วยในกลุ่มที่สามได้รับการปลูกถ่ายมากกว่า 10 x 10 ⁶เซลล์ CD34 + / กก. ผลลัพธ์ที่ดีที่สุดในกลุ่มผู้รับที่ได้รับการปลูกถ่ายมีจำนวน CD34-positive เท่ากับ (3-5) x 10 ⁶ / kg ด้วยการเพิ่มขนาดของเซลล์ที่ปลูกถ่ายมากกว่า 5 × 10 ⁶ / กก. ไม่มีการระบุถึงผลประโยชน์ที่มีนัยสำคัญทางสถิติ ในเวลาเดียวกันเนื้อหา HSC ที่มีขนาดใหญ่มากในการปลูกถ่าย (> 10 x 10 ⁶ / kg) มีส่วนเกี่ยวข้องกับการเนื้องของจำนวนเซลล์เนื้องอกที่ตกค้างจำนวนมากซึ่งจะนำไปสู่การกลับเป็นซ้ำของโรค ไม่มีความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างจำนวนเซลล์ปลูกถ่าย allogenic และการพัฒนาปฏิกิริยา "graff versus host"

ประสบการณ์โลกที่สะสมในการปลูกถ่ายเลือดจากสายสะดือของ HSC ยืนยันว่ามีศักยภาพในการ repopulation สูง อัตราการถ่ายเลือดจากสายสะดือมีความสัมพันธ์กับจำนวนของเซลล์ nucleated ผลที่ดีที่สุดคือการปลูกถ่ายยีนขนาด 3 × 10 ⁷ / กก. ในขณะที่ไขกระดูกขนาดยานี้คือ 2 × 10 ⁸ / kg ตามข้อมูลของศูนย์ประสานงานในช่วงปลายปี พ.ศ. 2543 ได้มีการสร้างเซลล์เม็ดเลือดขาวสายสะดือขึ้น 17 แห่งโดยส่วนใหญ่มาจากญาติผู้บริจาค (83%) เห็นได้ชัดว่าเลือดจากสายสะดือถือเป็นอีกทางเลือกหนึ่งสำหรับการปลูกถ่ายไขกระดูกให้แก่ผู้ป่วยที่มีภาวะโลหิตเป็นก้อน

แต่ธรรมชาติของทารกแรกเกิดที่มาของเนื้อเยื่อคอร์โดวาเม็ดเลือดให้กำลังใจเนื่องจากการมีคุณสมบัติการทำงานของ GCW ของตน แต่ประสบการณ์ทางคลินิกอาจจะเป็นเพียงให้คำตอบกับคำถามของความเพียงพอของตัวอย่างเลือดจากสายสะดือสำหรับปฏิสังขรณ์เม็ดเลือดผู้ใหญ่ของผู้รับด้วย aplasia ของโลหิต การปลูกถ่ายเซลล์เลือดจากสายสะดือถูกนำมาใช้ในการรักษาโรคต่างๆของเนื้องอกและไม่ใช่เนื้องอกธรรมชาติ: leukemias และอาการ myelodysplastic ไม่ใช่ Hodgkin ของโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลืองและ neuroblastoma, aplastic จาง แต่กำเนิดโรคโลหิตจาง Fanconi และพัดลมเพชรดำ, ขาดการยึดเกาะเม็ดโลหิตขาวดาวน์ซินโดร Barr, โรคกุนเธอร์โรค Harlera, ลัสซีเมีย .

ความสนใจและการวิจัยที่แยกจากกันควรได้รับแง่มุมทางภูมิคุ้มกันของการปลูกถ่ายเซลล์เลือดในเลือดจากสายสะดือ มันแสดงให้เห็นว่าในกรณีของการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดจากสายสะดือจากผู้บริจาคที่มี HLA ที่จับคู่ผลการปลูกที่ไม่สมบูรณ์จะค่อนข้างน่าพอใจว่าตามที่ผู้เขียนแสดงให้เห็นเลือดจากสายสะดือภูมิคุ้มกันต่ำกว่าไขกระดูก

