โคริเนแบคทีเรียม

โรค คอตีบเป็นโรคติดเชื้อ เฉียบพลัน ที่มักเกิดกับเด็ก โดยมีอาการแสดงเป็นอาการพิษคอตีบในร่างกายอย่างรุนแรงและมีอาการอักเสบคล้ายไฟบรินที่บริเวณที่เชื้อโรคเข้าไป ชื่อของโรคนี้มาจากคำภาษากรีก diphthera ซึ่งแปลว่า ผิวหนัง เนื่องจากมีฟิล์มสีขาวเทาหนาๆ ก่อตัวขึ้นที่บริเวณที่เชื้อโรคแพร่พันธุ์

เชื้อก่อโรคคอตีบ - Corynebacterium diphtheriae - ถูกค้นพบครั้งแรกในปี 1883 โดย E. Klebs ในส่วนของฟิล์ม และได้มาจากเชื้อบริสุทธิ์ในปี 1884 โดย F. Leffler ในปี 1888 E. Roux และ A. Yersin ค้นพบความสามารถในการผลิตเอ็กโซทอกซินซึ่งมีบทบาทสำคัญในการก่อโรคและการเกิดโรคคอตีบ การผลิตเซรุ่มต่อต้านพิษโดย E. Behring ในปี 1892 และการใช้เซรุ่มดังกล่าวในการรักษาโรคคอตีบตั้งแต่ปี 1894 ทำให้สามารถลดอัตราการเสียชีวิตได้อย่างมาก การโจมตีโรคนี้ที่ประสบความสำเร็จเริ่มขึ้นหลังจากปี 1923 โดยเกี่ยวข้องกับการพัฒนาวิธีการในการรับอนาทอกซินของโรคคอตีบโดย G. Raion

เชื้อก่อโรคคอตีบอยู่ในสกุล Corynebacterium (ชั้น Actinobacteria) ลักษณะทางสัณฐานวิทยาคือเซลล์มีรูปร่างคล้ายกระบองและปลายหนาขึ้น (ภาษากรีก coryne แปลว่า กระบอง) แตกแขนงออกไป โดยเฉพาะในวัฒนธรรมเก่า และมีสิ่งเจือปนที่เป็นเม็ดเล็ก ๆ

สกุล Corynebacterium ประกอบด้วยสายพันธุ์จำนวนมาก ซึ่งแบ่งออกเป็น 3 กลุ่ม

• Corynebacteria เป็นปรสิตของมนุษย์และสัตว์และทำให้เกิดโรคได้
• แบคทีเรีย Corynebacteria ที่ก่อโรคต่อพืช
• แบคทีเรียคอรีเนแบคทีเรียที่ไม่ก่อโรค แบคทีเรียคอรีเนแบคทีเรียหลายชนิดอาศัยอยู่ในผิวหนัง เยื่อเมือกของคอหอย โพรงจมูก ตา ทางเดินหายใจ ท่อปัสสาวะ และอวัยวะสืบพันธุ์

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]

สัณฐานวิทยาของโคริเนแบคทีเรีย

C. diphtheriae เป็นแท่งตรงหรือโค้งเล็กน้อยที่ไม่เคลื่อนที่ มีความยาว 1.0-8.0 ไมโครเมตร และมีเส้นผ่านศูนย์กลาง 0.3-0.8 ไมโครเมตร ไม่ก่อตัวเป็นสปอร์หรือแคปซูล มักมีอาการบวมที่ปลายข้างใดข้างหนึ่งหรือทั้งสองข้าง และมักมีเม็ดเมตาโครมาติก - เมล็ดโวลูติน (โพลีเมตาฟอสเฟต) ซึ่งเมื่อย้อมด้วยเมทิลีนบลูจะมีสีม่วงอมน้ำเงิน มีการเสนอวิธีการย้อม Neisser พิเศษเพื่อตรวจจับ ในกรณีนี้ แท่งจะถูกย้อมด้วยสีเหลืองฟาง และเมล็ดโวลูตินจะมีสีน้ำตาลเข้ม และมักจะอยู่ที่ขั้ว Corynebacterium diphtheriae สามารถย้อมด้วยสีอะนิลีนได้ดี เป็นแกรมบวก แต่ในวัฒนธรรมเก่า มักจะเปลี่ยนสีและย้อมเป็นลบตาม Gram ลักษณะเฉพาะคือมีรูปแบบที่หลากหลายอย่างชัดเจน โดยเฉพาะในวัฒนธรรมเก่าและภายใต้อิทธิพลของยาปฏิชีวนะ ปริมาณ G + C ใน DNA อยู่ที่ประมาณ 60 โมลเปอร์เซ็นต์

