เซลล์ต้นกำเนิด Mesenchymal

เซลล์ต้นกำเนิดในระดับภูมิภาค (MSCs) อยู่ในสถานที่พิเศษซึ่งอนุพันธ์ของอนุพันธ์เป็นส่วนประกอบของอวัยวะทั้งหมดและเนื้อเยื่อของร่างกายมนุษย์ stromal matrix ความสำคัญในการวิจัยของ MSC เป็นตัวแทนของวิทยาศาสตร์ชีวภาพของรัสเซีย

ในช่วงกลางของศตวรรษที่ผ่านมาการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดจาก stromal stem stem cells ที่เป็นเนื้อเดียวกันได้ถูกแยกออกเป็นครั้งแรกในห้องปฏิบัติการของ A. Friedenshtein เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal แนบไปกับพื้นผิวเป็นเวลานานคงอัตราการงอกสูงและวัฒนธรรมที่มีความหนาแน่นต่ำเพาะหลังจากการตรึงบนพื้นผิวที่เกิดขึ้นของโคลนเซลล์ fibroblast ไม่มีกิจกรรม phagocytic การหยุดยั้งการงอกของ MSC ได้รับการยุติโดยความแตกต่างของหลอดทดลองในกระดูกไขมันกระดูกอ่อนกล้ามเนื้อหรือเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน การศึกษาเพิ่มเติมพบศักยภาพของเซลล์กระดูก fibroblast เหมือนเซลล์ไขกระดูก stromal ของสายพันธุ์ที่แตกต่างกันของการเลี้ยงลูกด้วยนมเช่นเดียวกับกิจกรรมอาณานิคมขึ้นรูป ในการทดลองในร่างกายมันก็แสดงให้เห็นว่าทั้งการปลูก hetero- และ orthotopic เซลล์ fibroblast ขึ้นรูปอาณานิคมจะเสร็จสิ้นการสร้างกระดูกอ่อนและเนื้อเยื่อไขมันเส้นใย เนื่องจากเซลล์ stromal ต้นกำเนิดของไขกระดูกโดดเด่นด้วยความจุสูงสำหรับตัวเองการต่ออายุและความแตกต่างของความแตกต่างภายในเซลล์เดียวที่พวกเขาจะเรียกว่าเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal หลายด้าน

ควรสังเกตว่าสำหรับ 45 ปีของการวิจัยพื้นฐานของเซลล์ต้นกำเนิดจากต้นกำเนิดสภาพจริงได้ถูกสร้างขึ้นสำหรับการใช้อนุพันธ์ของพวกเขาในการปฏิบัติทางคลินิก

วันนี้ไม่ต้องสงสัยเลยว่าเนื้อเยื่อทั้งหมดของร่างกายมนุษย์เกิดขึ้นจากเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์ที่แตกต่างกันอันเป็นผลมาจากกระบวนการแพร่ขยายการย้ายถิ่นความแตกต่างและการเจริญเติบโต อย่างไรก็ตามเมื่อเร็ว ๆ นี้มีความเชื่อกันว่าเซลล์ต้นกำเนิดในร่างกายผู้ใหญ่มีเฉพาะเนื้อเยื่อนั่นคือสามารถผลิตสายเฉพาะเฉพาะในเนื้อเยื่อที่พวกมันตั้งอยู่ สถานการณ์ความคิดนี้ถูกปฏิเสธโดยข้อเท็จจริงของการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดไม่เพียง แต่เป็นองค์ประกอบของเซลล์ของเลือดที่อยู่รอบข้าง แต่ยังเป็นเซลล์ตับไข่ นอกจากนี้และเซลล์ต้นกำเนิดประสาทยังสามารถก่อให้เกิดเซลล์ประสาทและองค์ประกอบ glial เช่นเดียวกับสายมุ่งมั่นของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด ในทางกลับกันเซลล์ต้นกำเนิดจากต้นกำเนิดซึ่งมักจะผลิตองค์ประกอบของกระดูกกระดูกอ่อนและเนื้อเยื่อไขมันสามารถเปลี่ยนเป็นเซลล์ต้นกำเนิดจากระบบประสาทได้ สันนิษฐานว่าในกระบวนการเจริญเติบโตการฟื้นฟูเนื้อเยื่อและซ่อมแซมเนื้อเยื่อเซลล์ต้นกำเนิดที่ถูกคุมขังเกิดจากเนื้อเยื่อเฉพาะต้นกำเนิดสำรอง ตัวอย่างเช่นการซ่อมแซมเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อสามารถรับรู้ได้ด้วยวิธีการของเซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อชั้นต้นที่ย้ายจากไขกระดูกไปสู่กล้ามเนื้อโครงร่าง

แม้ว่าเซลล์ต้นกำเนิดข้าม interchangeability ดังกล่าวรับรู้ไม่ได้นักวิจัยทุกความเป็นไปได้ในการใช้ทางคลินิกของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal เป็นแหล่งข้อมูลสำหรับการปลูกถ่ายเซลล์และเวกเตอร์เซลล์ของข้อมูลทางพันธุกรรมที่ยังไม่ได้โต้แย้งเป็นเซลล์ต้นกำเนิดหลายด้าน stromal ไขกระดูกซึ่งจะมีความสะดวกในการแยกและการเผยแพร่ ในวัฒนธรรมในหลอดทดลอง ในขณะเดียวกันในวรรณกรรมทางวิทยาศาสตร์ยังคงปรากฏรายงานเกี่ยวกับศักยภาพของเซลล์ต้นกำเนิด pluripotent ของ stroma ไขกระดูก เป็นหลักฐานที่นำเสนอโปรโตคอลการวิจัยซึ่งภายใต้อิทธิพลของปฏิกิริยาที่เฉพาะเจาะจงของ transdifferentiation ของ MSCs แปลงค่าเป็นเซลล์ประสาทและเซลล์ตับ cardiomyocytes อย่างไรก็ตามนักวิทยาศาสตร์บางคนมีโอกาสที่จะเปิดใช้งานใหม่และการแสดงออกของยีนในช่วง embryogenesis ในช่วงต้นข้อสงสัยร้ายแรง ในเวลาเดียวกันทุกคนเข้าใจว่าถ้าเข้าเงื่อนไขจะพบว่าขยายหลายด้านเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal เพื่อ pluripotency ของ ESCs ในการปฏิรูปการแพทย์และพลาสติกการแก้ไขปัญหาหลายด้านจริยธรรมคุณธรรมทางศาสนาและทางกฎหมายธรรมชาติโดยอัตโนมัติ นอกจากนี้เนื่องจากในกรณีนี้แหล่งที่มาของต้นกำเนิดความจุปฏิรูปของผู้ป่วยเป็นเซลล์ stromal autologous จะแก้ไขปัญหาของการปฏิเสธภูมิคุ้มกันของการปลูกถ่ายเซลล์ โอกาสที่แท้จริงเหล่านี้คืออนาคตอันใกล้นี้จะแสดงขึ้น

[1], [2]

การใช้เซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อชั้นในเป็นยา

การใช้งานที่คลินิกของสัญญาซื้อขายล่วงหน้าของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ความสัมพันธ์เกี่ยวเนื่องกับการลดข้อบกพร่องของเนื้อเยื่อที่เกิดจากแผลความร้อนที่กว้างขวางและลึกของผิว การประเมินผลการทดลองทางคลินิกความเหมาะสมของ fibroblast เหมือนเซลล์ต้นกำเนิด allogenic mesenchymal สำหรับรักษาแผลไฟไหม้ลึกได้ดำเนินการ มันแสดงให้เห็นว่าลาสท์เหมือนเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูก mesenchymal รูปแบบ monolayer ในวัฒนธรรมซึ่งจะทำให้มันเป็นไปได้ที่จะปลูกพวกเขาเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการงอกของแผลเผาไหม้ลึก ผู้เขียนทราบว่ามีคุณสมบัติใกล้เคียงกันรบราตัวอ่อน แต่ประยุกต์ใช้ทางคลินิกของหลังมี จำกัด ปัญหาจริยธรรมและกฎหมายที่มีอยู่ การเผาไหม้ความร้อนลึกกับกปภ. ยืนยัน-โดยทุกชั้นของผิวแบบจำลองในหนูขาว พื้นที่การเผาไหม้เป็น 18-20% ของผิวทั้งหมด ในกลุ่มทดลองแรกประกอบด้วยของหนูที่มีการบาดเจ็บความร้อนลึกและการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal fibroblast มา allogeneic กลุ่มที่สองประกอบด้วยสัตว์ที่มีการเผาไหม้ความร้อนลึกและทรานส์ปลูกเซลล์ตัวอ่อน allogeneic กลุ่มที่สามของหนูควบคุมให้มีการบาดเจ็บความร้อนลึกซึ่งไม่ได้ดำเนินการรักษาด้วยเซลล์ ระงับของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ลาสท์ที่ได้มาจากตัวอ่อนและเซลล์ที่ถูกนำไปใช้กับการเผาไหม้แผลผิวปิเปตในจำนวน 2 × 10 ⁴เซลล์ในวันที่ 2 หลังจากที่ตัดออกจากการสร้างแบบจำลองการเผาไหม้และ eschar ฉีกรูปแบบ หลังจากการปลูกถ่ายเซลล์เผาพื้นผิวปกคลุมด้วยผ้ากอซแช่ในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ isotonic กับ gentamicin รั้วเซลล์ไขกระดูกที่จะได้รับ MSCs กับการเหนี่ยวนำที่ตามมาของสาย fibroblast ในเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ผลิตในหนูวิสตาร์จากผู้ใหญ่ femurs รบราปอดของทารกในครรภ์ได้รับตัวอ่อน 14-17 วัน รบราตัวอ่อนและเซลล์ไขกระดูกเพื่อให้ได้ก่อน MSCs มาเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสใน iikubatore C02 ในบรรยากาศที่ 5% CO2 ที่ความชื้น 95% รบราตัวอ่อนมีเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 4-6 วันในขณะที่สำหรับการก่อ monolayer MSC ต้อง 14-17 วัน MSCs ภายหลังการเก็บรักษาโดยการเก็บรักษาเป็นวัสดุเริ่มต้นสำหรับเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ลาสท์ที่ได้มาซึ่งได้รับการจัดทำขึ้นโดยการละลายและ MSCs เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 4 วัน จำนวนของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal fibroblast สร้างเป็นมากกว่า 3 เท่าของจำนวนเซลล์ตัวอ่อนที่เกิดขึ้นในช่วงระยะเวลาการเลี้ยงเดียวกัน เพื่อแจ้งเซลล์ใน transtslantirovannyh เผาไหม้แผลในขั้นตอนการเพาะเลี้ยงจีโนมของพวกเขาที่มีป้ายกำกับโดยใช้เวกเตอร์รถรับส่งไวรัสอยู่บนพื้นฐานของ recombinant adenovirus V ชนิดให้บริการ 1AS-2 ยีน SS-galactosidase E. Coli Living เซลล์ในหลาย ๆ ครั้งหลังการปลูก immunohistochemically ตรวจพบใน cryosections ที่มีการเพิ่มสารตั้งต้น X-Gal ให้สีฟ้าสีเขียวลักษณะ อันเป็นผลมาจากแบบไดนามิกภาพ planimetric การและเงื่อนไขการประเมินผลการตรวจชิ้นเนื้อจากบาดแผลไหม้ก็พบว่าแม้ในวันที่ 3 หลังการปลูกของเซลล์ในกลุ่มที่แยกปรากฏความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในระหว่างขั้นตอนการรักษาบาดแผล อย่างชัดเจนมากที่สุดความแตกต่างนี้คือ 7 วันหลังจากปลูกถ่ายเซลล์ สัตว์ในกลุ่มแรกซึ่งได้รับการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal fibroblast เหมือนแผลที่ได้มาเป็นสีดอกกุหลาบสีเข้มสม่ำเสมอเนื้อเยื่อขยายตัวไปทั่วพื้นที่ทั้งในระดับของหนังกำพร้าและการเผาไหม้ผิวจะลดลงอย่างมากในขนาด หลายรูปแบบภาพยนตร์คอลลาเจนทินเนอร์ไปยังพื้นผิวแผล แต่เธอก็ยังคงครอบคลุมพื้นที่ทั้งหมดของการเผาไหม้ สัตว์ของกลุ่มที่สองซึ่งได้รับการปลูกถ่ายเซลล์จากตัวอ่อนเนื้อเยื่อจะถูกยกขึ้นไปถึงระดับของหนังกำพร้าขอบแผล แต่ในบางสถานที่ที่ plazmoreya เวลาเดียวกันจากบาดแผลที่รุนแรงมากขึ้นกว่าในกลุ่มที่ 1 และภาพยนตร์คอลลาเจนขึ้นครั้งแรกหายไปจริง ในสัตว์ที่ไม่ได้รับการรักษาด้วยเซลล์ต้นกำเนิดใน 7 วันแผลไฟลวกเป็นซีดหลุมเนื้อเยื่อฉีกเคลือบด้วยไฟบริน Plazmoreya โด่งดังไปทั่วพื้นผิวการเผาไหม้ การตรวจชิ้นเนื้อสัตว์ที่ 1 และครั้งที่ 2 กลุ่มที่พบว่าลดลงของการแทรกซึมโทรศัพท์มือถือและการพัฒนาของเส้นเลือดที่เป็นสัญญาณเหล่านี้ของกระบวนการฟื้นฟูแรกเริ่มได้รับความรุนแรงมากขึ้นในหนูในกลุ่มที่ 1 ในกลุ่มควบคุมมีสัญญาณของเซลล์แผลแทรกซึมรูปแบบ histologic ของที่จัดตั้งขึ้นใหม่เส้นเลือดขาด วันที่ 15-30 ของการสังเกตสัตว์ของกลุ่มเผาไหม้พื้นที่ผิวที่ 1 อย่างมีนัยสำคัญมีขนาดเล็กกว่าในหนูกลุ่มอื่น ๆ และพื้นผิว granulating ได้รับการพัฒนามากขึ้น ในสัตว์กลุ่มที่ 2 พื้นที่ผิวการเผาไหม้ยังลดลงเมื่อเทียบกับขนาดของแผลการเผาไหม้ในกลุ่มควบคุมของหนูว่าเป็นเพราะ epithelialization เพิ่มขอบ ในการควบคุมการเผาไหม้กลุ่มเว็บไซต์ที่พื้นผิวยังคง granulations อ่อนหายากปรากฏสิ่งปลูกหลอดเลือดดำแมงมุมเกาะเล็กเกาะน้อยเป็นโล่ประกาศเกียรติคุณ fibrinous ยังคง plazmoreya ปานกลางทั่วพื้นผิวการเผาไหม้บางสิ่งบางอย่างซึ่งเป็นเรื่องยากตกสะเก็ดถอดออกยังคงอยู่ โดยทั่วไปสัตว์กลุ่มที่ 3 ยังช่วยลดขนาดของแผล แต่แผลยังคงขอบ podrytymi