การศึกษารายละเอียดขององค์ประกอบของเซลล์เลือดสายสะดือแสดงให้เห็นคุณสมบัติของทั้งสองคลื่นความถี่ฟีโนไทป์ของเซลล์ effector ของระบบภูมิคุ้มกันและกิจกรรมการทำงานของพวกเขาที่ช่วยให้การพิจารณาเลือดจากสายสะดือเป็นแหล่งที่มาของ HSCs ที่มีความเสี่ยงค่อนข้างต่ำของการเกิดปฏิกิริยา "รับสินบนเมื่อเทียบกับเจ้าภาพ" คุณสมบัติเพิ่มเติมฟังก์ชั่นยังไม่บรรลุนิติภาวะสาย immunocompetent เซลล์เม็ดเลือดควรจะสังเกตเห็นความไม่สมดุลของการผลิตไซโตไคน์และลดลงในความไวในการ cytokines ระเบียบใหม่ของการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน การยับยั้งกิจกรรม cytotoxic lymphocyte เป็นปัจจัยหนึ่งที่ก่อให้เกิดความทนทานต่อระบบภูมิคุ้มกันของเนื้อเยื่อโลหิตจางที่ปลูก ในประชากรเม็ดเลือดขาวสายสะดือตรงกันข้ามกับเลือดและไขกระดูกของผู้บริจาคผู้ใหญ่ไม่ได้ใช้งาน lymphocytes ที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะและเซลล์ suppressor มีอิทธิพลเหนือกว่า นี่แสดงให้เห็นถึงการลดลงของ T-lymphocytes ในเลือดจากสายสะดือเพื่อตอบสนองต่อระบบภูมิคุ้มกัน คุณลักษณะที่สำคัญของประชากร monocyte ของเซลล์เม็ดเลือดขาวสะดือเป็นเนื้อหาที่มีปริมาณต่ำของเซลล์ที่นำเสนอแอนติเจนที่สมบูรณ์และใช้งานได้จริง

ในมือข้างหนึ่งเป็นระดับต่ำของการครบกำหนดของเซลล์ effector ของระบบภูมิคุ้มกันในสายการอ่านเลือดขยายไปถึงการใช้งานในคลินิกเนื่องจากคุณสมบัติเหล่านี้ช่วยในการลดความรุนแรงของความขัดแย้งภูมิคุ้มกันระหว่างผู้ให้และผู้รับเซลล์ แต่ในทางกลับกันเรารู้ถึงการดำรงอยู่ของความสัมพันธ์ระหว่างระดับของปฏิกิริยา "รับสินบนเมื่อเทียบกับโรคเจ้าภาพ" และมีผลต้านการปลูกคือผลของการพัฒนา "รับสินบนเมื่อเทียบกับโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวที่" ในการศึกษานี้ได้ทำการศึกษาความเป็นพิษต่อเซลล์ของสะดือเซลล์สะดือ ผลการวิจัยพบว่าในทั้งๆที่มีการตอบสนองของภูมิคุ้มกันอ่อนแอจริงๆของเซลล์เลือดจากสายการกระตุ้นแอนติเจนเปิดใช้งานในสถานที่แรกเป็นเซลล์นักฆ่าตามธรรมชาติและเซลล์ killeropodobnymi ที่มีส่วนร่วมอย่างแข็งขันในกลไกของการดำเนินการเป็นพิษป้องกันเนื้องอก นอกจากนี้ในประชากรเม็ดเลือดขาวเลือดจากสายสะดือถูกพบกับฟีโนไทป์ CD16 + CD56 + และ CD16 "TCRa / p +. มันจะสันนิษฐานว่าเซลล์เหล่านี้จะอยู่ในรูปแบบที่ใช้งานได้ใช้ปฏิกิริยา" รับสินบนเมื่อเทียบกับโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว"

