อิมมูโนอิเล็กโทรโฟรีซิสของโปรตีนในเลือด

โดยปกติพาราโปรตีนจะไม่มีอยู่ในซีรั่มเลือด

ภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง หรือที่เรียกว่าแกมมาพาธี ประกอบด้วยกลุ่มอาการทางพยาธิวิทยาขนาดใหญ่ที่มีลักษณะเฉพาะคือภาวะแกมมาโกลบูลินในเลือดสูงแบบโพลีโคลนัลหรือโมโนโคลนัล อิมมูโนโกลบูลินประกอบด้วยโซ่หนัก (H) สองโซ่ (น้ำหนักโมเลกุล 50,000) และโซ่เบา (L) สองโซ่ (น้ำหนักโมเลกุล 25,000) โซ่เชื่อมโยงกันด้วยสะพานไดซัลไฟด์และประกอบด้วยโครงสร้างที่เรียกว่าโดเมน (โดเมน H-4, L-2) ภายใต้การทำงานของเอนไซม์โปรตีโอไลติก Ig จะถูกแบ่งออกเป็นชิ้นส่วน ได้แก่ ชิ้นส่วน Fc และชิ้นส่วน Fab โซ่หนัก Ig ของมนุษย์แสดงด้วยโครงสร้างห้ารูปแบบ ซึ่งกำหนดด้วยอักษรของอักษรกรีก: γ, α, μ, δ, ε โมเลกุล Ig เหล่านี้มีโครงสร้าง 5 แบบ ได้แก่ G, A, M, D, E โซ่เบาแสดงด้วยโครงสร้างที่แตกต่างกัน 2 แบบ ได้แก่ κ (แคปปา) และ λ (แลมบ์ดา) ซึ่งสอดคล้องกับ Ig 2 ประเภทในแต่ละประเภท ในโมเลกุล Ig แต่ละโมเลกุล ทั้งโซ่หนักและโซ่เบาทั้งสองแบบจะเหมือนกัน โดยปกติแล้วทุกคนจะมี Ig ของทุกประเภทและทั้งสองประเภท แต่เนื้อหาสัมพันธ์ของโมเลกุลเหล่านี้ไม่เหมือนกัน อัตราส่วนของโมเลกุล κ และ λ ภายในประเภท Ig ที่แตกต่างกันก็ไม่เหมือนกันเช่นกัน การตรวจพบความผิดปกติในอัตราส่วนของ Ig หรือชิ้นส่วนของ Ig มีบทบาทสำคัญในการวินิจฉัยโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องแบบโมโนโคลนัล

โรคภูมิคุ้มกันบกพร่องแบบโมโนโคลนัล (พาราโปรตีนในเลือด) เป็นกลุ่มอาการที่แสดงออกด้วยการสะสมของ Ig หรือเศษของ Ig ที่เป็นเนื้อเดียวกันในพารามิเตอร์ทางฟิสิกเคมีและชีวภาพทั้งหมดในซีรั่มเลือดและ/หรือปัสสาวะของผู้ป่วย โรคภูมิคุ้มกันบกพร่องแบบโมโนโคลนัล (พาราโปรตีน โปรตีน M) เป็นผลจากการหลั่งของโคลนหนึ่งของลิมโฟไซต์บี (เซลล์พลาสมา) ดังนั้น จึงเป็นกลุ่มของโมเลกุลที่มีโครงสร้างเป็นเนื้อเดียวกัน โดยมีโซ่หนักของคลาสหนึ่ง (ซับคลาส) โซ่เบาของประเภทหนึ่ง และบริเวณที่แปรผันของโครงสร้างเดียวกัน โรคภูมิคุ้มกันบกพร่องแบบโมโนโคลนัลมักแบ่งออกเป็นแบบที่ไม่ร้ายแรงและแบบร้ายแรง ในโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องแบบโมโนโคลนัลแบบที่ไม่ร้ายแรง การแพร่กระจายของเซลล์พลาสมาจะถูกควบคุม (อาจโดยระบบภูมิคุ้มกัน) ในลักษณะที่ไม่แสดงอาการทางคลินิก ในรูปแบบร้ายแรง การแพร่กระจายของเซลล์ลิมฟอยด์หรือพลาสมาอย่างไม่สามารถควบคุมได้จะเกิดขึ้น ซึ่งจะกำหนดภาพทางคลินิกของโรค