ดังนั้นในระหว่างการศึกษาเปรียบเทียบอัตราการรักษาแผลโดยใช้เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal fibroblast มาและเซลล์ของทารกในครรภ์และโดยไม่ต้องใช้การรักษาด้วยเซลล์ที่มีเครื่องหมายการเร่งความเร็วของการรักษาพื้นผิวการเผาไหม้เป็นผลมาจากการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal fibroblast มาและเซลล์ตัวอ่อน อย่างไรก็ตามในกรณีของการใช้เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal allogeneic ของ fibroblast แผลอัตราการรักษาสูงกว่าการปลูกเซลล์ตัวอ่อน นี้ก็เป็นที่ประจักษ์ในการเร่งการเปลี่ยนแปลงขั้นตอนการฟื้นฟูของกระบวนการ - เพื่อลดระยะเวลาการแทรกซึมของเซลล์เพิ่มอัตราการขยายตัวของเครือข่ายหลอดเลือดเช่นเดียวกับการก่อตัวของเนื้อเยื่อ

ผลของการวางแผนแบบไดนามิกระบุว่าอัตราการรักษาโดยธรรมชาติของแผลไหม้ (โดยไม่ต้องใช้การบำบัดด้วยเซลล์) ต่ำสุด เมื่อวันที่ 15 และวันที่ 30 หลังการปลูกของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal allogeneic ของ fibroblast แผลอัตราการรักษาสูงกว่าการปลูกเซลล์ตัวอ่อน วิธีฮีสโตเคมีสำหรับการตรวจสอบของเบต้า galactosidase แสดงให้เห็นว่าหลังจากปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal fibroblast เหมือนและเซลล์ตัวอ่อนตลอดระยะเวลาทั้งหมดของการสังเกตบนพื้นผิวและลึก regenerating บาดแผลเซลล์ปลูกยังคงทำงานได้ ผู้เขียนขอแนะนำว่าอัตราที่สูงขึ้นจากบาดแผลของการเผาไหม้การฟื้นฟูโดยใช้เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ของ fibroblast ปรับอากาศปล่อยจากเซลล์เหล่านี้ในระหว่างการเจริญเติบโต rostostimuliruyushih ปัจจัยออกฤทธิ์ทางชีวภาพ

การปลูกของ autologous หรือ keratinocytes allogenic และรบรา allogeneic สำหรับการรักษาแผลการเผาไหม้และใช้ในคลินิก มันควรจะตั้งข้อสังเกตว่าการผ่าตัดรักษาเด็กที่มีการเผาไหม้ลึกที่กว้างขวางเป็นงานที่ซับซ้อนเนื่องจากการหลายหลากสูงของการบาดเจ็บและการผ่าตัดแทรกแซงการสูญเสียเลือดอย่างมีนัยสำคัญในการเกิดปฏิกิริยาที่แตกต่างกันที่ใช้สื่อแช่ ปัญหาหลักในการดำเนินงานของผิวหนังและศัลยกรรมพลาสติกที่มีการเผาไหม้ลึกอย่างกว้างขวางในพื้นที่เกินกว่า 40% ของพื้นผิวของร่างกายเนื่องจากความรุนแรงของสภาพของเธอและการขาดทรัพยากรของผิวผู้บริจาค การใช้งานของตัดตาข่ายมีอัตราส่วนการเจาะขนาดใหญ่ไม่ได้แก้ปัญหาตั้งแต่ภาพหลังจากทะลุเซลล์ epiteliziruyutsya ช้ามากและมักจะไม่ตัดผิว lysed หรือแห้ง เคลือบเช่นการเผาไหม้แผลเป็น ksenokozha, allografts cadaveric เคลือบฟิล์มสังเคราะห์ที่ไม่เคยมีประสิทธิภาพเพียงพอจึงพัฒนาวิธีการใหม่สำหรับการปิดชั้นพื้นผิวการเผาไหม้ของ keratinocytes เพาะเลี้ยงและรบรา โดยเฉพาะอย่างยิ่งวิธีการปิดพื้นผิวการเผาไหม้โดยใช้ allofibroblastov เพาะเลี้ยงให้ในระหว่างการปลูกเด่นชัดผลกระตุ้นใน epidermotsitov งอกที่เก็บรักษาไว้ในชายแดนแผลที่เผาไหม้และใน keratinocyte grafts ใยตาข่าย ใน Budkevich ลิตร, et al (2000) แสดงให้เห็นถึงผลของการใช้วิธีการนี้สำหรับรักษาแผลไฟไหม้ในเด็ก การศึกษารวม 31 เด็กที่มีอาการบาดเจ็บความร้อนที่อายุตั้งแต่ 1 ปีถึง 14 ปีที่ผ่านมา ที่เด็กทั้งสามคนรวมพื้นที่การเผาไหม้แผล IIIA-B - ปริญญา IV เป็น 40%, 25 - 50-70% แม้ที่สาม - 71-85% ของพื้นผิวร่างกาย necrectomy การผ่าตัดในช่วงต้นรวมกับการปลูกเลี้ยงและ allofibroblastov autodermaplasty ในการรักษาขั้นแรกได้ดำเนินการตัดเนื้อเยื่อฉีกที่สอง - ในการปลูกฟิล์มให้บริการ allofibroblastov เพาะเลี้ยงที่สาม (48 ชั่วโมงหลังจากการปลูก allofibroblastov เพาะเลี้ยง) - การกำจัดของเมทริกซ์และผิวหนังอวัยวะเพศหญิงมีอัตราการเจาะ autodermoplasty 1: 4 สามผู้ป่วยที่เข้ารับการรักษาในโรงพยาบาลที่มีโรคการเผาไหม้อย่างรุนแรง allofibroblasty เพาะเลี้ยงปลูกบนบาดแผล granulating การปลูกเลี้ยง allofibroblastov ดำเนินการครั้งใน 18 เด็กสอง - ที่ 11, สาม - สองผู้ป่วย พื้นที่ของพื้นผิวแผลการเพาะเลี้ยงเซลล์ closable ตั้งแต่ 30-3,500 cm2 ประสิทธิภาพของการเพาะเลี้ยง allofibroblastov การประเมินโดยรวมของร้อยละ engraftment ของอวัยวะเพศหญิงผิวเวลาของการรักษาจากการเผาไหม้และจำนวนผู้เสียชีวิตได้รับบาดเจ็บความร้อนรุนแรง engraftment เสร็จสมบูรณ์ใน 86% ของผู้ป่วย บางส่วนอวัยวะเพศหญิงผิว neprizhivlenie ที่ระบุไว้ใน 14% ของกรณี แม้จะมีการรักษาหก (19.3%) เด็กเสียชีวิต พื้นที่ทั้งหมดของโรคผิวหนังได้อยู่ในช่วง 40-70% ของพื้นผิวร่างกาย การปลูกของ allofibroblastov เพาะเลี้ยงมีความสัมพันธ์กับการตายของเผาบาดเจ็บผู้ป่วยเดียวไม่มี

การวิเคราะห์ผลของการรักษาผู้เขียนทราบว่าการเผาไหม้ก่อนหน้านี้ไม่เข้ากับชีวิตในการรักษาความเสียหายความร้อนลึกของพื้นที่ผิวของ 35-40% ของพื้นผิวร่างกาย (สำหรับเด็กเล็ก - 3 ปีขึ้นไป - มีการเผาไหม้ลึกที่สำคัญที่มีพื้นที่ 30% สำหรับเด็กที่มีอายุมากกว่า กลุ่มอายุ - มากกว่า 40% ของพื้นผิวร่างกาย) เมื่อปลูกผ่าตัดเลี้ยง autodermaplasty necrectomy allofibroblastov และผิวหนังตามมา grafts กับการเผาไหม้ขนาดใหญ่ปัจจัยทะลุ IIIB - ปริญญา IV ยังคงสำคัญ แต่ในขณะที่มีโอกาสในหลาย ๆ กรณีที่จะช่วยชีวิตของผู้ที่ตกเป็นเหยื่อดังกล่าวได้ necrectomy ผ่าตัดร่วมกับการปลูกเลี้ยงและ allofibroblastov autodermaplasty ในเด็กที่มีการเผาไหม้ลึกได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพโดยเฉพาะอย่างยิ่งในผู้ป่วยที่มีรอยโรคขั้นสูงของผิวด้วยการขาดดุลของเว็บไซต์ผู้บริจาค ชั้นเชิงการผ่าตัดใช้งานอยู่และปลูก allofibroblastov เลี้ยงส่งเสริมเสถียรภาพอย่างรวดเร็วของสภาพทั่วไปของผู้ป่วยเช่นการลดลงของจำนวนของภาวะแทรกซ้อนติดเชื้อของโรคการเผาไหม้, การสร้างเงื่อนไขที่ดีสำหรับ engraftment ลดเวลาในการฟื้นฟูผิวที่สูญเสียและระยะเวลาของการรักษาในโรงพยาบาลลดอุบัติการณ์ของการเสียชีวิตในผู้ป่วยที่มีการเผาไหม้ที่กว้างขวาง ดังนั้นการปลูก allofibroblastov เพาะเลี้ยงตามอวัยวะเพศหญิงผิว autodermaplasty ประสบความสำเร็จในการกู้คืนในเด็กที่มีแผลไหม้อย่างรุนแรงซึ่งได้รับการพิจารณาก่อนหน้านี้อีกต่อไป