คุณสมบัติทางชีวเคมีของโคริเนแบคทีเรีย

เชื้อแบคทีเรียคอตีบเป็นแบคทีเรียชนิดแอโรบิกหรือแอนแอโรบิกตามต้องการ อุณหภูมิที่เหมาะสมในการเจริญเติบโตคือ 35-37 °C (ขีดจำกัดการเจริญเติบโตคือ 15-40 °C) ค่า pH ที่เหมาะสมคือ 7.6-7.8 ไม่ต้องการสารอาหารมากนัก แต่จะเจริญเติบโตได้ดีกว่าในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีซีรั่มหรือเลือด อาหารเลี้ยงเชื้อซีรั่ม Roux หรือ Loeffler ที่จับตัวเป็นก้อนมีความเฉพาะเจาะจงต่อแบคทีเรียคอตีบ โดยการเจริญเติบโตจะปรากฏขึ้นหลังจาก 8-12 ชั่วโมงในรูปของโคโลนีนูนขนาดหัวหมุด มีสีขาวเทาหรือครีมเหลือง พื้นผิวเรียบหรือเป็นเม็ดเล็กน้อย โดยที่บริเวณรอบนอก โคโลนีจะโปร่งใสกว่าบริเวณตรงกลางเล็กน้อย โคโลนีจะไม่รวมกัน ส่งผลให้เชื้อมีลักษณะเหมือนหนังปลากระเบน ในน้ำซุป การเจริญเติบโตจะแสดงออกมาเป็นความขุ่นสม่ำเสมอ หรือน้ำซุปจะยังคงโปร่งใส และมีฟิล์มบางๆ ก่อตัวบนพื้นผิว ซึ่งจะค่อยๆ ข้นขึ้น สลายตัว และตกตะกอนเป็นเกล็ดที่ด้านล่าง

ลักษณะเด่นของแบคทีเรียคอตีบคือสามารถเจริญเติบโตได้ดีในเลือดและในซีรั่มที่มีโพแทสเซียมเทลลูไรต์เข้มข้นมากจนยับยั้งการเติบโตของแบคทีเรียชนิดอื่นได้ เนื่องมาจาก C. diphtheriae จะเปลี่ยนโพแทสเซียมเทลลูไรต์ให้กลายเป็นเทลลูเรียมโลหะ ซึ่งเมื่อสะสมในเซลล์จุลินทรีย์แล้วจะทำให้แบคทีเรียคอตีบมีสีเทาเข้มหรือสีดำตามลักษณะเฉพาะ การใช้สื่อดังกล่าวจะช่วยเพิ่มเปอร์เซ็นต์ของแบคทีเรียคอตีบที่เพาะพันธุ์

Corynebacterium diphtheriae หมักกลูโคส มอลโตส กาแลกโตส โดยเกิดกรดโดยไม่มีก๊าซ แต่ไม่หมักซูโครส มีซิสทิเนส ไม่มียูรีเอส และไม่เกิดอินโดล ตามลักษณะเหล่านี้ แบคทีเรียเหล่านี้แตกต่างจากแบคทีเรียคอรีฟอร์ม (ไดฟเทอรอยด์) ที่มักพบในเยื่อเมือกของตา (Corynebacterium xerosus) และโพรงจมูก (Corynebacterium pseiidodiphtheriticum) และจากไดฟเทอรอยด์ชนิดอื่น

ในธรรมชาติ แบคทีเรียคอตีบมีอยู่ 3 ประเภทหลัก (ไบโอไทป์) ได้แก่ กราวิส อินเตอร์เมดิน และไมทิส โดยแต่ละประเภทจะมีลักษณะทางสัณฐานวิทยา วัฒนธรรม ชีวเคมี และคุณสมบัติอื่นๆ ที่แตกต่างกัน

การแบ่งแบคทีเรียคอตีบออกเป็นไบโอไทป์นั้นพิจารณาจากรูปแบบของโรคคอตีบในผู้ป่วยที่แยกได้บ่อยที่สุด แบคทีเรียชนิด gravis มักแยกได้จากผู้ป่วยโรคคอตีบชนิดรุนแรงและทำให้เกิดการระบาดเป็นกลุ่ม แบคทีเรียชนิด mitis ทำให้เกิดโรคได้ไม่รุนแรงและเป็นครั้งคราว ส่วนแบคทีเรียชนิด intermedius จะอยู่ในตำแหน่งกลางระหว่างแบคทีเรียทั้งสองชนิด Corynebacterium belfanti ซึ่งก่อนหน้านี้ถูกจัดอยู่ในไบโอไทป์ mitis ถูกแยกออกมาเป็นไบโอไทป์อิสระอีกชนิดหนึ่ง ความแตกต่างหลักจากไบโอไทป์ gravis และ mitis คือความสามารถในการลดไนเตรตให้เป็นไนไตรต์ แบคทีเรียสายพันธุ์ Corynebacterium belfanti มีคุณสมบัติในการยึดเกาะที่เด่นชัด และพบทั้งสายพันธุ์ที่ก่อให้เกิดพิษและไม่ก่อให้เกิดพิษในหมู่แบคทีเรียเหล่านี้

[ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

โครงสร้างแอนติเจนของโคริเนแบคทีเรีย

Corynebacterium เป็นแบคทีเรียที่มีความหลากหลายและมีลักษณะเป็นโมเสกมาก พบแอนติเจนโซมาติกหลายสิบชนิดในเชื้อก่อโรคคอตีบทั้งสามประเภท ซึ่งแบ่งตามซีโรไทป์ ในรัสเซีย ได้มีการจำแนกทางซีโรโลยี โดยสามารถแยกแบคทีเรียคอตีบได้ 11 ซีโรไทป์ โดย 7 ซีโรไทป์หลัก (1-7) และอีก 4 ซีโรไทป์เพิ่มเติมที่พบไม่บ่อย (8-11) ซีโรไทป์ 6 ซีโรไทป์ (1, 2, 3, 4, 5, 7) จัดอยู่ในประเภท gravis และอีก 5 ซีโรไทป์ (6,8,9,10,11) จัดอยู่ในประเภท mitis ข้อเสียของวิธีการจำแนกซีโรไทป์คือ สายพันธุ์จำนวนมาก โดยเฉพาะสายพันธุ์ที่ไม่ก่อให้เกิดพิษ มีการเกาะกลุ่มกันเองหรือเกาะกลุ่มกันได้เอง