การจำแนกประเภทของโรคภูมิคุ้มกันแบบโมโนโคลนัล

หมวดหมู่ของโรคแกมมาพาธีออนโนโคลนัล	ธรรมชาติของพยาธิวิทยา	ความเข้มข้นของ Ig เชิงพยาธิวิทยาในซีรั่มเลือด, g/l
มะเร็งเซลล์บี	มะเร็งไมอีโลม่าชนิดมัลติเพิลไมอีโลม่า, วอลเดนสตรอมมาโครโกลบูลินเมีย	มากกว่า 25
	พลาสมาไซโตมา (เดี่ยว - กระดูกและไขสันหลัง) มะเร็งต่อมน้ำเหลือง มะเร็งเม็ดเลือดขาวเรื้อรัง โรคห่วงโซ่หนัก	ต่ำกว่า 25
เซลล์ B ชนิดไม่ร้ายแรง	แกมมาพาธีแบบโมโนโคลนัลที่มีต้นกำเนิดที่ไม่ทราบแน่ชัด	ต่ำกว่า 25
ภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่องที่เกิดจากความไม่สมดุลของฮอร์โมน T และ B ในระบบภูมิคุ้มกัน	ขั้นต้น (Wiskott-Aldrich, DiGeorge, Neselef, กลุ่มอาการภูมิคุ้มกันบกพร่องร่วมรุนแรง)	ต่ำกว่า 25
	รอง (เกี่ยวข้องกับอายุ เกิดจากการใช้ยากดภูมิคุ้มกัน เกี่ยวข้องกับโรคมะเร็งชนิดไม่ใช่น้ำเหลือง (เช่น มะเร็งลำไส้ใหญ่ มะเร็งเต้านม มะเร็งต่อมลูกหมาก เป็นต้น)	ต่ำกว่า 2.5
ภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่องที่เกิดจากความไม่สมดุลของฮอร์โมน T และ B ในระบบภูมิคุ้มกัน	การปรับโครงสร้างของระบบภูมิคุ้มกันหลังการปลูกถ่ายไขกระดูกแดง	ต่ำกว่า 25
	การกระตุ้นแอนติเจนในระยะเริ่มต้นของการเกิด (การติดเชื้อในมดลูก)	ต่ำกว่า 25
การตอบสนองภูมิคุ้มกันแบบสม่ำเสมอ	การติดเชื้อแบคทีเรีย	ต่ำกว่า 25
	โรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง เช่น ไครโอโกลบูลินีเมีย, SLE, โรคไขข้ออักเสบรูมาตอยด์ ฯลฯ	ต่ำกว่า 25

อิมมูโนอิเล็กโทรโฟรีซิสของโปรตีนในซีรั่มเลือดช่วยให้สามารถตรวจจับโซ่โมโนโคลนอล (ทางพยาธิวิทยา) IgA, IgM, IgG, H และ L และพาราโปรตีนได้ ระหว่างอิเล็กโทรโฟรีซิสแบบธรรมดา Ig ปกติที่มีคุณสมบัติไม่เหมือนกันจะอยู่ในโซนแกมมา โดยก่อตัวเป็นบริเวณราบหรือแถบกว้าง Ig โมโนโคลนอลเนื่องจากมีความเป็นเนื้อเดียวกัน จึงอพยพไปที่โซนแกมมาเป็นหลัก บางครั้งไปที่โซนเบตาและแม้กระทั่งไปที่บริเวณอัลฟา ซึ่งพวกมันก่อตัวเป็นจุดสูงสุดหรือแถบที่ถูกจำกัดอย่างชัดเจน (เกรเดียนต์ M)

มะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดมัลติเพิลไมอีโลม่า (โรครัสติตสกี้-คาห์เลอร์) เป็นโรคฮีโมบลาสโตซิสแบบพาราโปรตีนที่พบได้บ่อยที่สุด โดยตรวจพบได้ไม่น้อยไปกว่ามะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรังและลิมโฟไซต์ มะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดลิมโฟแกรนูโลมา และมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลัน ประเภทและชนิดของ Ig ที่เกิดจากโรคไมอีโลม่าจะกำหนดรูปแบบทางภูมิคุ้มกันเคมีของโรค ความถี่ของประเภทและชนิดของ Ig ที่เกิดจากโรคไมอีโลม่าโดยทั่วไปจะสัมพันธ์กับอัตราส่วนของประเภทและชนิดของ Ig ปกติในคนปกติ

ควบคู่ไปกับการเพิ่มขึ้นของเนื้อหาของ Ig เชิงพยาธิวิทยาในซีรั่มของผู้ป่วยมะเร็งไมอีโลม่าหลายแห่ง Ig ปกติจะถูกกำหนดในความเข้มข้นที่ลดลง เนื้อหาของโปรตีนทั้งหมดเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว - สูงถึง 100 กรัม / ลิตร กิจกรรมของกระบวนการในมะเร็งไมอีโลม่า G จะถูกประเมินโดยจำนวนเซลล์พลาสมาในการเจาะกระดูกอกความเข้มข้นของครีเอตินินและแคลเซียมในซีรั่มเลือด (การเพิ่มขึ้นของแคลเซียมบ่งชี้ถึงความก้าวหน้าของโรค) ความเข้มข้นของโปรตีน M (ในปัสสาวะเรียกว่าโปรตีน Bence-Jones) ทำหน้าที่เป็นเกณฑ์ในการประเมินความก้าวหน้าของโรคในมะเร็งไมอีโลม่า A ความเข้มข้นของพาราโปรตีนในซีรั่มและปัสสาวะจะแตกต่างกันไปในระหว่างการดำเนินของโรคภายใต้อิทธิพลของการบำบัด

ในการวินิจฉัยโรคมะเร็งไมอีโลม่าหลายชนิด จะต้องเป็นไปตามเกณฑ์ต่อไปนี้

ตัวใหญ่ๆเกณฑ์

1. พลาสมาไซโตมาตามผลการตรวจชิ้นเนื้อ
2. พลาสมาไซโตซิสในไขกระดูกแดง (มากกว่าร้อยละ 30 ของเซลล์)
3. ค่าพีคของโมโนโคลนัล (ทางพยาธิวิทยา) Ig จากการวิเคราะห์โปรตีนในซีรั่ม: มากกว่า 35 กรัม/ลิตรสำหรับค่าพีคของ IgG หรือมากกว่า 20 กรัม/ลิตรสำหรับค่าพีคของ IgA การขับโซ่ κ และ λ ออกในปริมาณ 1 กรัม/วันหรือมากกว่า ตรวจพบด้วยการวิเคราะห์ปัสสาวะด้วยอิเล็กโทรโฟรีซิสในผู้ป่วยที่ไม่มีอะไมโลโดซิส

เล็กเกณฑ์

1. พลาสมาไซโตซิสในไขกระดูกแดง 10-30% ของเซลล์
2. ค่า PIg สูงสุดในซีรั่มมีค่าน้อยกว่าปริมาณที่ระบุไว้ข้างต้น
3. โรคกระดูกพรุน
4. ความเข้มข้นของ IgM ปกติต่ำกว่า 0.5 g/L, IgA ต่ำกว่า 1 g/L หรือ IgG ต่ำกว่า 0.6 g/L