เป็นที่ทราบกันดีว่าวัตถุประสงค์หลักของการรักษาโรคไหม้คือการฟื้นตัวอย่างเต็มที่และรวดเร็วของผิวที่ถูกทำลายเพื่อป้องกันผลกระทบที่เป็นพิษภาวะแทรกซ้อนและการคายน้ำของร่างกาย ผลของการใช้เซลล์เพาะเลี้ยงส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับความพร้อมในการปลูกถ่ายแผลไหม้เอง ในกรณีที่มีการปลูกถ่าย keratinocytes ที่เพาะเลี้ยง 55% (ตามพื้นที่) ของเซลล์ที่ปลูกถ่ายจะอยู่รอดได้บนพื้นผิวแผลหลังจากผ่าตัดผ่าตัดในขณะที่บาดแผล engrafting ความถี่ engraftment จะลดลงถึง 15% ดังนั้นการรักษาแผลที่ผิวหนังอย่างละเอียดถี่ถ้วนจึงต้องใช้กลยุทธ์การผ่าตัดที่ใช้งานอยู่ในตอนแรก เมื่อมีบาดแผลการเผาไหม้ IIIB-IV องศาพื้นผิวที่ถูกเผาไหม้จะถูกปล่อยออกจากเนื้อเยื่อเนื้อตายเพื่อลดผลกระทบจากมึนเมาและลดจำนวนของภาวะแทรกซ้อนของโรคไหม้ การใช้ยุทธวิธีดังกล่าวเป็นกุญแจสำคัญในการลดระยะเวลาตั้งแต่การเผาผลาญไปจนถึงการปิดแผลและระยะเวลาในการพักของผู้ป่วยที่มีแผลไหม้อย่างกว้างขวางในโรงพยาบาลและลดจำนวนผู้เสียชีวิตลงอย่างมาก

รายงานฉบับแรกเกี่ยวกับการใช้ Keratinocytes ที่ได้รับการเพาะเลี้ยงเพื่อให้ครอบคลุมพื้นผิวการเผาไหม้ครั้งแรกปรากฏขึ้นในช่วงต้นทศวรรษที่แปดสิบของศตวรรษที่ผ่านมา ต่อมาการจัดการนี้ถูกหามออกด้วยความช่วยเหลือของชั้นของ keratinocytes ที่ได้รับการเพาะเลี้ยงซึ่งส่วนใหญ่มักมาจากโครงสร้างแบบออร์โธสตรรกศาสตร์ซึ่งน้อยกว่ามากจาก allokeratinocytes อย่างไรก็ตามเทคโนโลยีของ autokeratinocytoplasty ไม่อนุญาตให้มีการสร้างธนาคารพาณิชย์ในขณะที่เวลาที่จำเป็นในการผลิตการปลูกถ่ายที่เพียงพอจาก keratinocytes มีขนาดใหญ่และมีจำนวนถึง 3-4 สัปดาห์ ในช่วงนี้ความเสี่ยงต่อการเกิดโรคติดเชื้อและโรคแทรกซ้อนอื่น ๆ จะเพิ่มขึ้นอย่างมากซึ่งจะช่วยยืดระยะเวลาในการพักตัวของผู้ป่วยในโรงพยาบาลได้อย่างมาก นอกจากนี้ autokeratinocytes ยังไม่สามารถอยู่รอดได้ในระหว่างการปลูกถ่ายเป็นแผลไหม้ที่เป็นเม็ดและค่าใช้จ่ายสูงของสื่อการเจริญเติบโตพิเศษและสารกระตุ้นการเจริญเติบโตของ keratinocyte ที่ใช้งานทางชีวภาพอย่างมีนัยสำคัญจะ จำกัด การใช้งานทางคลินิกของพวกเขา วิธีการทางเทคโนโลยีชีวภาพอื่น ๆ เช่นการสร้างคอลลาเจนการปลูกถ่ายเยื่อหุ้มเซลล์ที่ผ่านการแช่เย็นและการใช้สารเคลือบโพลีโพรพิลีนต่างๆช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการรักษาผิวบริเวณกว้าง แต่ไม่เกิดแผลไหม้ลึก วิธีการเคลือบพื้นผิวบาดแผลด้วยเซลล์ไฟโบลแลนที่เพาะเลี้ยงมีความแตกต่างกันโดยพื้นฐานว่าส่วนประกอบหลักของสระเซลล์เพาะเลี้ยงไม่ได้เป็น keratinocytes แต่เป็นไฟโบรบลาสต์

จำเป็นสำหรับการพัฒนาวิธีการทำหน้าที่เป็นหลักฐานที่แสดงว่า pericytes ที่ล้อมรอบเรือขนาดเล็กที่มีเซลล์ genitornymi mesenchymal โปรสามารถที่จะเปลี่ยนเป็นเซลล์ที่ผลิตปัจจัยการเจริญเติบโตจำนวนมากและให้การรักษาบาดแผลเนื่องจากผลกระตุ้นที่แข็งแกร่งในการขยายและการยึดเกาะของ keratinocytes การใช้ fibroblasts ที่เพาะเลี้ยงเพื่อปิดแผลพื้นผิวพบว่าข้อดีที่สำคัญของวิธีนี้เมื่อเปรียบเทียบกับการใช้ keratinocytes ที่เพาะเลี้ยง โดยเฉพาะอย่างยิ่งการเตรียมการของเซลล์ในวัฒนธรรมไม่จำเป็นต้องใช้ของวัฒนธรรมพิเศษสื่อและการเจริญเติบโตก่อการซึ่งจะช่วยลดค่าใช้จ่ายของการปลูกมากกว่า 10 ครั้งค่าใช้จ่ายของการได้รับ keratinocytes รบราอาจมีได้อย่างง่ายดายเพื่อ passaging ระหว่างที่พวกเขาสูญเสียบางส่วนแอนติเจนพื้นผิว histocompatibility ของพวกเขาซึ่งจะทำให้มันเป็นไปได้ที่จะใช้สำหรับการผลิตของการปลูก allogeneic ของเซลล์และสร้างธนาคารของพวกเขา ลดระยะเวลาในการปลูกที่ได้รับพร้อมสำหรับการใช้งานในคลินิกจาก 3 สัปดาห์ที่ผ่านมา (keratinocytes) 1-2 วัน (สำหรับรบรา) วัฒนธรรมหลักของรบราส์สามารถหาได้โดยการเพาะเลี้ยงเซลล์จากเศษผิวหนังที่ถ่ายที่ autodermoplasty และการเพาะเซลล์ความหนาแน่นในวัฒนธรรมใบเสร็จรับเงินของเซลล์มนุษย์เป็นเพียง 20 × 10 ³ต่อ 1 ซม. 2

เพื่อศึกษาผลของเซลล์และโปรตีนการกำกับดูแลของพวกเขาในการขยายและความแตกต่างของ keratinocytes, การวิเคราะห์เปรียบเทียบลักษณะและสัณฐานวิทยาของการแพร่กระจาย keratinocyte กับพื้นผิวของคอลลาเจนประเภท I และ III และ fibronectin ร่วมวัฒนธรรมกับเซลล์ของมนุษย์ keratinocytes ของมนุษย์ถูกแยกออกจากชิ้นส่วนของผิวหนังของผู้ป่วยที่มีแผลไหม้ในระหว่างการผ่าตัด autodermoplasty ความหนาแน่นของ keratinocytes เท่ากับ 50 x 103 เซลล์ต่อ cm2 ประสิทธิภาพของการปลูกถ่ายยีนที่ได้จากการเพาะเลี้ยงในผู้ป่วย 517 ราย ผู้ป่วยทั้งหมดได้รับการแบ่งออกเป็น 2 กลุ่มคือกลุ่มที่ 1 - ผู้ใหญ่ที่มีอาการไหม้ IIA, B - IV degree; 2nd - เด็กที่มีแผลไฟลุกลาม IIIB - IV degree การประเมินผลของการเปลี่ยนแปลงขององค์กรโครงสร้างและการทำงานของวัฒนธรรม monolayer ของเซลล์ในเรื่องเกี่ยวกับบทบาทในกระบวนการงอกของ glycosaminoglycans, fibronectin คอลลาเจนที่มีและได้รับอนุญาตเขียนเพื่อตรวจสอบในวันที่สามเป็นเงื่อนไขที่ดีที่สุดของการใช้วัฒนธรรม fibroblast สำหรับการผลิตปลูก การสอบสวนของผลกระทบต่อการขยาย fibroblast และความแตกต่างของ keratinocytes แสดงให้เห็นว่าภายใต้ในหลอดทดลองรบรามีผลกระตุ้นการออกเสียงหลักในกระบวนการ keratinocyte การยึดเกาะที่การเพิ่มจำนวนของเซลล์สานุศิษย์และอัตราการแก้ไขมากกว่า 2 ครั้งที่ การกระตุ้นกระบวนการยึดเกาะนั้นมาพร้อมกับการเพิ่มความเข้มของการสังเคราะห์ดีเอ็นเอและระดับการขยายตัวของ keratinocytes นอกจากนี้ยังพบว่าการปรากฏตัวของเซลล์และ extracellular เมทริกซ์ที่เกิดขึ้นจากพวกเขาเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการสร้างการเชื่อมต่อระหว่างเซลล์ tonofibrillyarnogo อุปกรณ์ keratinocyte และท้ายที่สุดสำหรับความแตกต่าง keratinocyte และชั้นใต้ดินก่อตัวเมมเบรน ในการรักษาเด็กที่มีการเผาไหม้ลึกที่จัดตั้งขึ้นประสิทธิภาพทางคลินิกของวัฒนธรรมการปลูก allofibroblastov โดยเฉพาะอย่างยิ่งในผู้ป่วยที่มีแผลที่กว้างขวางของเว็บไซต์ที่ผิวของผู้บริจาคในการขาดดุล การศึกษา morfofunktcionalnoe คอมเพล็กซ์แสดงให้เห็นว่าการปลูกถ่ายอวัยวะลักษณะรบราการสังเคราะห์ดีเอ็นเอที่ใช้งานเช่นเดียวกับคอลลาเจนและ fibronectin glycosaminoglycans ซึ่งจะเกิดขึ้นในเซลล์ของเมทริกซ์นอกเซล ผู้เขียนขอแนะนำเปอร์เซ็นต์สูงของ engraftment ของเซลล์ที่ปลูกถ่าย (96%) ลดความคมชัดในแง่ของการเตรียมความพร้อมของพวกเขา (ภายใน 2-3 ชั่วโมงแทน 24-48 สัปดาห์ที่ผ่านมาในกรณีของ keratinocytes), การเร่งที่สำคัญของ epithelialization เพิ่มของพื้นผิวการเผาไหม้และการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในราคา (10 ครั้ง) ของเทคโนโลยีการปลูกถ่ายอวัยวะจาก fibroblasts เมื่อเปรียบเทียบกับการปลูกถ่าย keratinocyte การใช้งานของการปลูกเลี้ยง allofibroblastov ทำให้มันเป็นไปเพื่อช่วยชีวิตของเด็กที่มีการเผาไหม้ที่สำคัญ - การบาดเจ็บความร้อนมากกว่า 50% ของพื้นผิวร่างกายซึ่ง แต่ก่อนเคยคิดกันไม่ได้กับชีวิต เป็นที่น่าสังเกตว่าการปลูก allogeneic ของเซลล์ตัวอ่อนยังเชื่อพิสูจน์แล้วว่าไม่เพียง แต่การฟื้นฟูอย่างรวดเร็วมากขึ้นจากบาดแผลและผู้ป่วยพักฟื้นที่มีการเผาไหม้ในระดับต่าง ๆ และพื้นที่ แต่ยังลดลงอย่างมากของการตาย