[ 11 ]

การพิมพ์ฟาจของ Corynebacterium diphtheriae

มีการเสนอรูปแบบการพิมพ์ฟาจต่างๆ มากมายเพื่อแยกความแตกต่างระหว่างแบคทีเรียคอตีบ ตามรูปแบบการวิจัยของ MD Krylova โดยใช้ชุดฟาจ 9 ตัว (A, B, C, D, F, G, H, I, K) ทำให้สามารถจำแนกสายพันธุ์ที่ก่อพิษและไม่ก่อพิษได้มากที่สุดของประเภท gravis เมื่อพิจารณาถึงความไวต่อฟาจที่ระบุ ตลอดจนคุณสมบัติทางวัฒนธรรม แอนติเจน และความสามารถในการสังเคราะห์โคไรซิน (โปรตีนฆ่าเชื้อแบคทีเรีย) MD Krylova จึงสามารถระบุกลุ่มโคริเนแบคทีเรียอิสระ 3 กลุ่มของประเภท gravis (I-III) แต่ละกลุ่มประกอบด้วยกลุ่มย่อยของแบคทีเรียก่อพิษและกลุ่มที่ไม่ก่อพิษของแบคทีเรียก่อโรคคอตีบ

ความต้านทานต่อแบคทีเรียโคริเนแบคทีเรียม

Corynebacterium diphtheriae มีความทนทานต่ออุณหภูมิต่ำได้ดี แต่จะตายอย่างรวดเร็วที่อุณหภูมิสูง โดยจะตายภายใน 15-20 นาทีเมื่ออุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียส และตายภายใน 2-3 นาทีเมื่ออุณหภูมิเดือด สารฆ่าเชื้อทั้งหมด (ไลโซล ฟีนอล คลอรามีน เป็นต้น) ในความเข้มข้นที่ใช้กันทั่วไปจะทำลายเชื้อได้ภายใน 5-10 นาที อย่างไรก็ตาม เชื้อก่อโรคคอตีบสามารถทนต่อการแห้งได้ดี และสามารถมีชีวิตอยู่ได้นานในเมือก น้ำลาย และอนุภาคฝุ่นที่แห้ง ในละอองละเอียด แบคทีเรียคอตีบสามารถมีชีวิตอยู่ได้นานถึง 24-48 ชั่วโมง

ปัจจัยการก่อโรคของโคริเนแบคทีเรีย

ความก่อโรคของ Corynebacterium diphtheriae ขึ้นอยู่กับการมีอยู่ของปัจจัยหลายประการ

ปัจจัยการยึดเกาะ การล่าอาณานิคม และการบุกรุก

ยังไม่มีการระบุโครงสร้างที่รับผิดชอบต่อการยึดเกาะ แต่หากไม่มีโครงสร้างเหล่านี้ แบคทีเรียคอตีบก็ไม่สามารถเข้ามาตั้งรกรากในเซลล์ได้ บทบาทของโครงสร้างนี้เกิดจากส่วนประกอบบางส่วนของผนังเซลล์ของเชื้อก่อโรค คุณสมบัติการรุกรานของเชื้อก่อโรคเกี่ยวข้องกับไฮยาลูโรนิเดส นิวรามินิเดส และโปรตีเอส

ไกลโคลิปิดที่มีพิษซึ่งอยู่ในผนังเซลล์ของเชื้อก่อโรค เป็น 6,6'-ไดเอสเตอร์ของทรีฮาโลสที่มีกรดคอรีไนไมโคลิก (C32H64O3) และกรดคอรีไนไมโคลิก (C32H62O3) ในอัตราส่วนเท่ากัน (ทรีฮาโลส-6,6'-ไดโคริเนมิโคเลต) ไกลโคลิปิดมีผลทำลายเซลล์เนื้อเยื่อที่บริเวณที่เชื้อก่อโรคขยายพันธุ์

เอ็กโซทอกซินซึ่งกำหนดความก่อโรคของเชื้อก่อโรคและลักษณะของการเกิดโรค เชื้อ C. diphtheriae ที่ไม่ก่อให้เกิดพิษไม่ก่อให้เกิดโรคคอตีบ