ที่สถาบันมะเร็งสถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์ของประเทศยูเครนเซลล์เม็ดเลือดแช่แข็งจากเลือดสายสะดือเป็นยาให้กับผู้ป่วยโรคมะเร็งที่มี hypoplasia ถาวรของโลหิตเนื่องจากการรักษาด้วยเคมีบำบัดและรังสีบำบัด ในผู้ป่วยเหล่านี้การปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดของเลือดจากสายสะดือได้อย่างมีประสิทธิภาพบูรณะกดขี่เลือดเป็นหลักฐานโดยการยกระดับถาวรขององค์ประกอบที่เกิดขึ้นเป็นผู้ใหญ่ในเลือดเช่นเดียวกับการเพิ่มขึ้นของดัชนีชี้วัดพัฒนาการของรัฐของภูมิคุ้มกันของเซลล์และร่างกาย เสถียรภาพ repopulyatsionnogo ผลหลังจากการปลูกถ่ายเซลล์เลือดจากสายสะดือเม็ดเลือดช่วยให้การฉายรังสีและเคมีบำบัดอย่างต่อเนื่องโดยไม่รบกวนการรักษา มีหลักฐานของการมีประสิทธิภาพมากขึ้นผู้ป่วยโรคมะเร็ง allograft เซลล์ต้นกำเนิดสายเลือดคือความเสี่ยงประจำปีของการกำเริบของเนื้องอกในการใช้งานของพวกเขาเป็น 25% เมื่อเทียบกับ 40% ในผู้ป่วยที่มีการปลูกถ่ายกระดูก allogeneic ไขกระดูกยีน

กลไกการออกฤทธิ์ของเซลล์ต้นกำเนิดเลือดจากสายสะดือแช่แข็งควรจะถือว่าเป็นผลมาจากการกระตุ้นร่างกายของผู้รับโลหิตที่เกิดจากความสามารถพิเศษของเซลล์ของทารกแรกเกิดที่จะ autocrine การผลิตปัจจัยการเจริญเติบโตของเม็ดเลือดเช่นเดียวกับผลที่ตามมาของ engraftment ชั่วคราวของผู้บริจาคเซลล์ (ตามการยืนยันของเรา - การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในเนื้อหาของเลือดของทารกในครรภ์ฮีโมโกลผู้รับ 7-15 วันหลังการถ่ายเลือดเปรียบเทียบกับข้อมูลพื้นฐาน) กรณีที่ไม่มีผู้รับของในเลือดจากสายสะดือปฏิกิริยาการโพสต์การถ่าย - ผลของความอดทนญาติของเซลล์ภูมิคุ้มกันเช่นเดียวกับความเชื่อมั่นของเกณฑ์ประโยชน์ของวัสดุชีวภาพแช่แข็ง

เซลล์ต้นกำเนิดเซลล์เม็ดเลือดขาว T เลือดจากสายสะดือนักฆ่าความสามารถในการเปิดใช้งานอยู่ภายใต้อิทธิพลของการกระตุ้นจากภายนอกไซโตไคน์ที่จะใช้ในการพัฒนาวิธีการใหม่ร่างกายอดีตร่างกายและในการกระตุ้นให้เกิดการป้องกันมะเร็งเซลล์พิษต่อมน้ำเหลืองสำหรับ immunotherapy ปลูกตามมา นอกจากนี้ "ยังไม่บรรลุนิติภาวะ" ของจีโนมของเซลล์ภูมิคุ้มกันในเลือดสายสะดือจะช่วยให้การใช้งานของพวกเขาสำหรับการเสริมสร้างกิจกรรมต้านโดยการสร้างแบบจำลองโมเลกุล

วันนี้เลือดจากสายสะดือพบว่ามีการประยุกต์ใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านโลหิตวิทยาสำหรับเด็ก ในเด็กที่มีโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลัน allotransplantation ของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดของเลือดจากสายสะดือเมื่อเทียบกับ allografts ไขกระดูกช่วยลดอุบัติการณ์ของการเกิดปฏิกิริยา "รับสินบนเมื่อเทียบกับเจ้าภาพ" อย่างไรก็ตามได้มีการตั้งข้อสังเกตในระยะเวลานานของ neutropenia และ thrombocytopenia และขออภัยในระดับที่สูงขึ้นของ 100 วันอัตราการตายหลังปลูก เป็นระยะเวลานานของการกู้คืนใน granulocytes เลือดและเกล็ดเลือดอาจเป็นเพราะความแตกต่างไม่เพียงพอของประชากรของแต่ละ CD34 เซลล์ในเชิงบวกของเลือดสายสะดือเป็นหลักฐานโดยในระดับต่ำของการดูดซึมของ rhodamine กัมมันตรังสีและการแสดงออกต่ำของแอนติเจน CD38 บนพื้นผิวของพวกเขา