รบรา autologous ถูกนำมาใช้ในการผ่าตัดที่ซับซ้อนและพลาสติกเป็นความเสียหายการแก้ไขเปลี่ยนคอร์ดเสียง มักจะใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในคอลลาเจนนี้ในช่วงระยะเวลาของการดำเนินการที่ถูก จำกัด ด้วยภูมิคุ้มกันของมัน เป็นโปรตีนต่างประเทศ, คอลลาเจน, คอลลามีความไวต่อผู้รับและสามารถทำให้เกิดปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันเพื่อลดความเสี่ยงที่เทคโนโลยีของการเตรียมคอลลาเจนได้รับการพัฒนาเชื่อมโยงกับ glutaraldehyde ข้อได้เปรียบของพวกเขาคือความมั่นคงมากขึ้นและภูมิคุ้มกันลดลงซึ่งพบว่ามีการใช้งานจริงในการกำจัดของข้อบกพร่องและฝ่อสายเสียง การฉีดคอลลาเจน autologous ถูกนำมาใช้ครั้งแรกในปี 1995 วิธีการจัดให้มีการอนุรักษ์ของโครงสร้างหลักของเส้นใยคอลลาเจน autologous รวมทั้ง crosslinks intramolecular เร่งปฏิกิริยาเอนไซม์ ความจริงที่ว่าเส้นใยคอลลาเจนธรรมชาติทนต่อการย่อยสลายโดยโปรตีเอสกว่าสร้างคอลลาเจนนั้น telopeptides ตัด Integrity telopeptides สำคัญสำหรับโครงสร้างสี่ของเส้นใยคอลลาเจนและการเชื่อมขวางระหว่างโมเลกุลคอลลาเจนที่อยู่ติดกัน ซึ่งแตกต่างจากการเตรียมการของคอลลาเจนคอลลาเจน autologous ไม่ก่อให้เกิดการตอบสนองภูมิคุ้มกันในผู้รับ แต่มันไม่ได้มีประสิทธิภาพเพียงพอเป็นตัวแทนเติม การแก้ไขแบบถาวรสามารถทำได้เนื่องจากการผลิตในท้องถิ่นของการปลูก autologous คอลลาเจนโดยรบรา อย่างไรก็ตามการตรวจสอบประสิทธิภาพของการปลูกถ่ายเซลล์ autologous ในคลินิกพบปัญหาบางอย่าง ในช่วงแรกหลังจากที่มีผลทางคลินิกปลูก fibroblast อ่อนค่าลงเมื่อเทียบกับว่าหลังจากที่การบริหารงานของคอลลาเจน เมื่อรบรา autologous เลี้ยงไม่สามารถแยกความเป็นไปได้ของการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ปกติผิดปกติ myofibroblasts ที่เรียกว่ามีความรับผิดชอบสำหรับการพัฒนาของโรคปอดและรอยแผลเป็นเป็นหลักฐานโดยการลดลงในเจลคอลลาเจนเนื่องจากการมีปฏิสัมพันธ์ที่เฉพาะเจาะจงของเซลล์และซ่านคอลลาเจน นอกจากนี้หลังจากที่ passaging อนุกรมเซลล์ในหลอดทดลองสูญเสียความสามารถในการสังเคราะห์โปรตีน extracellular เมทริกซ์

อย่างไรก็ตามเทคนิคการทดลองขณะที่สมบูรณ์แบบการเพาะปลูกของเซลล์ autologous มนุษย์ซึ่งจะช่วยลดข้อบกพร่องดังกล่าวข้างต้นและนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงที่ถ่ายทอดของเซลล์ปกติ เซลล์ไฟโบรลด้วยตนเองที่ได้จากวิธีนี้ใช้เพื่อเติมข้อบกพร่องของเนื้อเยื่ออ่อนบนใบหน้า ในการศึกษาโดย H. Keller และผู้ร่วมเขียน (2000) ผู้ป่วยอายุ 37 ถึง 61 ปีที่มีริ้วรอยและรอยแผลเป็นจากรังสีได้รับการรักษา ขริบผิว (4 มิลลิเมตร) ภูมิภาค BTE เราส่งไปยังห้องปฏิบัติการในหลอดฆ่าเชื้อบรรจุ 10 มล. ของกลางวัฒนธรรม (Dulbecco mikoseptikom ยาปฏิชีวนะไพรูและซีรั่มวัวของทารกในครรภ์) วัสดุถูกวางไว้ในจานเลี้ยงเชื้อที่มีเส้นผ่าศูนย์กลาง 60 มิลลิเมตรและบ่มในเทอร์โมสตัทที่มีบรรยากาศ 5% CO2 หลังจาก 1 สัปดาห์เซลล์ถูกนำออกจากจานโดยการยับยั้งไทรอยซิซิชั่นและวางลงในขวดขนาด 25 ซม. เซลล์มีการบริหารงานให้กับผู้ป่วยในจำนวน 4 x 107 ที่สำคัญและยาวนานผลทางคลินิกพบว่าในผู้ป่วยที่มีการแก้ไขพับ nasolabial และในผู้ป่วยที่มีรอยแผลเป็นหลังจากที่ 7 และ 12 เดือนหลังจากปลูกที่สามของการรบรา autologous ตามการวิเคราะห์ cytometry ของกระแสเซลล์ไฟโบรลแลนที่เพาะเลี้ยงได้ผลิตคอลลาเจนชนิด I เป็นจำนวนมาก การศึกษาในหลอดทดลองแสดงให้เห็นว่ามีการหดตัวของไฟโบรบลาสต์ที่ฉีดได้ตามปกติ สองเดือนหลังจากได้รับการฉีดพ่นไฟเตอร์ที่เลี้ยงด้วยผิวหนังในขนาด 4 x 107 เซลล์พบว่าหนูเปลือยเปล่าไม่พบ fibroblasts ฉีดไม่ได้ก่อให้เกิดแผลเป็นและ fibrosis กระจายในผู้ป่วย ตามที่ผู้เขียน, fibroblasts autologous ปลูกสามารถที่จะผลิตคอลลาเจนอย่างต่อเนื่องซึ่งจะให้ผลการฟื้นฟูความงาม ในกรณีนี้เนื่องจากช่วงชีวิตของเซลล์ที่แตกต่างกันมี จำกัด บทคัดย่อมาลาเรียจากคนไข้ที่มีอายุน้อยกว่ามีประสิทธิภาพในผู้ป่วยสูงอายุ ในอนาคตความเป็นไปได้ในการเก็บรักษา cryopreservation ของวัฒนธรรมพาหะนำโรคที่ถ่ายจากผู้บริจาคที่อายุน้อยจะถือว่าเป็นการปลูกถ่ายภายหลังให้แก่ผู้ป่วยสูงอายุที่มีเซลล์หนุ่มของตัวเอง สรุปได้ว่ามันไม่ได้เป็นข้อสรุปที่ถูกต้องมากที่รบรา autologous ให้ความปลอดภัยการทำงานของพวกเขาจะเหมาะสำหรับการแก้ไขข้อบกพร่องเนื้อเยื่อใบหน้าที่อ่อนนุ่ม ในขณะเดียวกันผู้เขียนเองก็ยังตั้งข้อสังเกตอีกว่าในระหว่างการวิจัยยังเกิดสถานการณ์ที่มีปัญหาเกี่ยวกับการใช้ระบบไฟโบรบลาสต์คอลลาเจนด้วยเช่นกัน ผลทางคลินิกมักจะอ่อนแอกว่าการใช้คอลลาเจนจากวัวซึ่งทำให้ผู้ป่วยรู้สึกผิดหวัง

โดยทั่วไปแล้วข้อมูลจากวรรณคดีเกี่ยวกับแนวโน้มของการใช้เซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อชั้นในเชิงคลินิกมีแนวโน้มในแง่ดี มีความพยายามที่จะใช้เซลล์ต้นกำเนิด autologous multipotent mesenchymal progenitor cells เพื่อรักษาแผลที่เกิดจากความเสื่อม การทดลองทางคลินิกครั้งแรกของเซลล์ต้นกำเนิดที่มีรากฟันเทียม mesenchymal ในการรักษากระดูกหักที่ซับซ้อนของกระดูกจะดำเนินการ autologous และ allogeneic เซลล์ไขกระดูก stromal mesenchymal ใช้ในการสร้างเนื้อเยื่อกระดูกอ่อนสำหรับการปลูกในการแก้ไขข้อบกพร่องข้อกระดูกอ่อนเนื่องจากการบาดเจ็บหรือแผลภูมิ มีการพัฒนาวิธีการทางคลินิกในการใช้เซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มสมองเพื่อลดข้อบกพร่องของกระดูกในเด็กที่มีรูปแบบที่รุนแรงของการเสื่อมสภาพที่ไม่สมบูรณ์ซึ่งเกิดจากการกลายพันธุ์ของยีนชนิดที่ 1 ของคอลลาเจน หลังจาก mieloabelyatsii เด็กผู้รับการปลูกถ่ายไขกระดูกจากผู้บริจาคที่มีสุขภาพดี HLA เข้ากันได้เป็นไขกระดูก unfractionated อาจมีปริมาณที่เพียงพอของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ที่จะเติมเต็มความบกพร่องของกระดูกอย่างรุนแรง หลังจากการปลูกถ่ายไขกระดูกแล้วมีการเปลี่ยนแปลงลักษณะทางจุลพยาธิวิทยาในกระดูกต่อกระดูกเพิ่มอัตราการเจริญเติบโตและอัตราการเกิดกระดูกหัก ในบางกรณีผลการรักษาในเชิงบวกก็คือการปลูกถ่ายไขกระดูกและกระดูกที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด สำหรับการรักษาความเปราะบางที่มีมา แต่กำเนิดของกระดูกเนื่องจากความไม่สมดุลของ osteoblasts และ osteoclasts ในเนื้อเยื่อกระดูกการปลูกถ่าย MSK ยังใช้ การฟื้นฟูการก่อตัวของกระดูกในกรณีนี้เกิดขึ้นได้เนื่องจากมีการชักนำให้เกิดการชักนำให้เกิดการชักนำให้เกิดพังผืดของลำต้นและเซลล์ต้นกำเนิดในเนื้อเยื่อกระดูกของผู้ป่วย

วิธีการปรับเปลี่ยนทางพันธุกรรมของเซลล์ต้นกำเนิดจาก mesenchymal ผู้บริจาคกำลังได้รับการปรับปรุงเพื่อแก้ไขข้อบกพร่องทางพันธุกรรมของเนื้อเยื่อเนื้อเยื่อ มันควรว่าเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal จะเร็ว ๆ นี้ถูกนำมาใช้ในประสาทวิทยาสำหรับเซลล์สมองทิศทาง chimerization และสร้างสระว่ายน้ำของเซลล์ที่มีสุขภาพดีมีความสามารถในการสร้างเอนไซม์ที่ขาดหรือปัจจัยที่รับผิดชอบในการอาการทางคลินิกของโรค ถ่ายเทของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal สามารถนำมาใช้ในการเรียกคืน stroma ไขกระดูกในผู้ป่วยมะเร็งหลังการรักษาด้วยรังสีและเคมีบำบัดและร่วมกับเซลล์ไขกระดูก - สำหรับการฟื้นฟูการ hematopoiesis การพัฒนาของการบำบัดทดแทนมุ่งเป้าไปที่การขจัดข้อบกพร่องของระบบกล้ามเนื้อและกระดูกโดยใช้ MSCs ส่งเสริมวิศวกรรมในการออกแบบวัสดุเมทริกซ์หรือ biomimics ขึ้นรูปโครงกระดูกที่พำนักอยู่ในลูกหลานของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal

แหล่งที่มาของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มสมอง

แหล่งที่มาหลักของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal เป็นเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูกเม็ดเลือดซึ่งเลี้ยงลูกด้วยนมอย่างต่อเนื่องแยกความแตกต่างเข้าสู่เซลล์ของเลือดและระบบภูมิคุ้มกันของร่างกายในขณะที่เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ที่นำเสนอประชากรขนาดเล็กของเซลล์ stromal ไขกระดูก fibroblast เหมือนและช่วยรักษาสถานะแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด ภายใต้เงื่อนไขบางเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal แยกความแตกต่างเข้าสู่เซลล์ของกระดูกอ่อนและกระดูก เมื่อชุบในสื่อวัฒนธรรมในความหนาแน่นต่ำเซลล์โมโนนิวเคลียร์ปลูกถ่ายไขกระดูก stromal รูปแบบอาณานิคมของเซลล์สานุศิษย์ซึ่งในความเป็นจริงมี fibroblast เซลล์สารตั้งต้นหลายด้าน mesenchymal นักเขียนบางคนบอกว่าไขกระดูกฝากเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ปราศจากข้อผูกมัดซึ่งต้องขอบคุณความสามารถในการต่ออายุตัวเองและศักยภาพความแตกต่างสูงให้เนื้อเยื่อของร่างกายก่อนหน้าเซลล์ mesenchymal stromal ตลอดชีวิตของสิ่งมีชีวิตเลี้ยงลูกด้วยนม

ในไขกระดูกองค์ประกอบของเซลล์ stromal สร้างเครือข่ายที่เติมช่องว่างระหว่าง sinusoids และเนื้อเยื่อกระดูก เนื้อหาของ MSC ที่อยู่เฉยๆในไขกระดูกของผู้ใหญ่จะเทียบได้กับจำนวนเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดและไม่เกิน 0.01-0.001% เซลล์ต้นกำเนิด Mesenchymal แยกออกจากไขกระดูกและไม่อยู่ภายใต้การเพาะปลูกจะปราศจากโมเลกุลกาว MSC ดังกล่าวไม่ได้แสดง CD34, ICAM, VCAM, คอลลาเจนชนิด I และ III, CD44 และ CD29 ดังนั้นในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal จะไม่คงที่บนพื้นผิววัฒนธรรมและรากเหง้ามาเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ที่สูงขึ้นได้เกิดส่วนประกอบ cytoskeletal และเครื่องรับของโมเลกุลเซลล์ยึดเกาะ เซลล์ Stromal ที่มีฟีโนไทป์ CD34 สามารถพบได้ในเลือดที่อยู่รอบ ๆ แม้ว่าจะมีขนาดเล็กลงในไขกระดูกมากกว่าเซลล์เม็ดเลือดขาวที่มี CD34- บวก เซลล์ CD34 ที่แยกได้จากเลือดและถ่ายโอนเข้าสู่วัฒนธรรมจะยึดติดกับพื้นผิวและสร้างรูปแบบของอาณานิคมของเซลล์ที่เป็นพาหะของ fibroblast

เป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้วว่าในช่วงตัวอ่อนฐานฐานของอวัยวะทั้งหมดและเนื้อเยื่อของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมและมนุษย์เกิดจากสระว่ายน้ำส่วนกลางของต้นกำเนิดจากต้นกำเนิดก่อนและในขั้นตอนของการสร้างอวัยวะ ดังนั้นจึงเชื่อกันว่าในร่างกายผู้ใหญ่ส่วนใหญ่ของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มสมองจะอยู่ในเนื้อเยื่อเกี่ยวพันและกระดูก ได้รับการยอมรับว่าส่วนใหญ่ขององค์ประกอบเซลล์ของ stroma ของเนื้อเยื่อเกี่ยวพันและหลวมจะแสดงโดยเซลล์ต้นกำเนิดมุ่งมั่นซึ่ง แต่เก็บความสามารถในการขยายและสร้างโคลนในหลอดทดลอง ด้วยการแนะนำของเซลล์ดังกล่าวเข้าสู่กระแสเลือดมากกว่า 20% ของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ปลูกฝังองค์ประกอบ stromal เม็ดเลือดหมู่เนื้อเยื่อและอวัยวะ parenchymatous

แหล่งที่มีศักยภาพของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal เป็นเนื้อเยื่อไขมันในระหว่างที่เซลล์ต้นกำเนิดจากความมุ่งมั่นที่พบในองศาที่แตกต่างของบรรพบุรุษ adipocyte องค์ประกอบรากเหง้าผู้ใหญ่อย่างน้อยของเนื้อเยื่อไขมัน - เซลล์ stromal และหลอดเลือดซึ่งเป็นเช่นเดียวกับบรรพบุรุษ mesenchymal หลายด้านของไขกระดูกสามารถแตกต่างใน adipocytes ภายใต้การกระทำของ glucocorticoids, ปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลินและอินซูลิน ในวัฒนธรรมของเซลล์หลอดเลือด stromal แยกความแตกต่างเข้า adipocytes และ chondrocytes และ adipocytes กระดูกเนื้อเยื่อไขมันเซลล์ไขกระดูกที่ได้มาจากกำลังก่อตัวขึ้นและเซลล์สร้างกระดูก

ในกล้ามเนื้อพบต้นกำเนิด stromal stem ในเซลล์หลักของเซลล์ที่แยกได้จากกล้ามเนื้อโครงร่างของมนุษย์เซลล์ของรูปแบบ stellate และ multinucleated myotubes ตรวจพบได้ ในการปรากฏตัวของเซลล์ stellate ม้าซีรั่มแพร่หลายในหลอดทดลองโดยไม่สัญญาณของ cytodifferentiation และหลังการเพิ่มของ dexamethasone ไปยังสื่อวัฒนธรรมของความแตกต่างที่โดดเด่นด้วยการปรากฏตัวของเซลล์องค์ประกอบเซลล์ที่มีฟีโนไทป์ของโครงกระดูกและกล้ามเนื้อเรียบกระดูกกระดูกอ่อนและเนื้อเยื่อไขมัน ดังนั้นทั้งเซลล์ต้นกำเนิดที่มีความมุ่งมั่นและไม่มีข้อผูกมัดมีอยู่ในเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อของมนุษย์ มันแสดงให้เห็นว่าประชากรของเซลล์ต้นกำเนิดอยู่ในกล้ามเนื้อโครงร่างมาจากเซลล์ต้นกำเนิดปราศจากข้อผูกมัดไขกระดูก mesenchymal หลายด้านและมีความแตกต่างจากเซลล์ดาวเทียม myogenic

ในกล้ามเนื้อหัวใจของหนูแรกเกิดยังพบเซลล์ stellate กาวที่เหมาะสมสำหรับความแตกต่างที่มีศักยภาพของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal หลายด้านเช่นภายใต้อิทธิพลของ dexamethasone ที่พวกเขาแตกต่างใน adipocytes, เซลล์สร้างกระดูก, chondrocytes เซลล์กล้ามเนื้อเรียบ myotubes ของโครงกระดูกกล้ามเนื้อและการเต้นของหัวใจ myocytes มันได้รับการแสดงให้เห็นว่าหลอดเลือดเซลล์กล้ามเนื้อเรียบ (pericytes) จะได้มาหลายด้านแตกต่าง perivascular mesenchymal เซลล์สารตั้งต้น ในวัฒนธรรมของ perivascular เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ด่วนแบบเรียบโปรตีนของกล้ามเนื้อและเกล็ดเลือดที่ได้มารับปัจจัยการเจริญเติบโตและสามารถที่จะแยกความแตกต่างอย่างน้อยเซลล์กล้ามเนื้อเรียบ

สถานที่พิเศษในแง่ของการสำรองลำต้นคือเนื้อเยื่อกระดูกอ่อนที่มีศักยภาพในการฟื้นฟูที่ต่ำมากเชื่อกันว่าเป็นเพราะการขาดแคลนเซลล์ต้นกำเนิด multipotent mesenchymal หรือความแตกต่างและปัจจัยการเจริญเติบโต สันนิษฐานว่าเซลล์ต้นกำเนิดของ multiple mentenchal mesenchymal ที่ได้รับบริจาคจาก chondro และ osteogenesis จะเข้าสู่เนื้อเยื่อกระดูกอ่อนจากแหล่งเนื้อเยื่ออื่น ๆ

เนื้อเยื่อต้นกำเนิดและเงื่อนไขสำหรับค่าคอมมิชชั่นของเซลล์ต้นกำเนิด mezenchymal ในเส้นเอ็นยังไม่เป็นที่ยอมรับ สังเกต Ekspermentalnye ชี้ให้เห็นว่าในกระต่ายหลังคลอดจุดอ่อนเซลล์เอ็นต้นในวัฒนธรรมหลักในการเดินครั้งแรกและรักษาแสดงออกของคอลลาเจนชนิด I และ Decorin แต่เมื่อเพาะเลี้ยงต่อไปพวกเขาสูญเสียความแตกต่างเครื่องหมาย tenotsitov

มันควรจะตั้งข้อสังเกตว่าคำตอบของคำถามที่ว่ามีการแปลแน่นอนในเนื้อเยื่อต่างๆของหลายด้านเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal มักจะอยู่ใน stroma ของพวกเขาหรือว่ายน้ำในเนื้อเยื่อของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ได้รับการชดเชยจากการย้ายถิ่นของเซลล์ต้นกำเนิด stromal ไขกระดูกก็จะรอคอยยังคง

นอกเหนือไปจากไขกระดูกและพื้นที่เนื้อเยื่ออ่อนอื่น ๆ ของสิ่งมีชีวิตที่เป็นผู้ใหญ่แล้วอีกหนึ่งแหล่งของ MSC อาจเป็นเลือดจากสายสะดือ มันแสดงให้เห็นว่าเลือดหลอดเลือดดำสายสะดือมีเซลล์ที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาและแอนติเจนคล้ายกับเซลล์ต้นกำเนิดหลายด้าน mesenchymal มีความสามารถในการยึดเกาะและไม่ด้อยกว่าเซลล์ mesenchymal รากเหง้าหลายด้านของกระดูกต้นกำเนิดไขกระดูกโดยความแตกต่างที่อาจเกิดขึ้น ในวัฒนธรรมของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal เลือดสายสะดือตรวจพบ 5-10% ปราศจากข้อผูกมัดหลายด้านตั้งต้น mesenchymal มันกลับกลายเป็นว่าจำนวนของพวกเขาในเลือดจากสายสะดือเป็นสัดส่วนผกผันกับอายุครรภ์ซึ่งเป็นหลักฐานทางอ้อมของการย้ายถิ่นของหลายด้านเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal เข้าไปในเนื้อเยื่อต่าง ๆ ในระหว่างการพัฒนาของทารกในครรภ์ มีข้อมูลแรกที่เกี่ยวกับการประยุกต์ใช้ทางคลินิกของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ที่แยกได้จากเลือดสายสะดือเช่นเดียวกับตัวอ่อนที่ได้มาของวัสดุซึ่งจะขึ้นอยู่กับความสามารถในการเป็นที่รู้จักของลำต้นของทารกในครรภ์เซลล์บูรณาการและฟังก์ชั่น prizhivlyatsya ในอวัยวะและระบบเนื้อเยื่อผู้รับผู้ใหญ่