เอ็กโซทอกซินถูกสังเคราะห์เป็นสารตั้งต้นที่ไม่มีฤทธิ์ - โซ่โพลีเปปไทด์เดี่ยวที่มีน้ำหนักโมเลกุล 61 kD มันถูกกระตุ้นโดยโปรตีเอสของแบคทีเรียเอง ซึ่งจะตัดโพลีเปปไทด์ออกเป็นเปปไทด์สองชิ้นที่เชื่อมกันด้วยพันธะไดซัลไฟด์: A (mw 21 kD) และ B (mw 39 kD) เปปไทด์ B ทำหน้าที่เป็นตัวรับ - จดจำตัวรับ จับกับตัวรับ และสร้างช่องภายในเยื่อหุ้มเซลล์ซึ่งเปปไทด์ A แทรกซึมเข้าไปในเซลล์และดำเนินกิจกรรมทางชีวภาพของสารพิษ เปปไทด์ A เป็นเอนไซม์ ADP-ribosyltransferase ซึ่งรับรองการถ่ายโอนอะดีโนซีนไดฟอสเฟตไรโบสจาก NAD ไปยังกรดอะมิโนหนึ่งตัว (ฮีสติดีน) ของปัจจัยการยืดตัวของโปรตีน EF-2 เป็นผลจากการดัดแปลง EF-2 จะสูญเสียฤทธิ์ และนำไปสู่การยับยั้งการสังเคราะห์โปรตีนโดยไรโบโซมในระยะการเคลื่อนย้าย สารพิษนี้สังเคราะห์ขึ้นโดย C. diphtheriae เท่านั้นที่พกพายีนของโพรฟาจที่แปลงได้ปานกลางในโครโมโซม โอเปรอนที่เข้ารหัสการสังเคราะห์สารพิษนี้เป็นแบบโมโนซิสทรอนิก ประกอบด้วยคู่ของนิวคลีโอไทด์ 1,900 คู่ และมีโปรโมเตอร์ toxP และบริเวณ 3 แห่ง ได้แก่ toxS, toxA และ toxB บริเวณ toxS เข้ารหัสกรดอะมิโน 25 ตัวของเปปไทด์สัญญาณ (ซึ่งช่วยให้แน่ใจว่าสารพิษจะถูกปล่อยออกมาผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ไปยังช่องว่างรอบเซลล์แบคทีเรีย) toxA คือกรดอะมิโน 193 ตัวของเปปไทด์ A และ toxB คือกรดอะมิโน 342 ตัวของเปปไทด์ B ของสารพิษ การสูญเสียโพรฟาจโดยเซลล์หรือการกลายพันธุ์ในโอเปรอนของสารพิษทำให้เซลล์ก่อพิษได้เล็กน้อย ในทางตรงกันข้าม การไลโซเจนไนเซชันของแบคทีเรีย C. diphtheriae ที่ไม่ก่อให้เกิดพิษโดยแบคทีเรียที่แปลงสภาพจะเปลี่ยนแบคทีเรียเหล่านี้ให้กลายเป็นแบคทีเรียที่ก่อให้เกิดพิษ ซึ่งได้รับการพิสูจน์แล้วอย่างชัดเจนว่าความสามารถในการสร้างพิษของแบคทีเรียคอตีบขึ้นอยู่กับการไลโซเจนไนเซชันของแบคทีเรียคอรีนาเฟจที่แปลงพิษ แบคทีเรียคอรีนาเฟจจะรวมเข้ากับโครโมโซมของแบคทีเรียคอรีนาเฟจโดยใช้กลไกของการรวมตัวใหม่เฉพาะจุด และแบคทีเรียคอรีนาเฟจสามารถมีไซต์การรวมตัวใหม่ (attB) 2 ไซต์ในโครโมโซม และแบคทีเรียคอรีนาเฟจจะรวมเข้ากับไซต์เหล่านี้แต่ละไซต์ด้วยความถี่เท่ากัน

การวิเคราะห์ทางพันธุกรรมของแบคทีเรียคอตีบที่ไม่ก่อให้เกิดพิษจำนวนหนึ่ง ซึ่งดำเนินการโดยใช้โพรบดีเอ็นเอที่มีฉลากซึ่งบรรจุชิ้นส่วนของโอเปรอนทอกซินของคอรีนาเฟจ แสดงให้เห็นว่าโครโมโซมของแบคทีเรียเหล่านี้มีลำดับดีเอ็นเอที่คล้ายคลึงกันกับโอเปรอนทอกซินของคอรีนาเฟจ แต่พวกมันเข้ารหัสโพลีเปปไทด์ที่ไม่ทำงานหรืออยู่ในสถานะ "เงียบ" กล่าวคือไม่ทำงาน ในเรื่องนี้ คำถามทางระบาดวิทยาที่สำคัญมากเกิดขึ้น: แบคทีเรียคอตีบที่ไม่ก่อให้เกิดพิษสามารถเปลี่ยนเป็นแบคทีเรียที่ก่อให้เกิดพิษได้ภายใต้สภาวะธรรมชาติ (ในร่างกายมนุษย์) คล้ายกับที่เกิดขึ้นในหลอดทดลองหรือไม่ ความเป็นไปได้ของการเปลี่ยนแปลงวัฒนธรรมของคอรีนาแบคทีเรียที่ไม่ก่อให้เกิดพิษให้เป็นแบคทีเรียที่ก่อให้เกิดพิษโดยใช้การแปลงฟาจนั้นได้รับการพิสูจน์แล้วในการทดลองกับหนูตะเภา ตัวอ่อนไก่ และหนูขาว อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีการพิสูจน์ว่าสิ่งนี้เกิดขึ้นระหว่างกระบวนการแพร่ระบาดตามธรรมชาติหรือไม่ (และหากเกิดขึ้น เกิดขึ้นบ่อยเพียงใด)