ในเวลาเดียวกัน, การปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดเลือดสายสะดือของผู้ป่วยผู้ใหญ่ดำเนินการเนื่องจากการขาดของทั้งสองเข้ากันได้ที่ไม่เกี่ยวข้องกับผู้บริจาคไขกระดูกเช่นเดียวกับโอกาสในการระดม autologous HSC แสดงให้เห็นว่าการอยู่รอดการกำเริบของโรคฟรีประจำปีสูงในผู้ป่วยที่อายุต่ำกว่า 30 ปี (73%) . ช่วงขยายอายุของผู้รับ (18-46 ปี) ลดลงอยู่รอด 53%

การวิเคราะห์เชิงปริมาณของเซลล์ที่มีฟีโนไทป์ CD34 + ไขกระดูกและสายเลือดแสดงให้เห็นว่าสูงกว่า (3.5 เท่า) เนื้อหาของพวกเขาในไขกระดูก แต่เลือดสายสะดือพบว่ามีความเด่นที่สำคัญของเซลล์ที่มีรายละเอียดฟีโนไทป์ของ CD34 + HLA-DR .Izvestno, CD34 เครื่องหมาย chtokletkikrovisimmunologicheskimi + HLA-DR ขยายงานมากขึ้นกว่าเซลล์ที่มี immunophenotype CD34 + HLA-DR + ได้รับการยืนยันในการศึกษาทดลองของการเจริญเติบโตของวัฒนธรรมในระยะยาวของเซลล์เม็ดเลือดในหลอดทดลอง บรรพบุรุษดั้งเดิมมือถือที่มีฟีโนไทป์ CD34 + CD38 มีอยู่ในเลือดจากสายสะดือและไขกระดูก แต่เซลล์เม็ดเลือดสายสะดือด้วยเครื่องหมายตั้ง CD34 + CD38 มีกิจกรรม clonogenic สูงกว่าเซลล์เม็ดเลือดของฟีโนไทป์เดียวกันที่แยกได้จากผู้บริจาคไขกระดูกผู้ใหญ่ นอกจากนี้เซลล์เม็ดเลือดสายสะดือกับ CD34 + CD38 immunophenotype จะเพิ่มจำนวนในการตอบสนองต่อการกระตุ้นด้วย cytokines (IL-3, IL-6, G-CSF) และทำซ้ำอาณานิคม 7 ครั้งมากขึ้นในวัฒนธรรมในระยะยาวกว่าเซลล์ไขกระดูก

ธนาคารของเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูก

สำหรับการพัฒนาที่เหมาะสมของสนามใหม่ของยาในทางปฏิบัติ - การปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดจากสายสะดือเช่นเดียวกับการที่จะดำเนินการปลูกถ่ายกระดูกเม็ดเลือดเซลล์ไขกระดูกก้านคุณต้องมีเครือข่ายที่กว้างขวางของธนาคารเลือดซึ่งจะจัดตั้งขึ้นแล้วในสหรัฐอเมริกาและยุโรป เครือข่ายภายในรัฐของธนาคารเลือดจากสายสะดือถูกรวมเข้าด้วยกันโดยสมาคมธนาคาร Netcord ความเป็นไปได้ในการจัดตั้งสมาคมระหว่างประเทศของธนาคารเลือดจากสายสะดือจะถูกกำหนดโดยความจริงที่ว่าในการดำเนินการปลูกที่ไม่เกี่ยวข้องต้องมีจำนวนมากของกลุ่มตัวอย่างเลือดจากสายสะดือพิมพ์ที่ช่วยให้การเลือกผู้บริจาค HLA-เหมือนกัน เฉพาะการจัดตั้งระบบธนาคารที่มีการจัดเก็บตัวอย่างเลือดประเภทต่างๆของ HLA ไว้เท่านั้นสามารถแก้ปัญหาการหาผู้บริจาคที่จำเป็นได้จริงๆ องค์กรของระบบสายเลือดดังกล่าวจำเป็นต้องมีการพัฒนาบรรทัดฐานด้านจริยธรรมและกฎหมายเบื้องต้นซึ่งกำลังได้รับการกล่าวถึงในระดับนานาชาติ