การค้นหาแหล่งใหม่ของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มสมอง

การใช้เซลล์ต้นกำเนิดของต้นกำเนิดจากตัวอ่อนเช่นเดียวกับเซลล์อื่น ๆ ของทารกในครรภ์ทำให้เกิดปัญหาด้านจริยธรรมกฎหมายและกฎหมาย ดังนั้นการค้นหาวัสดุผู้บริจาคเซลล์เสริม ความพยายามที่ไม่ประสบความสำเร็จประยุกต์ใช้ทางคลินิกของเซลล์ผิวหนังของมนุษย์ก็ถูกกำหนดโดยไม่เพียง แต่ความจุสูงทางการเงินของเทคโนโลยี แต่ยังสร้างความแตกต่างอย่างรวดเร็วของ fibrocytes เข้าไปในเซลล์ที่มีการแพร่กระจายอย่างมีนัยสำคัญที่อาจเกิดขึ้นน้อยลงและการผลิตจำนวน จำกัด ของปัจจัยการเจริญเติบโต ความคืบหน้าในการศึกษาชีววิทยาของ MSK และ multipotent mesenchymal บรรพบุรุษของกระดูกได้รับอนุญาตให้มีการพัฒนากลยุทธ์สำหรับการใช้คลินิก autologous mesenchymal stem cells เทคโนโลยีของการแยก, การเพาะปลูก, การสืบพันธุ์ในอดีตและความแตกต่างที่ต้องการจำเป็นต้องใช้ประการแรกคือการศึกษาสเปกตรัมของโมเลกุลของ MSCs การวิเคราะห์ของพวกเขาพบว่าในวัฒนธรรมหลักของเนื้อเยื่อกระดูกของมนุษย์มีหลายชนิดของเซลล์ต้นกำเนิด multipecent mesenchymal Proosteoblastov ฟีโนไทป์ที่พบในเซลล์แสดงเครื่องหมาย Stro-1 เซลล์ stromal รากเหง้า แต่ไม่ได้ดำเนินการเครื่องหมายของกระดูก - การด่าง phosphatase เซลล์ดังกล่าวมีลักษณะความสามารถต่ำในการสร้างเมทริกซ์กระดูก mineralized เช่นเดียวกับการขาดการแสดงออกของ osteopontin และตัวรับฮอร์โมนพาราไทรอยด์ อนุพันธ์ของเซลล์ที่เป็นบวก STRO-1 ที่ไม่ได้แสดงถึงอัลคาไลน์ฟอสเฟตาเทสแสดงโดย osteoblasts ที่เป็นสื่อกลางและมีความแตกต่างกันอย่างสิ้นเชิง เป็นที่ยอมรับว่าองค์ประกอบเซลล์ของเส้นโคลนของเซลล์ที่มี STRO-1 ที่เป็นบวกของกระดูกฟักทองของมนุษย์สามารถแยกแยะออกเป็น osteocytes และ adipocytes ที่เป็นผู้ใหญ่ได้ ความแตกต่างทิศทางของเซลล์เหล่านี้ขึ้นอยู่กับการสัมผัสของกรดไขมันไม่อิ่มตัว, proinflammatory cytokines ที่ให้ผู้อื่น - IL-1b และปัจจัยเนื้อร้ายเนื้องอก A (TNF-A) เช่นเดียวกับการต้านการอักเสบและภูมิคุ้มกัน TGF-B

ต่อมาก็พบว่าหลายด้านเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลขาดเฉพาะกับพวกเขาฟีโนไทป์โดยธรรมชาติ แต่แสดงเครื่องหมายที่ซับซ้อนลักษณะ mesenchymal, endothelial, เยื่อบุผิวและเซลล์กล้ามเนื้อในกรณีที่ไม่มีการแสดงออกของเซลล์เม็ดเลือดแอนติเจน immunophenotypic - การ CD45, CD34 และ CD14 นอกจากนี้เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal และ constitutively inducibly ผลิตเม็ดเลือดและปัจจัยการเจริญเติบโตที่ไม่ใช่เม็ดเลือด interleukins และ chemokines และในหลายด้านเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลแสดงตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตและ cytokines ในบรรดาเซลล์ stromal พื้นฐานของร่างกายมนุษย์ที่พบ dormantnye หรือเซลล์พักผ่อนกับ immunophenotype เกือบเหมือนกันกับรายละเอียดแอนติเจน 5-fluorouracil เซลล์ mesenchymal รากเหง้าหลายด้านดิบ - เหล่านั้นและเซลล์อื่น ๆ แสดง CD117 เครื่องหมาย "ผู้ใหญ่" เซลล์ต้นกำเนิด

ดังนั้นเครื่องหมายเซลล์ที่ไม่ซ้ำกันเพื่อเซลล์ต้นกำเนิดของ mesenchymal ยังไม่ได้รับการจัดตั้งขึ้น สันนิษฐานว่าเป็นเซลล์พักผ่อนประชากรปราศจากข้อผูกมัดของหลายด้านเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลเนื่องจากพวกเขาไม่แสดงเครื่องหมายของเซลล์มุ่งมั่นที่จะโรคข้อเข่าเสื่อม (Cbfa-1) หรือ adipogenesis (PPAR-Y-2) สัมผัสเป็นเวลานานของเซลล์พักผ่อนช้า proliferating กับทารกในครรภ์ผลลูกวัวซีรั่มในรูปแบบของสารตั้งต้นที่มีความมุ่งมั่นที่แตกต่างกันหนักซึ่งมีลักษณะการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็ว การเจริญเติบโตของ clonal ของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ดังกล่าวได้รับการสนับสนุนโดย FGF2 ปรากฏว่าจีโนมที่ได้มาจากเซลล์ต้นกำเนิด stromal "ปิด" แน่นพอที่ได้รับรายงานเกี่ยวกับการขาดของความแตกต่างที่เกิดขึ้นเองใน MSCs - การ. โดยไม่มีเงื่อนไขพิเศษสำหรับการกระทำแม้พวกเขาจะไม่ถูกแปลงเป็นเซลล์ของชุด mesenchymal

เพื่อศึกษาโครงสร้างประชากรที่ได้รับ mesenchymal เซลล์ต้นกำเนิดจะค้นหาโปรตีนเครื่องหมายความแตกต่างในเซลล์ stromal และวัฒนธรรมหลัก ในอาณานิคม clonal เซลล์ทดสอบไขกระดูกในหลอดทดลองพบว่าเมื่ออยู่ภายใต้วัฒนธรรมหลักของ EGF เพิ่มขนาดเฉลี่ยของอาณานิคมและลดการแสดงออก clonal ของด่าง phosphatase ในขณะที่การเพิ่มขึ้นของ hydrocortisone ป็นการแสดงออกของด่าง phosphatase ซึ่งเป็นเครื่องหมายของความแตกต่างเซลล์กระดูกของการปฐมนิเทศ MSCs โคลนอลแอนติบอดีต่อต้าน Stro-1 ทำให้มันเป็นไปได้ที่จะแยกและประชากรศึกษาของเซลล์สานุศิษย์ Stro-1-ในเชิงบวกในระบบที่แตกต่างกันวัฒนธรรม Dexter สเปกตรัมของ cytokines ควบคุมการแพร่กระจายไม่เพียงและความแตกต่างของเม็ดเลือดและต่อมน้ำเหลืองเซลล์ แต่ยังมีส่วนร่วมในการสร้าง, การสร้างและการสลายของเนื้อเยื่อโครงกระดูกโดยพารา, อัตโนมัติและกลไกต่อมไร้ท่อ เปิดตัวรับพึ่งทูตรองเช่นค่าย diacylglycerol, ทอ triphosphate และ Ca2 + นอกจากนี้ยังใช้สำหรับการวิเคราะห์เครื่องหมายของประเภทที่แตกต่างกันของเนื้อเยื่อของเซลล์ stromal แสดงผู้รับที่เกี่ยวข้อง การใช้โคลนอลแอนติบอดีเป็นเครื่องหมายได้รับอนุญาตให้สร้าง stromal อวัยวะน้ำเหลืองที่อยู่ในเซลล์ตาข่ายสำหรับ T และโซน B-ขึ้น

สำหรับข้อพิพาททางวิทยาศาสตร์บางอย่างต่อไปรอบคำถามของความเป็นไปได้ของการกำเนิดของ MSC จากเซลล์ต้นกำเนิดโลหิต. อันที่จริงการค้นพบของการระงับเซลล์ไขกระดูกในวัฒนธรรมที่แยกเดี่ยวทำให้โคโลนีเจริญเติบโตขึ้น แต่ก็แสดงให้เห็นว่าการปรากฏตัวของสารตั้งต้นของอาณานิคม fibroblast และเชื้อโรคต่างๆแตกต่างของเนื้อเยื่อเม็ดเลือดเป็นส่วนหนึ่งของไขกระดูกไม่ได้เป็นหลักฐานของการกำเนิดของพวกเขาร่วมกันของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด โดยใช้การวิเคราะห์จำแนกเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูกพบว่าจุลภาคที่ปลูก heterotopic เซลล์เม็ดเลือดของไขกระดูกจะถูกโอนซึ่งพิสูจน์การดำรงอยู่ในไขกระดูกอิสระของประชากร MSC histogenetic ของเซลล์เม็ดเลือด

นอกจากนี้วิธีการโคลนเลือกเปิดเผยใน monolayer วัฒนธรรมของเซลล์ไขกระดูก stromal ของหมวดหมู่ใหม่ของเซลล์สารตั้งต้นในการกำหนดตัวเลขของพวกเขาที่จะศึกษาคุณสมบัติของพวกเขาเจริญและความแตกต่างที่อาจเกิดขึ้น มันก็พบว่าในหลอดทดลอง fibroblast เหมือนเซลล์ stromal แพร่หลายและรูปแบบอาณานิคมซ้ำว่าเมื่อปลูกย้อนกลับเข้าไปในร่างกายเพื่อให้มั่นใจว่าการก่อตัวของอวัยวะสร้างเลือดใหม่ ผลจากการศึกษาของโคลนบุคคลระบุว่ามีประชากรของเซลล์ในการเจริญและความแตกต่างศักยภาพของพวกเขาสามารถที่จะเรียกร้องบทบาทของเซลล์ต้นกำเนิดของเนื้อเยื่อ stromal ที่ Gistogeneticheskaja อิสระของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดในเซลล์ stromal บังเกิดเกล้าที่ เซลล์ของประชากรกลุ่มนี้มีลักษณะการเจริญเติบโตที่สนับสนุนตนเองและแยกแยะออกเป็นเซลล์ต้นกำเนิดของกระดูกกระดูกอ่อนและเนื้อเยื่อกระดูก

ที่น่าสนใจมากเป็นผลจากการศึกษา Chailakhyan et al อาร์ (1997-2001) ซึ่งเป็นกระดูกไขกระดูกเพาะเลี้ยงที่ได้มาจากต้นกำเนิดเซลล์ stromal กระต่ายหนูตะเภาและหนูของ-MEM กลางวัฒนธรรมเสริมด้วยซีรั่มน่องทารกในครรภ์ ผู้ทำการทดลองทำการสำรวจด้วยความหนาแน่นเริ่มต้นของเซลล์ไขกระดูก 2-4 x 103 ต่อ 1 cm2 ตามที่ใช้ป้อนคล้ายคลึงกันหรือ heterologous การใช้งานโดยการฉายรังสีของเซลล์ไขกระดูกในการดำเนินการยึดป้อนยา แต่การขยายบล็อกสมบูรณ์ อาณานิคมหลักของวัณโรคสองสัปดาห์ที่ได้รับ trypsinized เพื่อผลิตสายพันธุ์ monoclonal หลักฐานอาณานิคมกำเนิด clonal ได้รับใช้เครื่องหมายโครโมโซมผสมวัฒนธรรมของไขกระดูกของชายและหนูตะเภาหญิงไทม์ยิงวัฒนธรรมชีวิตเช่นเดียวกับการผสมวัฒนธรรมของไขกระดูกของหนู syngeneic และ CBA SVAT6T6 สารละลายปลูกแยกสดเซลล์ไขกระดูกปลูกในหลอดทดลองหรือ stromal รบราภายใต้การทำงานของไตแคปซูลได้ดำเนินการในโครง ivalonovyh รูพรุนหรือเจลาตินเช่นเดียวกับกระต่ายยกเลิกกระดูกเนื้อโปร่งเมทริกซ์ โคลนปลูกลงในปกกระดูกต้นขาหนูตะเภาทำความสะอาดจากเนื้อเยื่ออ่อนและเชิงกรานตัด epiphysis และทั่วถึงล้างไขกระดูกของพวกเขา กระดูกถูกตัดเป็นชิ้นส่วน (3-5 มิลลิเมตร) แห้งและฉายรังสีที่ขนาด 60 Gy ในบริเวณปกกระดูกโครมาพันธ์ของ fibroblast แต่ละตัวถูกใส่และใส่เข้าไปในกล้ามเนื้อ สำหรับการปลูกถ่ายเยื่อบุช่องท้องของเซลล์ stromal ที่ปลูกในหลอดทดลองเราใช้ประเภทห้องที่แพร่ (V = 0,015 ซม. 3, H = 0, L มิลลิเมตร) และ D (V = 0,15 ซม. 3, H = 2 มิลลิเมตร)