เนื่องจากสารพิษคอตีบในร่างกายของผู้ป่วยมีผลเฉพาะเจาะจงและเฉพาะเจาะจงกับระบบบางระบบ (ระบบซิมพาเทติก-ต่อมหมวกไต หัวใจ หลอดเลือด และเส้นประสาทส่วนปลายได้รับผลกระทบเป็นหลัก) เห็นได้ชัดว่าไม่เพียงแต่จะยับยั้งการสังเคราะห์โปรตีนในเซลล์เท่านั้น แต่ยังทำให้เกิดการรบกวนอื่นๆ ในระบบเผาผลาญอีกด้วย

วิธีการต่อไปนี้สามารถใช้เพื่อตรวจหาความเป็นพิษของแบคทีเรียคอตีบ:

• การทดสอบทางชีววิทยากับสัตว์ การติดเชื้อในชั้นผิวหนังของหนูตะเภาด้วยสารกรองจากน้ำซุปเพาะเชื้อของแบคทีเรียคอตีบทำให้เกิดเนื้อตายที่บริเวณที่ฉีด พิษในปริมาณเล็กน้อยเพียง 20-30 นาโนกรัม สามารถทำให้หนูตะเภาที่มีน้ำหนัก 250 กรัมตายได้เมื่อฉีดเข้าใต้ผิวหนังในวันที่ 4-5 อาการที่แสดงออกอย่างชัดเจนที่สุดของการออกฤทธิ์ของพิษคือต่อมหมวกไตได้รับความเสียหาย ซึ่งต่อมหมวกไตจะขยายใหญ่ขึ้นและมีเลือดไหลออกมาก
• การติดเชื้อในตัวอ่อนไก่ พิษคอตีบทำให้ไก่ตาย
• การติดเชื้อของเซลล์เพาะเลี้ยง พิษคอตีบทำให้เกิดผลทางไซโทพาธิกที่ชัดเจน
• การทดสอบการดูดซับภูมิคุ้มกันแบบเชื่อมโยงเอนไซม์ในเฟสแข็งโดยใช้สารต้านพิษที่ติดฉลากด้วยเปอร์ออกซิเดส
• การใช้หัววัด DNA เพื่อตรวจจับโอเปรอนทอกซ์ในโครโมโซมของแบคทีเรียคอตีบโดยตรง

อย่างไรก็ตามวิธีที่ง่ายที่สุดและพบได้บ่อยที่สุดในการตรวจสอบความเป็นพิษของแบคทีเรียคอตีบคือวิธีการทางซีรั่ม - วิธีการตกตะกอนเจล สาระสำคัญคือ แถบกระดาษกรองปลอดเชื้อขนาด 1.5 x 8 ซม. ชุบด้วยเซรั่มป้องกันคอตีบที่ไม่เป็นพิษซึ่งมี 500 AE ใน 1 มล. แล้วทาลงบนพื้นผิวของสารอาหารในจานเพาะเชื้อ จานเพาะเชื้อจะถูกทำให้แห้งในเทอร์โมสตัทเป็นเวลา 15-20 นาที เพาะเชื้อทดสอบด้วยแผ่นเพลททั้งสองด้านของกระดาษ เพาะเชื้อหลายสายพันธุ์ในจานหนึ่ง โดยสายพันธุ์หนึ่งซึ่งมีพิษอย่างเห็นได้ชัดทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม จานเพาะเชื้อจะถูกฟักที่อุณหภูมิ 37 °C ผลจะถูกนำมาพิจารณาหลังจาก 24-48 ชั่วโมง เนื่องจากการแพร่กระจายของแอนติท็อกซินและสารพิษในเจลทำให้เกิดเส้นตกตะกอนที่ชัดเจนที่บริเวณที่เกิดปฏิกิริยา ซึ่งจะรวมเข้ากับเส้นตกตะกอนของสายพันธุ์ที่ก่อให้เกิดพิษควบคุม แถบการตกตะกอนที่ไม่จำเพาะ (แถบนี้เกิดขึ้นหากมีแอนติบอดีต่อต้านจุลินทรีย์อื่นๆ ในปริมาณเล็กน้อยในซีรั่มนอกเหนือจากแอนติท็อกซิน) ปรากฏขึ้นในภายหลัง มีการแสดงออกที่อ่อนแอ และไม่เคยรวมเข้ากับแถบการตกตะกอนของสายพันธุ์ควบคุม

ภูมิคุ้มกันหลังการติดเชื้อ

ผู้ป่วยโรคนี้มักมีอาการรุนแรง เรื้อรัง แทบจะตลอดชีวิต และเกิดซ้ำหลายครั้ง โดยพบเพียงร้อยละ 5-7 ของผู้ป่วยโรคนี้เท่านั้น ภูมิคุ้มกันส่วนใหญ่มีลักษณะต่อต้านพิษ ส่วนแอนติบอดีต่อต้านจุลินทรีย์มีความสำคัญน้อยกว่า