เพื่อสร้างธนาคารเลือดจากสายสะดือในยูเครนมีความจำเป็นที่จะต้องมีการจัดทำบทบัญญัติและเอกสารต่างๆ

ประการแรกนี่คือคำถามเกี่ยวกับวิธีการมาตรฐานในการสุ่มตัวอย่างการแยกและการแช่แข็งของเลือดจากสายสะดือ มีความจำเป็นต้องกำหนดกฎสำหรับการสุ่มตัวอย่างเลือดจากสายสะดือในโรงพยาบาลคลีนิคตามข้อกำหนดด้านจริยธรรมทางการแพทย์เพื่อกำหนดปริมาณเลือดจากสายสะดือที่จะช่วยให้มั่นใจได้ถึงการปลูกถ่ายที่ประสบความสำเร็จ มันควรจะเทียบและมาตรฐานของเกณฑ์ที่แตกต่างของการประเมินคุณภาพและจำนวนของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดเช่นเดียวกับวิธี HLA-พิมพ์และวิธีการของการวินิจฉัยโรคทางพันธุกรรมและการติดเชื้อที่สามารถส่งโดยการแช่ของเซลล์เลือดจากสายสะดือที่กำหนดเกณฑ์การคัดเลือกทั่วไปผู้บริจาคที่มีสุขภาพดี นอกจากนี้ยังควรกล่าวถึงการสร้างห้องเก็บรักษาที่แยกต่างหากสำหรับเซรุ่มเซลล์และดีเอ็นเอที่ได้จากเลือดจากสายสะดือ

จำเป็นอย่างยิ่งที่จะต้องจัดระเบียบเครือข่ายข้อมูลคอมพิวเตอร์เกี่ยวกับเลือดจากสายสะดือเพื่อใช้ความสัมพันธ์กับการลงทะเบียนผู้บริจาคไขกระดูก เพื่อพัฒนาการปลูกถ่ายเซลล์ใหม่ควรมีการพัฒนาโปรโตคอลพิเศษเพื่อเปรียบเทียบผลลัพธ์ของเลือดจากสายสะดือและการปลูกถ่ายไขกระดูกจากญาติที่เป็น HLA และผู้บริจาคที่ไม่เกี่ยวข้อง ในการจัดการกับปัญหาจริยธรรมและกฎหมายในการใช้งานทางคลินิกของเซลล์เลือดจากสายสะดือสามารถช่วยสร้างมาตรฐานเอกสารรวมทั้งความยินยอมของผู้ปกครองตลอดจนการแจ้งให้ทราบล่วงหน้าของแม่หรือญาติของเด็กที่ระบุโดยโรคทางพันธุกรรมและ / หรือการติดเชื้อ

เงื่อนไขการพิจารณาสำหรับการพัฒนาของการปลูกถ่ายเซลล์ในยูเครนจะยอมรับของโครงการแห่งชาติสำหรับการบริจาคเซลล์ต้นกำเนิดและการพัฒนาความร่วมมือระหว่างประเทศกับประเทศอื่น ๆ ผ่านโลกสมาคมไขกระดูกผู้บริจาค (WMDA) โปรแกรมกระดูกของผู้บริจาคไขกระดูกแห่งชาติสหรัฐ (NMDP) และลงทะเบียนอื่น ๆ