เมื่อศึกษาการเปลี่ยนแปลงของการเจริญเติบโตของสายพันธุ์ clonal Chailakhyan et al อาร์ (2001) พบว่าเซลล์แต่ละเซลล์อดีตอาณานิคมเช่นเดียวกับลูกหลานของพวกที่มีศักยภาพในการเจริญดี โดยทางเดินที่ 10 จำนวนของ fibroblasts ในบางสายพันธุ์คือ 1.2-7.2 x 10 ⁹เซลล์ ในกระบวนการของการพัฒนาของพวกเขาพวกเขาดำเนินการได้ถึง 31-34 ซ้ำซ้อนโทรศัพท์มือถือ ดังนั้นการปลูกถ่ายกระดูก heterotopic ของสายพันธุ์ที่ได้มาจากไขกระดูกที่เกิดขึ้นจากสารตั้งต้น stromal โคลนหลายโหลนำไปสู่การถ่ายโอนจุลภาคไขกระดูกและการศึกษาในโซนใหม่การปลูกถ่ายอวัยวะสร้างเลือด ผู้เขียนยกคำถามที่ว่าโคลนแต่ละคนสามารถทนต่อเซลล์ไขกระดูกจุลภาค stromal หรือมันต้องอาศัยความร่วมมือของหลายรากเหง้า stromal clonogenic หรือไม่ และถ้าโคลนแต่ละคนจะสามารถโอนจุลภาคไม่ว่าจะเป็นเต็มรูปแบบของทั้งสามเลือดจมูกหรือโคลนที่แตกต่างกันให้การก่อตัวของเม็ดเลือดจุลภาคสำหรับเชื้อโรคที่แตกต่างกันหรือไม่? เพื่อแก้ไขปัญหาเหล่านี้ได้รับการพัฒนาเทคโนโลยีของเซลล์ต้นกำเนิดการเพาะปลูก stromal ในเจลคอลลาเจนที่ช่วยให้คุณที่จะยิงจากพื้นผิวของเซลล์อาณานิคมปลูกสำหรับการปลูก heterotopic ภายหลัง บุคคลรบราโคลน stromal เซลล์ไขกระดูกเติบโตขึ้นจากหนู CBA และหนูตะเภาตัดพร้อมกับชิ้นส่วนของเสื้อเจลและ heterotopic ปลูก - ภายใต้แคปซูลไตของหนู syngeneic หรือ autologous กล้ามเนื้อหน้าท้องหนูตะเภา เมื่อปลูกในกล้ามเนื้ออาณานิคมบนเจลถูกวางไว้ในฝาครอบกระดูก

เราพบว่าโดย 50-90 วันหลังปลูกถ่ายไขกระดูก fibroblast อาณานิคมใน 20% ของกรณีถูกตั้งข้อสังเกตในการพัฒนาพื้นที่การปลูกถ่ายกระดูกหรือกระดูกและเนื้อเยื่อเม็ดเลือด ใน 5% ของสัตว์ผู้รับรูปแบบกระเป๋าของกระดูกที่มีโพรงที่เต็มไปด้วยไขกระดูก ภายในถังกระดูก foci ดังกล่าวมีรูปร่างโค้งมนและแคปซูลสร้างเนื้อเยื่อกระดูกมี osteocytes และชั้นสร้างกระดูกพัฒนาดี ไขกระดูกโพรงมีผ้าตาข่ายกับเม็ดเลือดและเซลล์เม็ดเลือดแดงสัดส่วนของการที่ไม่แตกต่างจากที่อยู่ในไขกระดูกปกติ การปลูกถ่ายอวัยวะไตถูกร่างกายไขกระดูกปกติที่เกิดขึ้นจากการปลูกถ่ายกระดูกพื้นเมืองไขกระดูกที่แคปซูลกระดูกครอบคลุมเฉพาะช่องไขสันหลังจากแคปซูลของไต เนื้อเยื่อ haematopoietic รวม myeloid, ดเกล็ดเลือดและองค์ประกอบเม็ดเลือดแดง Stroma ของคลองไขสันหลังได้รับการพัฒนารูจมูกเป็นอย่างดีและมีระบบเซลล์ไขมันทั่วไป ในขณะเดียวกันในพื้นที่ของการปลูกถ่ายกระดูกบางโคโลนีที่มีอาการของโลหิตไม่พบภายใต้แคปซูลไต การศึกษาการเจริญและความแตกต่างความแรงของโคลนของแต่ละบุคคลได้รับการอย่างต่อเนื่องใน monoclonal กระดูกกระต่ายสายพันธุ์ไขกระดูกเซลล์จะ resuspended ในสื่อวัฒนธรรมและฟองน้ำ ivalonovoy แยกต่างหากชั่งน้ำหนัก 1-2 มก. ซุกใต้แคปซูลไตกระดูกกระต่ายไขกระดูกของผู้บริจาค เซลล์ดังกล่าวถูกยัดเยียดให้ autotransplantation สายพันธุ์ 21 โมโนโคลนอล ผลการวิจัยถูกนำมาพิจารณาใน 2-3 เดือน ผู้เขียนพบว่า 14% ของการปลูกถ่ายกระดูกไขกระดูกสายพันธุ์โมโนโคลนอลที่เกิดขึ้นในร่างกายประกอบด้วยกระดูกและไขกระดูกโพรงที่เต็มไปด้วยเซลล์เม็ดเลือด ใน 33% ของกรณีสายพันธุ์ที่ปลูกถ่ายกระดูกรูปขนาดเล็กที่มีขนาดแตกต่างกันฟันผุ ostootsitami ปิดตายในสร้างกระดูกและชั้นที่พัฒนาแล้ว ในบางกรณีฟองน้ำปลูกโคลนพัฒนาร่างแหโดยไม่ต้องกระดูกหรือเซลล์เม็ดเลือด บางครั้งก่อ stroma ตาข่ายที่เกิดขึ้นกับเครือข่ายการพัฒนาที่ดีของไซน์ แต่ไม่ได้บรรจุเซลล์เม็ดเลือด ดังนั้นผลที่ได้รับมีความคล้ายคลึงกับผู้ที่ได้รับการปลูกถ่ายโดยโคลนเจลคอลลาเจน แต่ถ้าโคลนปลูกปลูกบนพื้นผิวส่งผลให้เกิดการก่อตัวของเนื้อเยื่อไขกระดูกเป็น 5% ของกระดูก - 15% และผ้าตาข่าย - ใน 80% ของกรณี monoclonal ปลูกสายพันธุ์ก่อตัวของเซลล์ไขกระดูกพบว่าใน 14% ของกรณีของกระดูก - ใน 53% และตาข่าย - ใน 53% ของกรณี ตามที่ผู้เขียนนี้แสดงให้เห็นว่าเงื่อนไขสำหรับการดำเนินงานของการเจริญและความแตกต่างศักยภาพของเซลล์ stromal เมื่อปลูกลงบนโครงที่มีรูพรุนเป็นที่เหมาะสมมากขึ้นกว่าที่มีการปลูกในกระดูกและครอบคลุมพื้นผิวคอลลาเจน มันไม่ได้เป็นไม่ว่าการใช้วิธีการที่สูงขึ้นของการเพาะปลูกและการปลูกถ่ายของข้อเสนอแนะโคลนสามารถปรับปรุงเงื่อนไขสำหรับการดำเนินงานของโคลนนิ่งศักยภาพความแตกต่างและการเปลี่ยนแปลงความสัมพันธ์เหล่านี้ หรืออีกวิธีหนึ่ง แต่ค่าหลักของการวิจัยอยู่ในความจริงที่ว่าบางส่วนของโคลนเซลล์ stromal ความสามารถในการขึ้นรูปเนื้อเยื่อกระดูกขณะที่มั่นใจจุลภาคเม็ดเลือด stromal ทันทีสำหรับสามถั่วงอกเลือดไขกระดูก: เม็ดเลือดแดง, เม็ดเลือดและเกล็ดเลือด, การสร้างขนาดใหญ่พอที่บันไดเนื้อเยื่อเม็ดเลือดและ มวลกระดูกบางส่วน

นอกจากนี้ผู้เขียนได้แก้ปัญหาความสามารถในการแยกแยะเซลล์แต่ละชนิดของเซลล์ต้นกำเนิด stromal แต่ละตัวในสภาวะของระบบปิดของห้องกระจาย นอกจากนี้ก็จำเป็นต้องตรวจสอบว่าโคลนของแต่ละจัดแสดง pluripotent หรือการแสดงผลสำหรับความแตกต่างที่อาจเกิดขึ้นต้องมีปฏิสัมพันธ์ร่วมมือของหลายโคลนกับ cytodifferentiation สัญญาณคงอัตราส่วนที่แตกต่างกันซึ่งจะกำหนดรูปแบบพิเศษของกระดูกกระดูกอ่อนหรือตาข่าย โดยการรวมสองแนวทางระเบียบวิธี - โมโนโคลนอลแยกกระดูกเซลล์ต้นกำเนิดไขกระดูก stromal และปลูกไว้ในห้องแพร่ Chailakhyan et al อาร์ (2001) ที่ได้รับการผลที่ได้รับอนุญาตให้เข้าใกล้ความเข้าใจขององค์กรโครงสร้างของ stroma ไขกระดูก สายพันธุ์ที่ปลูกโมโนโคลนอลเซลล์ต้นกำเนิด stromal เข้าสู่เซลล์ O ประเภทผลในการก่อตัวของทั้งกระดูกและกระดูกอ่อนเนื้อเยื่อแสดงให้เห็นถึงความสามารถของลูกหลานของหนึ่งเซลล์ stromal อาณานิคมขึ้นรูปพร้อมกันการสร้างกระดูกและกระดูกอ่อน สันนิษฐานว่าเนื้อเยื่อกระดูกและกระดูกอ่อนมาจากเซลล์ต้นกำเนิด stromal ที่พบได้บ่อย ๆ ซ้ำ ๆ กัน อย่างไรก็ตามสมมติฐานนี้ไม่มีการยืนยันผลการทดลองที่ถูกต้อง การสร้างกระดูกและกระดูกอ่อนในห้องกระจายเป็นหลักฐานที่จำเป็นในการดำรงอยู่ของเซลล์ต้นกำเนิดของ stroma ไขกระดูกของเซลล์สารตั้งต้นทั่วไปสำหรับเนื้อเยื่อทั้งสองชนิดนี้