การทดสอบ Schick เคยใช้กันอย่างแพร่หลายในการประเมินระดับภูมิคุ้มกันต่อโรคคอตีบ โดยจะฉีดสารพิษจากหนูตะเภา 1/40 ในปริมาณ 0.2 มล. เข้าชั้นผิวหนังของเด็ก ในกรณีที่ไม่มีภูมิคุ้มกันต่อสารพิษ จะเกิดรอยแดงและบวมที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางมากกว่า 1 ซม. ที่บริเวณที่ฉีดหลังจากผ่านไป 24-48 ชั่วโมง ปฏิกิริยา Schick ที่เป็นบวกดังกล่าวบ่งชี้ว่าไม่มีสารพิษเลยหรือมีปริมาณน้อยกว่า 0.001 AE/ml ในเลือด ปฏิกิริยา Schick ที่เป็นลบจะสังเกตได้เมื่อปริมาณสารพิษในเลือดสูงกว่า 0.03 AE/ml หากปริมาณสารพิษต่ำกว่า 0.03 AE/ml แต่สูงกว่า 0.001 AE/ml ปฏิกิริยา Schick อาจเป็นบวกหรือบางครั้งอาจเป็นลบก็ได้ นอกจากนี้ สารพิษยังมีคุณสมบัติก่อภูมิแพ้ที่เด่นชัด ดังนั้นเพื่อกำหนดระดับภูมิคุ้มกันต่อต้านโรคคอตีบ (ปริมาณแอนติท็อกซินเชิงปริมาณ) จึงควรใช้ RPGA ร่วมกับการวินิจฉัยเซลล์เม็ดเลือดแดงที่ไวต่อท็อกซอยด์โรคคอตีบ

ระบาดวิทยาของโรคคอตีบ

แหล่งที่มาของการติดเชื้อมีเพียงบุคคลเดียว - ผู้ป่วย ผู้ป่วยที่กำลังฟื้นตัว หรือผู้ที่เป็นพาหะของเชื้อแบคทีเรียที่มีสุขภาพดี การติดเชื้อเกิดขึ้นจากละอองฝอยในอากาศ ฝุ่นละอองในอากาศ และจากวัตถุต่างๆ ที่ผู้ป่วยหรือผู้ที่เป็นพาหะของเชื้อแบคทีเรียใช้ เช่น จาน หนังสือ ผ้าปูที่นอน ของเล่น เป็นต้น ในกรณีที่ผลิตภัณฑ์อาหารปนเปื้อน (นม ครีม เป็นต้น) การติดเชื้ออาจเกิดขึ้นได้ผ่านทางทางเดินอาหาร การขับถ่ายของเชื้อโรคในปริมาณมากที่สุดเกิดขึ้นในรูปแบบเฉียบพลันของโรค อย่างไรก็ตาม ผู้ที่มีรูปแบบแฝงของโรคที่ผิดปกติมีความสำคัญทางระบาดวิทยาสูงสุด เนื่องจากมักไม่ได้รับการรักษาในโรงพยาบาลและไม่ได้รับการตรวจพบทันที ผู้ป่วยโรคคอตีบสามารถแพร่เชื้อได้ตลอดระยะเวลาของโรคและส่วนหนึ่งของช่วงการฟื้นตัว ระยะเวลาเฉลี่ยของการแพร่เชื้อในผู้ที่กำลังฟื้นตัวจะแตกต่างกันไปตั้งแต่ 2 ถึง 7 สัปดาห์ แต่บางครั้งอาจใช้เวลานานถึง 3 เดือน

พาหะที่มีสุขภาพดีมีบทบาทพิเศษในระบาดวิทยาของโรคคอตีบ ในสภาวะที่มีการเจ็บป่วยเป็นครั้งคราว พาหะเหล่านี้จะเป็นพาหะหลักของโรคคอตีบ ซึ่งช่วยให้เชื้อก่อโรคคงอยู่ในธรรมชาติได้ ระยะเวลาเฉลี่ยในการแพร่เชื้อสายพันธุ์ที่ก่อให้เกิดพิษนั้นสั้นกว่าเล็กน้อย (ประมาณ 2 เดือน) เมื่อเทียบกับสายพันธุ์ที่ไม่ก่อให้เกิดพิษ (ประมาณ 2-3 เดือน)

สาเหตุของการเกิดแบคทีเรียคอตีบที่ก่อพิษและไม่ก่อพิษนั้นยังไม่ได้รับการเปิดเผยอย่างครบถ้วน เนื่องจากแม้ว่าภูมิคุ้มกันต่อต้านพิษในระดับสูงก็ไม่ได้รับประกันว่าร่างกายจะปลอดจากเชื้อโรคได้อย่างสมบูรณ์เสมอไป อาจเป็นไปได้ว่าระดับภูมิคุ้มกันต่อต้านแบคทีเรียมีความสำคัญในระดับหนึ่ง ความสำคัญทางระบาดวิทยาหลักคือการแพร่กระจายของแบคทีเรียคอตีบที่ก่อพิษ