Generalizing ประวัติศาสตร์ยังคงสั้น ๆ ของการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดเลือดสายสะดือเราทราบว่าสมมติฐานแรกของความเป็นไปได้ของการประยุกต์ใช้ทางคลินิกของเลือดจากสายสะดือที่ทำในช่วงต้นยุค 70, ได้รับการยืนยันใน 80 ปีที่ผ่านมาผลจากการศึกษาทดลองในสัตว์และในปี 1988 ปีที่ได้รับการดำเนินการปลูกครั้งแรกของโลกของเซลล์เม็ดเลือดของเลือดจากสายสะดือของมนุษย์และจากนั้นเริ่มที่จะพัฒนาเครือข่ายทั่วโลกของธนาคารเลือดจากสายสะดือ หลังจาก 10 ปีจำนวนผู้ป่วยที่มีเซลล์เม็ดเลือดปลูกสะดือใกล้เลือดจากสายสะดือ 800 ในหมู่พวกเขาป่วยด้วยโรคต่างๆเนื้องอก (มะเร็งเม็ดเลือดขาว, เนื้องอกที่เป็นของแข็ง) และไม่ใช่เนื้องอก (โรคภูมิคุ้มกันบกพร่อง แต่กำเนิด, โรคโลหิตจางโรคที่เกี่ยวข้องกับความผิดปกติของการเผาผลาญ) ธรรมชาติ

ในเลือดจากสายสะดือเนื้อหาของเซลล์ต้นกำเนิดและความมุ่งมั่นจะสูงกว่าในเลือดต่อพ่วงของผู้ใหญ่ เนื่องจากจำนวนของหน่วย granulocyte-macrophage colony-forming และศักยภาพการแพร่กระจายของหลอดเลือดทำให้เลือดจากสายสะดือเพิ่มสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเกินกว่าเลือดที่อยู่รอบข้างของผู้ใหญ่แม้จะมีการแนะนำปัจจัยการเจริญเติบโต ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ในระยะยาวในหลอดทดลองพบว่ามีกิจกรรมการเจริญเติบโตและความมีชีวิตที่เพิ่มขึ้นของเซลล์เม็ดเลือดแดงสะดือมากกว่าเซลล์ไขกระดูก ช่วงเวลาที่สำคัญในการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดสายสะดือมีเม็ดเลือดจำนวนและนิวเคลียสเซลล์ที่มีศักยภาพการปรากฏตัวของการติดเชื้อ cytomegalovirus ที่บริจาค HLA ได้และผู้รับน้ำหนักร่างกายและอายุของผู้ป่วย

อย่างไรก็ตามการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดจากสายสะดือควรได้รับการพิจารณาว่าเป็นทางเลือกในการปลูกถ่ายไขกระดูกเพื่อรักษาโรคเลือดอย่างรุนแรงโดยเฉพาะในเด็ก ปัญหาทางคลินิกของการปลูกถ่ายเซลล์เม็ดเลือดสายสะดือมีมติค่อยๆ - มีเทคนิคการสุ่มตัวอย่างแล้วค่อนข้างมีประสิทธิภาพ, การแยกและการเก็บรักษาของเซลล์เลือดจากสายสะดือให้เงื่อนไขสำหรับการก่อตัวของธนาคารเลือดจากสายสะดือ, วิธีการทดสอบที่มีการปรับปรุงเซลล์นิวเคลียส เหมาะสำหรับการแยกด้วยการจัดซื้อเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดจากเลือดสายสะดือขนาดใหญ่เมื่อสร้างธนาคารควรได้รับการพิจารณาสารละลายเจลาติน 3% และสารละลายไฮดรอกซีลิก 6%