ในการวินิจฉัยมะเร็งไมอีโลม่าหลายแห่ง ต้องมีเกณฑ์หลักอย่างน้อย 1 เกณฑ์และเกณฑ์รอง 1 เกณฑ์ หรือเกณฑ์รอง 3 เกณฑ์ โดยต้องมีเกณฑ์ตามที่ระบุไว้ในข้อ 1 และ 2 บังคับ

เพื่อพิจารณาระยะของมะเร็งไมอีโลม่าจะใช้ระบบมาตรฐาน Durie-Salmon ซึ่งสะท้อนถึงปริมาตรของความเสียหายของเนื้องอก

กลุ่มไมอีโลม่าทั้งหมดจะถูกแบ่งออกเป็นกลุ่มย่อยตามสถานะของการทำงานของไต: A - ความเข้มข้นของครีเอตินินในซีรั่มต่ำกว่า 2 มก.% (176.8 ไมโครโมล/ลิตร) B - มากกว่า 2 มก.% ในโรคไมอีโลม่า ความเข้มข้นสูงของ β ₂ไมโครโกลบูลินในซีรั่มเลือด (มากกว่า 6,000 นาโนกรัม/มิลลิลิตร) บ่งบอกถึงการพยากรณ์โรคที่ไม่ดี เช่นเดียวกับกิจกรรม LDH ที่สูง (มากกว่า 300 IU/ลิตร ปฏิกิริยาเกิดขึ้นที่ 30 °C) โรคโลหิตจาง ไตวาย แคลเซียมในเลือดสูง อัลบูมินในเลือดต่ำ และปริมาตรเนื้องอกขนาดใหญ่

โรคห่วงโซ่แสง (มะเร็งไมอีโลมาเบนซ์ โจนส์) คิดเป็นประมาณ 20% ของผู้ป่วยมะเร็งไมอีโลมาเบนซ์ โจนส์ มะเร็งไมอีโลมาจะก่อตัวเป็นห่วงโซ่แสงอิสระเท่านั้น โดยตรวจพบในปัสสาวะ (โปรตีนเบนซ์ โจนส์) โดยไม่มี Ig ก่อโรคในซีรั่ม (การไล่ระดับแบบ M)

ระยะของมะเร็งไมอีโลม่า

เวที	เกณฑ์	มวลเนื้องอก (จำนวนเซลล์) x10 12 /ม2
ฉัน	มะเร็งไมอีโลม่าขนาดเล็กหากตรงตามเกณฑ์ต่อไปนี้: ความเข้มข้นของฮีโมโกลบินในเลือดสูงกว่า 100 กรัม/ลิตร ความเข้มข้นของแคลเซียมทั้งหมดในซีรั่มเลือดอยู่ในเกณฑ์ปกติ (<3 มิลลิโมลต่อลิตร) ไม่มีการเปลี่ยนแปลงของกระดูกบนเอกซเรย์หรือพลาสมาไซโตมาเดี่ยวของกระดูก ความเข้มข้นต่ำของพาราโปรตีนในซีรั่มเลือด (IgG ต่ำกว่า 50 กรัม/ลิตร, IgA ต่ำกว่า 30 กรัม/ลิตร) L-chains (โปรตีน Bence Jones) ในปัสสาวะน้อยกว่า 4 กรัม/24 ชั่วโมง	<0.6
ครั้งที่สอง	มะเร็งไมอีโลม่าระยะกลาง (เกณฑ์อยู่ระหว่างระยะที่ 1 และ 3)	0.6-1.2
ที่สาม	มะเร็งไมอีโลม่าชนิดใหญ่ที่มีข้อใดข้อหนึ่งต่อไปนี้หรือมากกว่า: ความเข้มข้นของฮีโมโกลบินในเลือดต่ำกว่า 85 กรัม/ลิตร ความเข้มข้นของแคลเซียมในซีรั่มทั้งหมดสูงกว่า 12 มก.% (3 มิลลิโมลต่อลิตร) ความเสียหายของโครงกระดูกอย่างกว้างขวางหรือกระดูกหักอย่างรุนแรง ความเข้มข้นสูงของพาราโปรตีนในซีรั่มเลือด (IgG มากกว่า 70 กรัม/ลิตร, IgA มากกว่า 50 กรัม/ลิตร) L-chains (โปรตีน Bence Jones) ในปัสสาวะมากกว่า 12 กรัม/24 ชั่วโมง	>1,2