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

อาการของโรคคอตีบ

ผู้คนทุกวัยมีความเสี่ยงต่อโรคคอตีบ เชื้อก่อโรคสามารถเข้าสู่ร่างกายมนุษย์ได้ผ่านเยื่อเมือกของอวัยวะต่างๆ หรือผ่านผิวหนังที่เสียหาย ขึ้นอยู่กับตำแหน่งของกระบวนการ โรคคอตีบของคอหอย จมูก กล่องเสียง หู ตา อวัยวะเพศ และผิวหนังจะแตกต่างกัน อาจมีรูปแบบผสมกัน เช่น คอตีบของคอหอยและผิวหนัง เป็นต้น ระยะฟักตัวคือ 2-10 วัน ในรูปแบบที่แสดงออกทางคลินิกของโรคคอตีบ การอักเสบของเยื่อเมือกที่มีไฟบรินซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะจะเกิดขึ้นที่บริเวณที่เชื้อก่อโรคเข้าไป สารพิษที่เชื้อก่อโรคสร้างขึ้นจะส่งผลต่อเซลล์เยื่อบุผิวก่อน จากนั้นจึงส่งผลต่อหลอดเลือดใกล้เคียง ทำให้หลอดเลือดซึมผ่านได้มากขึ้น สารคัดหลั่งที่ไหลออกมาจะมีไฟบริโนเจน ซึ่งจะแข็งตัวจนเกิดเป็นฟิล์มสีขาวเทาเคลือบบนเยื่อเมือก ซึ่งจะเกาะติดกับเนื้อเยื่อข้างใต้แน่น และเมื่อถูกฉีกออก จะทำให้มีเลือดออก ผลที่ตามมาของความเสียหายต่อหลอดเลือดอาจส่งผลให้เกิดอาการบวมน้ำในบริเวณนั้น โรคคอตีบในคอหอยเป็นอันตรายอย่างยิ่ง เนื่องจากอาจทำให้เกิดโรคคอตีบเนื่องจากเยื่อเมือกของกล่องเสียงและสายเสียงบวมน้ำ ซึ่งเด็กที่เป็นโรคคอตีบ 50-60% เสียชีวิตจากภาวะขาดออกซิเจน พิษของโรคคอตีบที่เข้าสู่กระแสเลือดจะทำให้เกิดอาการมึนเมาโดยทั่วไป โดยจะส่งผลต่อระบบหัวใจและหลอดเลือด ระบบซิมพาเทติก-ต่อมหมวกไต และเส้นประสาทส่วนปลายเป็นหลัก ดังนั้นอาการของโรคคอตีบจึงประกอบด้วยอาการเฉพาะที่ร่วมกันขึ้นอยู่กับตำแหน่งของทางเข้า และอาการทั่วไปที่เกิดจากพิษของสารพิษและแสดงออกมาในรูปแบบของอาการอ่อนแรง ซึม ผิวซีด ความดันโลหิตต่ำ กล้ามเนื้อหัวใจอักเสบ อัมพาตของเส้นประสาทส่วนปลาย และความผิดปกติอื่น ๆ โรคคอตีบในเด็กที่ได้รับวัคซีน หากสังเกตอาการ มักจะดำเนินไปในรูปแบบที่ไม่รุนแรงและไม่มีภาวะแทรกซ้อน อัตราการเสียชีวิตในช่วงก่อนการใช้เซรุ่มบำบัดและยาปฏิชีวนะอยู่ที่ 50-60% ปัจจุบันอยู่ที่ 3-6%

การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการของโรคคอตีบ

วิธีเดียวในการวินิจฉัยโรคคอตีบทางจุลชีววิทยาคือการตรวจทางแบคทีเรียวิทยา โดยจำเป็นต้องทดสอบเชื้อคอรีเนแบคทีเรียที่แยกออกมาเพื่อดูความเป็นพิษ การศึกษาทางแบคทีเรียวิทยาสำหรับโรคคอตีบจะดำเนินการในสามกรณี:

• เพื่อการวินิจฉัยโรคคอตีบในเด็กและผู้ใหญ่ที่มีกระบวนการอักเสบเฉียบพลันในช่องคอหอย จมูก และโพรงจมูก
• ตามข้อบ่งชี้ทางระบาดวิทยาของผู้ที่สัมผัสกับแหล่งก่อโรคคอตีบ;
• บุคคลที่เพิ่งเข้ารับการดูแลในสถานเลี้ยงเด็กกำพร้า โรงเรียนอนุบาล โรงเรียนประจำ และสถาบันพิเศษอื่น ๆ สำหรับเด็กและผู้ใหญ่ เพื่อระบุผู้ที่อาจเป็นพาหะของโรคคอตีบในหมู่พวกเขา

วัสดุสำหรับการศึกษาคือเมือกจากคอหอยและจมูก ฟิล์มจากต่อมทอนซิลหรือเยื่อเมือกอื่น ๆ ซึ่งเป็นจุดเข้าของเชื้อก่อโรค การเพาะเชื้อจะทำบนซีรั่มเทลลูไรต์หรืออาหารเลี้ยงเชื้อในเลือด และพร้อมกันบนซีรั่ม Roux ที่จับตัวเป็นก้อน (ซีรั่มม้าที่จับตัวเป็นก้อน) หรือ Loeffler (ซีรั่มวัว 3 ส่วน + น้ำซุปน้ำตาล 1 ส่วน) ซึ่งโคริเนแบคทีเรียจะเติบโตหลังจาก 8-12 ชั่วโมง เชื้อที่แยกได้จะถูกระบุโดยการรวมกันของคุณสมบัติทางสัณฐานวิทยา วัฒนธรรม และชีวเคมี โดยใช้วิธีการตรวจซีรั่มและฟาจเมื่อใดก็ตามที่เป็นไปได้ ในทุกกรณี การทดสอบพิษโดยใช้หนึ่งในวิธีการข้างต้นเป็นสิ่งจำเป็น คุณสมบัติทางสัณฐานวิทยาของโคริเนแบคทีเรียควรศึกษาโดยใช้สามวิธีในการย้อมการเตรียมสเมียร์: กรัม ไนเซอร์ และเมทิลีนบลู (หรือโทลูอิดีนบลู)