Perehrestenko พี, et al (2001) ถูกต้องชี้ให้เห็นว่าการปลูกถ่ายสายเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดควรใช้สถานที่ที่ถูกต้องในมาตรการการรักษาที่ซับซ้อนที่จะเอาชนะภาวะซึมเศร้าของโลหิตของต้นกำเนิดต่างๆเช่นเลือดจากสายสะดือ GSK แตกต่างกันในจำนวนข้อได้เปรียบที่สำคัญในระหว่างที่สำคัญคือความสะดวกในการเก็บเกี่ยว ไม่มีความเสี่ยงที่จะบริจาคปนเปื้อนต่ำของเซลล์ของทารกแรกเกิดกับไวรัสและค่าใช้จ่ายที่ค่อนข้างต่ำของการปลูก นักเขียนบางคนชี้ให้เห็นว่าการปลูกถ่ายเซลล์เลือดจากสายสะดือน้อยกว่าเซลล์ไขกระดูกจะมาพร้อมกับภาวะแทรกซ้อนที่เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาของ "รับสินบนเมื่อเทียบกับเจ้าภาพ" ซึ่งเป็นเพราะในมุมมองของพวกเขาแสดงออกอ่อนแอในเซลล์เลือดจากสายสะดือของแอนติเจน HLA-DR และของพวกเขา วัยเด็ก อย่างไรก็ตามประชากรหลักของเซลล์ nucleated เลือดสายสะดือเป็น T-lymphocytes (เซลล์ SDZ บวก) ซึ่งมีเนื้อหาอยู่ที่ประมาณ 50% ซึ่งเป็น 20% น้อยกว่าในเลือดของผู้ใหญ่ แต่ความแตกต่างที่ฟีโนไทป์ของประชากรของ T-cell จากนี้ แหล่งที่มาไม่มีนัยสำคัญ

ปัจจัยที่ส่งผลโดยตรงต่อความอยู่รอดของการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดสายสะดือเราควรทราบอายุของผู้ป่วย (ผลลัพธ์ที่ดีที่สุดจะเห็นในผู้รับอายุไม่เกิน 5 ปี) การวินิจฉัยของโรคและรูปแบบของโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว (ที่มีประสิทธิภาพที่สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลัน) ความสำคัญเป็นอย่างมากคือปริมาณของเซลล์เม็ดเลือดขาวสะดือ nucleated รวมทั้งความเข้ากันได้ของ HLA กับผู้รับ มันไม่มีการวิเคราะห์การเกิดอุบัติเหตุของประสิทธิภาพทางคลินิกของการปลูกถ่ายเลือดจากสายสะดือ GSK ในมะเร็งและโลหิตวิทยาแสดงให้เห็นผลลัพธ์ที่ดีที่สุดของการรักษาโดยใช้การปลูกที่เกี่ยวข้อง: หนึ่งปีอยู่รอดปลอดโรคในกรณีนี้ถึง 63% ในขณะที่การปลูกไม่เกี่ยวข้องกัน - เพียง 29%

ดังนั้นการปรากฏตัวของจำนวนมากของเซลล์ต้นกำเนิดในเลือดจากสายสะดือและความสามารถสูง repopulyatsionnaya ทารกแรกเกิดเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดทำให้พวกเขาเหมาะสำหรับการปลูก allogeneic ในผู้ป่วยโรคมะเร็งโลหิตวิทยา อย่างไรก็ตามโปรดทราบว่าย้ำโลหิตหลังจากการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดของเลือดจากสายสะดือ "ถูกยืดเวลา": การฟื้นฟูเนื้อหาในนิวโทรฟิเลือดมักจะเกิดขึ้นในช่วงปลายสัปดาห์ที่ 6 และปรากฏการณ์ thrombocytopenia หายปกติหลังจาก 6 เดือน นอกจากนี้ยังไม่บรรลุนิติภาวะเซลล์สร้างเลือดเลือดสายสะดือไม่ได้ยกเว้นความขัดแย้งภูมิคุ้มกันสนามรุนแรงเฉียบพลันและเรื้อรังปฏิกิริยา "รับสินบนเมื่อเทียบกับเจ้าภาพ" ตั้งข้อสังเกตตามลำดับใน 23 และ 25% ของผู้รับ อาการกำเริบของโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลันโดยสิ้นปีแรกหลังจากปลูกเซลล์เม็ดเลือดสายสะดือจะพบว่าใน 26% ของกรณี

[10], [11]