รูปแบบทางเคมีภูมิคุ้มกันที่หายากของโรคไมอีโลม่า ได้แก่ ไมอีโลม่าแบบไม่หลั่งสาร ซึ่งตรวจพบพาราโปรตีนได้เฉพาะในไซโตพลาซึมของเซลล์ไมอีโลม่าเท่านั้น รวมถึงไมอีโลม่าไดโคลนัลและไมอีโลม่าเอ็ม

ภาวะมาโครโกลบูลินของ Waldenström เป็นมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรังที่มีต้นกำเนิดจากเซลล์บี มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคือ ลิมโฟไซต์ พลาสมาเซลล์ และเซลล์รูปแบบเปลี่ยนผ่านทั้งหมดที่สังเคราะห์ PIgM (มาโครโกลบูลิน) เนื้องอกมีความร้ายแรงในระดับต่ำ ในไขกระดูกแดง ตรวจพบการแพร่กระจายของลิมโฟไซต์เบโซฟิลิกขนาดเล็ก (ลิมโฟไซต์พลาสมาไซตอยด์) จำนวนเซลล์มาสต์เพิ่มขึ้น อิเล็กโทรโฟเรแกรมของโปรตีนในซีรั่มเลือดเผยให้เห็นการไล่ระดับ M ในโซน β- หรือ γ-โกลบูลิน โดยพาราโปรตีนมักไม่เคลื่อนที่ในสนามไฟฟ้าและยังคงอยู่ในตำแหน่งเดิม ในทางภูมิคุ้มกันเคมี PIgM คือ PIgM ที่มีห่วงโซ่เบาประเภทหนึ่ง ความเข้มข้นของ PIgM ในซีรั่มเลือดในภาวะมาโครโกลบูลินของ Waldenström อยู่ในช่วง 30 ถึง 79 กรัม/ลิตร พบโปรตีน Bence Jones ในปัสสาวะในผู้ป่วย 55-80% ความเข้มข้นของ Ig ปกติในเลือดลดลง ไตวายเกิดขึ้นได้น้อยครั้ง

มะเร็งต่อมน้ำเหลือง มะเร็งต่อมน้ำเหลืองที่หลั่ง IgM เป็นมะเร็งต่อมน้ำเหลืองที่พบได้บ่อยที่สุด รองลงมาคือมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดพาราโปรตีนเมียที่หลั่ง IgG ส่วนมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดพาราโปรตีนเมีย IgA นั้นพบได้น้อยมาก ผู้ป่วยส่วนใหญ่มักพบว่าความเข้มข้นของ Ig ปกติลดลง (โดยปกติจะพบในระดับเล็กน้อย)