การรักษาโรคคอตีบ

การรักษาโรคคอตีบโดยเฉพาะคือการใช้ซีรั่มต้านพิษคอตีบที่มีปริมาณอย่างน้อย 2,000 หน่วยสากลต่อ 1 มล. ซีรั่มจะถูกฉีดเข้ากล้ามเนื้อในปริมาณตั้งแต่ 10,000 ถึง 400,000 หน่วยสากล ขึ้นอยู่กับความรุนแรงของโรค วิธีการรักษาที่มีประสิทธิภาพคือการใช้ยาปฏิชีวนะ (เพนนิซิลลิน เตตราไซคลิน อีริโทรไมซิน เป็นต้น) และซัลโฟนาไมด์ เพื่อกระตุ้นการผลิตแอนตี้ท็อกซินของตัวเอง อาจใช้อะนาท็อกซิน เพื่อกำจัดพาหะของแบคทีเรีย ควรใช้ยาปฏิชีวนะที่ไวต่อสายพันธุ์ของโคริเนแบคทีเรียที่ให้มามาก

การป้องกันโรคคอตีบโดยเฉพาะ

วิธีหลักในการต่อสู้กับโรคคอตีบคือการวางแผนฉีดวัคซีนให้กับประชากรจำนวนมาก เพื่อจุดประสงค์นี้ จึงมีการนำวัคซีนต่างๆ มาใช้ รวมถึงวัคซีนรวม ซึ่งมีเป้าหมายเพื่อสร้างภูมิคุ้มกันต่อเชื้อโรคหลายชนิดพร้อมกัน วัคซีนที่แพร่หลายที่สุดในรัสเซียคือ DPT ซึ่งเป็นแบคทีเรียไอกรนที่ดูดซับบนอะลูมิเนียมไฮดรอกไซด์ ฆ่าด้วยฟอร์มาลินหรือไทเมอโรซัล (20 พันล้านตัวใน 1 มล.) และประกอบด้วยท็อกซอยด์คอตีบในปริมาณ 30 หน่วยจับตัวเป็นก้อนและท็อกซอยด์บาดทะยัก 10 หน่วยใน 1 มล. เด็กๆ จะได้รับวัคซีนตั้งแต่อายุ 3 เดือน จากนั้นจึงฉีดซ้ำ ครั้งแรกหลังจาก 1.5-2 ปี ครั้งที่สองเมื่ออายุ 9 และ 16 ปี และทุก 10 ปี

การฉีดวัคซีนจำนวนมากซึ่งเริ่มในสหภาพโซเวียตในปี 1959 ทำให้อุบัติการณ์ของโรคคอตีบในประเทศลดลง 45 เท่าในปี 1966 เมื่อเทียบกับปี 1958 และตัวบ่งชี้ในปี 1969 อยู่ที่ 0.7 ต่อประชากร 100,000 คน การลดปริมาณการฉีดวัคซีนในเวลาต่อมาในช่วงทศวรรษ 1980 นำไปสู่ผลกระทบที่ร้ายแรง ในปี 1993-1996 รัสเซียเผชิญกับการระบาดของโรคคอตีบ ผู้ใหญ่ส่วนใหญ่ไม่ได้ฉีดวัคซีนและเด็กล้มป่วย ในปี 1994 มีผู้ป่วยลงทะเบียนเกือบ 40,000 คน ดังนั้นจึงเริ่มมีการฉีดวัคซีนจำนวนมากอีกครั้ง ในช่วงเวลาดังกล่าว มีผู้ได้รับการฉีดวัคซีน 132 ล้านคน รวมถึงผู้ใหญ่ 92 ล้านคน ในปี 2543-2544 การครอบคลุมของเด็กที่ได้รับวัคซีนภายในระยะเวลาที่กำหนดอยู่ที่ 96% และหากได้รับวัคซีนซ้ำอยู่ที่ 94% ด้วยเหตุนี้อุบัติการณ์ของโรคคอตีบในปี 2544 จึงลดลง 15 เท่าเมื่อเทียบกับปี 2539 อย่างไรก็ตาม เพื่อลดอุบัติการณ์เฉพาะกรณี จำเป็นต้องฉีดวัคซีนให้กับเด็กอย่างน้อย 97-98% ในปีแรกของชีวิต และให้แน่ใจว่ามีการฉีดวัคซีนซ้ำจำนวนมากในปีต่อๆ ไป ไม่น่าจะเป็นไปได้ที่โรคคอตีบจะถูกกำจัดได้หมดในปีต่อๆ ไป เนื่องจากมีแบคทีเรียคอตีบที่ก่อพิษและไม่ก่อพิษแพร่กระจายอยู่ทั่วไป นอกจากนี้ การแก้ไขปัญหานี้ยังต้องใช้เวลาสักระยะหนึ่ง