โรคโซ่หนักคือมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดเซลล์บีที่สร้างชิ้นส่วนโมโนโคลนของโซ่หนัก Ig โรคโซ่หนักพบได้น้อยมาก โรคโซ่หนักมี 4 ประเภท ได้แก่ α, γ, μ, δ โรคโซ่หนัก γ มักเกิดขึ้นในผู้ชายอายุต่ำกว่า 40 ปี โดยมีลักษณะเด่นคือตับ ม้าม ต่อมน้ำเหลือง เพดานอ่อนและลิ้นบวม มีผื่นแดง และมีไข้ กระดูกมักไม่ถูกทำลาย ความเข้มข้นของโกลบูลินที่ผิดปกติในซีรั่มเลือดต่ำ และ ESR ปกติ พบเซลล์น้ำเหลืองและพลาสมาในระดับความสุกที่แตกต่างกันในไขกระดูก โรคนี้ดำเนินไปอย่างรวดเร็วและสิ้นสุดลงด้วยการเสียชีวิตภายในไม่กี่เดือน โรคโซ่หนักตรวจพบส่วนใหญ่ในผู้สูงอายุและมักมีอาการแสดงคือตับและม้ามโต เนื้อเยื่อของเนื้องอกเป็นองค์ประกอบของน้ำเหลืองที่มีความสุกแตกต่างกัน มีการอธิบายกรณีแยกกันของโรคโซ่หนัก δ โดยเกิดขึ้นเป็นไมอีโลม่า โรคอัลฟาโซ่หนักเป็นรูปแบบที่พบบ่อยที่สุด โดยส่วนใหญ่มักเกิดขึ้นในเด็กและคนอายุต่ำกว่า 30 ปี โดย 85% ของผู้ป่วยพบในแถบเมดิเตอร์เรเนียน อิมมูโนอิเล็กโทรโฟรีซิสของเลือดและซีรั่มปัสสาวะเป็นวิธีเดียวในการวินิจฉัยโรค เนื่องจากมักไม่มีการวิเคราะห์เชิง M แบบคลาสสิกบนอิเล็กโทรเฟอโรแกรมของโปรตีนในซีรั่ม

ภาวะพาราโปรตีนในเลือดสูงแบบตอบสนองจะเกิดขึ้นในกรณีที่มีแนวโน้มทางพันธุกรรมในการตอบสนองต่อการติดเชื้อแบคทีเรียและไวรัส (ตับอักเสบ การติดเชื้อ CMV) หรือการบุกรุกของปรสิต (โรคลีชมาเนีย โรคท็อกโซพลาสโมซิส โรคใบไม้ในตับ) ภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่องแบบโมโนโคลนัลรูปแบบนี้ได้รับการบันทึกในการปลูกถ่ายอวัยวะ การรักษาด้วยยาต้านเซลล์ ภูมิคุ้มกันบกพร่องทางพันธุกรรมหรือที่เกิดขึ้นภายหลัง ภาวะพาราโปรตีนในเลือดสูงชั่วคราวมีลักษณะเฉพาะคือมีความเข้มข้นของ PIg ในซีรั่มต่ำ ไม่มีหรือมีโปรตีน Bence Jones ในปัสสาวะเพียงเล็กน้อย

ภาวะพาราโปรตีนในเลือดสูงที่เกี่ยวข้องมักเกิดขึ้นพร้อมกับโรคต่างๆ มากมาย ซึ่งกลไกภูมิคุ้มกันมีบทบาทในการเกิดโรค ได้แก่ โรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง เนื้องอก การติดเชื้อเรื้อรัง โรคเหล่านี้ได้แก่ อะไมโลโดซิส AL และไครโอโกลบูลินในเลือดสูง

ภาวะพาราโปรตีนในเลือดต่ำโดยไม่ทราบสาเหตุมักเกิดขึ้นในผู้สูงอายุ และอาจบ่งบอกถึงภาวะก่อนมะเร็งเม็ดเลือดขาว ในกรณีดังกล่าว จำเป็นต้องทำการตรวจอย่างละเอียดเพื่อระบุระยะเริ่มต้นของโรคและติดตามผลในระยะยาว

อาการของพาราโปรตีนในเลือดต่ำแบบไม่ร้ายแรง ได้แก่ ไม่มีโปรตีน Bence Jones การเปลี่ยนแปลงความเข้มข้นของ Ig ปกติ จำนวนเซลล์พลาสมาในไขกระดูกที่ดูดน้อยกว่า 15% ลิมโฟไซต์น้อยกว่า 20% และความเข้มข้นของพาราโปรตีนในซีรั่มต่ำกว่า 30 กรัมต่อลิตร

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]