จากนั้นสายพันธุ์ที่สองและสามที่ได้จากการเพาะเลี้ยงหลักของไขกระดูกได้ 29 สายพันธุ์ถูกนำไปวางไว้ในห้องที่มีการกระจายตัวและฝังไว้ในถุงน้ำดีต่อสัตว์คล้ายคลึงกัน การศึกษาแสดงให้เห็นว่า 45% ของสายพันธุ์ monoclonal marcus monoclonal มีศักยภาพในการสร้าง osteogenic แต่เนื้อเยื่อกระดูกและกระดูกอ่อนมีอยู่ในห้องอีก 13 ห้องซึ่งคิดเป็น 76% ของทุกสายพันธุ์ ในห้องพักประเภท O การศึกษาความแตกต่างของเนื้อเยื่อกระดูกและเนื้อเยื่อกระดูกแตกต่างกัน 16 สายพันธุ์ ในสี่ห้อง (25%) ทั้งเนื้อเยื่อกระดูกและกระดูกอ่อนเกิดขึ้น อีกครั้งควรจะตั้งข้อสังเกตว่าการศึกษา Chailakhyan et al อาร์เซลล์ (2001) รากเหง้าของแต่ละบุคคลขนานสายพันธุ์เซลล์ประกอบด้วย 31-34 doublings และลูกหลานของพวกเขาคือ 0.9-2.0 × 10 ⁹เซลล์ จำนวน mitoses ที่เซลล์ต้นกำเนิดของสายพันธุ์ polyclonal ถูกเปิดเผยเป็นจริงเช่นเดียวกับเซลล์ของสายพันธุ์ monoclonal ในเวลาเดียวกันอัตราการพัฒนาสายพันธุ์ polyclonal โดยเฉพาะอย่างยิ่งในช่วงแรกของการสร้างขึ้นอยู่กับจำนวนอาณานิคมที่ใช้สำหรับการเริ่มต้นของสายพันธุ์ สายพันธุ์ที่เป็นตัวเชื่อมต่อของเซลล์ตัวอ่อนของมนุษย์ (WI-38) เมื่อสร้างขึ้นใหม่ที่ระดับ 12-15 ซ้ำก็มีโคโลนีที่มีขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางแตกต่างกันและอยู่ในเนื้อหาของเซลล์เหล่านั้น อาณานิคมขนาดใหญ่ที่มีมากกว่า 103 เซลล์มีเพียง 5-10% เท่านั้น เมื่อเพิ่มจำนวนหน่วยงานขึ้นแล้วสัดส่วนของอาณานิคมที่มีขนาดใหญ่ลดลง ขาวดำและโพลีไขกระดูก stromal สายพันธุ์ fibroblast สะสมโครโมโซมซ้ำตั้งหลังจาก 20 หรือมากกว่า doublings และแนวโน้มของการพัฒนาก็เปรียบได้กับการเปลี่ยนแปลงของสายพันธุ์ซ้ำรบราตัวอ่อน การวิเคราะห์ศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิดจาก stromal progenitor แต่ละเซลล์โดยการปลูกสายพันธุ์ monoclonal เข้าไปในห้องที่มีการกระจายตัวพบว่าครึ่งหนึ่งเป็น osteogenic อาณานิคมขนาดใหญ่คิดเป็น 10% ของจำนวนทั้งหมด ดังนั้นจำนวนของเซลล์ก่อตัวเป็นโคนที่เกี่ยวกับ osteogenic สอดคล้องกับประมาณ 5% ของประชากรทั้งหมดของพวกเขา ในเซลล์มวลรวมของ osteogenic ที่ระบุโดยผู้เขียนมีเซลล์ที่สามารถสร้างเนื้อเยื่อกระดูกและกระดูกอ่อนในเวลาเดียวกัน เป็นครั้งแรกที่พบว่าสำหรับทั้งสองประเภทของเนื้อเยื่อในชีวิตผู้ใหญ่เป็นเซลล์สารตั้งต้นที่พบบ่อย: 25% ของโคลนทดสอบที่ถูกสร้างขึ้นโดยเซลล์ที่คล้ายกันและตัวเลขของพวกเขาในประชากรทั่วไปของเซลล์ต้นกำเนิดเป็นไม่น้อยกว่า 2.5%

ดังนั้น heterotopic transplantation ของแต่ละโคลนของ fibroblasts ไขกระดูกได้เปิดด้านใหม่ของโครงสร้างองค์กรของประชากรของ mesenchymal progenitor เซลล์ พบเซลล์ stromal รากเหง้าความสามารถในการถ่ายโอนเฉพาะจุลภาคทันทีสำหรับทุกก้าน hemopoietic ซึ่งจำนวนในหมู่โคลนสอบสวนที่มีขนาดใหญ่ในรูปแบบที่แตกต่างกันคือ 5-15% (0.5-1.5% ของจำนวนเสียงทั้งหมดของเซลล์ต้นกำเนิดที่ตรวจพบ) พร้อมกับการโคลนนิ่งการถ่ายโอนสมบูรณ์จุลภาคไขกระดูกมีเซลล์ต้นกำเนิด, กำหนดเท่านั้นที่จะสร้างกระดูกซึ่งรูปแบบเมื่อถ่ายโอนไปยังระบบเปิดกระดูกที่ไม่สนับสนุนการพัฒนาของโลหิต จำนวนจากจำนวนเซลล์ต้นกำเนิดทั้งหมดอยู่ที่ 1.5-3% เซลล์เหล่านี้บางส่วนสามารถสร้างเนื้อเยื่อกระดูกได้ด้วยระยะเวลาที่ จำกัด ในการดูแลรักษาตนเอง ดังนั้นประชากรของเซลล์ต้นกำเนิด stromal จะแตกต่างกันในศักยภาพที่แตกต่างของ ในหมู่พวกเขามีหมวดหมู่มือถืออ้างว่าบทบาทของเซลล์ต้นกำเนิด stromal ความสามารถในการสร้างความแตกต่างในทุกสามมิติอยู่ในเนื้อเยื่อไขกระดูก stromal สร้างกระดูกกระดูกอ่อนและเนื้อเยื่อตาข่าย ข้อมูลเหล่านี้ช่วยให้เราสามารถหวังว่าด้วยความช่วยเหลือของเครื่องหมายเซลล์ต่างๆจะเป็นไปได้ในการกำหนดบทบาทของแต่ละประเภทของเซลล์ stromal ในจุลภาคขององค์กรที่เฉพาะเจาะจงและการสนับสนุนโลหิตในวัฒนธรรม Dexter

คุณสมบัติของเซลล์ต้นกำเนิดที่คละคลุ้ง

ในปีที่ผ่านมาพบว่าในวัฒนธรรมนิ่งของไขกระดูก mesenchymal เซลล์หลายด้านรากเหง้านำเสนอประชากร จำกัด ของเซลล์ agranular ขนาดเล็ก (RS-1) เซลล์ที่โดดเด่นด้วยความสามารถต่ำของการล่าอาณานิคมและการขาดการ Ki-67 แสดงออกแอนติเจนที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ proliferating เซลล์ พารามิเตอร์แอนติเจน dormantnyh RS-1 เซลล์จะแตกต่างจากสเปกตรัมของแอนติเจนมุ่งมั่นอย่างรวดเร็ว proliferating เซลล์ stromal รากเหง้า พบว่ามีอัตราการแพร่ขยายสูงของเซลล์ต้นกำเนิดที่ได้รับการยอมรับเพียงอย่างเดียวเมื่อมีเซลล์ RS-1 ในทางกลับกัน RS-1 เซลล์เพิ่มอัตราการเจริญเติบโตภายใต้อิทธิพลของปัจจัยที่หลั่งมาจากที่สุดผู้ใหญ่มาหลายด้าน mesenchymal เซลล์ต้นกำเนิด ดูเหมือนว่า RS-1-cell เป็น subclass ของ MSC ที่ไม่มีการผูกขาดซึ่งสามารถรีไซเคิลได้ ในทนต่อ 5-fluorouracil เซลล์ stromal รากเหง้าของไขกระดูกโดดเด่นด้วยเนื้อหา RNA ต่ำและระดับสูงของการแสดงออกของยีน decarboxylase ornithine หลอดทดลอง - เครื่องหมายไม่ใช่ proliferating เซลล์

การสืบพันธุ์ของเซลล์ต้นกำเนิด stromal จะเริ่มขึ้นหลังจากการตรึงบนพื้นผิว เมื่อเป็นเช่นนี้รายละเอียดจะแสดงเครื่องหมายของเซลล์ที่แตกต่างกันได้ไม่ดี: SH2 (TGF- รับ (3), SH3 (โดเมนสัญญาณโปรตีน) ประเภทคอลลาเจน I และ III, fibronectin ยึดเกาะที่รับ VCAM-1 (CD106) และ ICAM (CD54) cadherin-11 , CD44, CD71 (transferrin รับ) CD90, CD120a และ CD124 แต่ไม่มีการแสดงออกของตัวบ่งชี้ลักษณะของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด (CD34, CD14, CD45). การเจริญเติบโต Clonal ช่วย passaged ซ้ำ ๆ เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal การผลิตวัฒนธรรมของหลายเนื้อเดียวกันพันธุกรรม pluripotent stromal รากเหง้า เซลล์. Cerea 2-3 เนื้อเรื่องของจำนวนของพวกเขาถึง 50-300000000. ในวัฒนธรรมของความหนาแน่นเพียงพอหลังจากหยุดการแพร่กระจายของเซลล์ stromal รากเหง้าซึ่งแตกต่างจากเซลล์เนื้อเยื่อเม็ดเลือดแตกต่างใน adipocytes, myocytes เซลล์กระดูกอ่อนและเนื้อเยื่อกระดูก. การรวมกันของสัญญาณการกำกับดูแลที่สามความแตกต่าง ประกอบไปด้วย 1-methyl-izobutilksantin (inducer ของการก่อ intracellular ค่าย) dexamethasone (ยับยั้งของ phospholipase และ C) และ indomethacin (ยับยั้ง cyclooxygenase, thromboxane ลดกิจกรรมและ) ปรากฎใน adipocytes ถึง 95% ของเซลล์ต้นกำเนิดของต้นกำเนิด ก่อ adipocyte จากเซลล์ stromal อ่อนได้รับการยืนยันการแสดงออกของยีนไลโปโปรตีนไลเปส, บัตรประจำตัวของฮีสโตเคมีอะและผู้รับ peroxysomal เซลล์ของโคลนเดียวกันอิทธิพลจาก TGF-B ในสื่อฟรีเซรั่มสร้างประชากรที่เป็นเนื้อเดียวกันของ chondrocyte วัฒนธรรมเซลล์หลายชั้นของกระดูกอ่อน extracellular เมทริกซ์เป็นลักษณะการพัฒนาประกอบด้วย proteoglycan และคอลลาเจนชนิดที่สอง สื่อสารอาหารที่มี 10% ซีรั่มของทารกในครรภ์สัญญาณผลแตกต่างที่ซับซ้อนประกอบด้วย B-glycerophosphate (บริจาคนินทรีย์ฟอสเฟต), วิตามินซีและ dexamethasone ในเซลล์ต้นกำเนิดวัฒนธรรม stromal รากเหง้าเดียวกันจะนำไปสู่การก่อตัวของมวลเซลล์ ในเซลล์ดังกล่าวมีการเพิ่มขึ้นของความก้าวหน้าในการทำงานของอัลคาไลน์ฟอสฟาและทินระดับแสดงให้เห็นการก่อตัวของกระดูกที่เซลล์ได้รับการยืนยันการเพิ่มขึ้นของความก้าวหน้าในแคลเซียมภายในเซลล์

ตามที่บางความสามารถของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal จะแบ่งไปเรื่อย ๆ และการทำสำเนาของประเภทต่างๆของเซลล์เชื้อสาย mesenchymal รวมกับระดับสูงของการปั้น เมื่อผู้เข้าโพรงหรือเซลล์ต้นกำเนิดเรื่อง mesenchymal ขาวอพยพเข้าเนื้อเยื่อของเนื้อเยื่อประสาทและความแตกต่างในเส้นประสาทหรือ glial มาสายพันธุ์ของเซลล์ นอกจากนี้ยังมีข้อมูลเกี่ยวกับ MSC transdifferentiation ในเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดทั้งในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลอง การวิเคราะห์ในเชิงลึกมากขึ้นในการศึกษาบางส่วนกำหนดความเหนียวสูงล้ำของ MSCs ซึ่งเป็นที่ประจักษ์ในความสามารถของพวกเขาเพื่อความแตกต่างใน astrocytes, oligodendrocytes เซลล์, cardiomyocytes เซลล์กล้ามเนื้อเรียบและเซลล์กล้ามเนื้อโครงร่าง ในจำนวนของการศึกษา transdifferentsirovochnogo ศักยภาพของ MSCs ในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลองพบว่าหลายด้านเซลล์ mesenchymal สารตั้งต้นของกระดูกต้นกำเนิดไขกระดูกสุดท้ายความแตกต่างในเซลล์ที่เป็นกระดูกกระดูกอ่อนกล้ามเนื้อเส้นประสาทและเนื้อเยื่อไขมันเช่นเดียวกับเส้นเอ็นและ stroma ที่สนับสนุนโลหิต .

อย่างไรก็ตามในการศึกษาอื่น ๆ สัญญาณของจีโนมข้อ จำกัด pluripotency ของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal และไม่มีการไม่สามารถตรวจพบประชากรเซลล์ stromal รากเหง้า แต่การตรวจสอบเซลล์ pluripotent stromal ไปได้ถูกตรวจสอบมากกว่า 200 โคลน MSC ที่แยกได้จากวัฒนธรรมหลัก ส่วนใหญ่ในหลอดทดลองโคลนสะสมความสามารถในการแยกความแตกต่างเข้าสู่เซลล์กระดูก, chondrogenic และทิศทาง adipogenic หากไม่รวมความน่าจะเป็นของการย้ายถิ่นของเซลล์ผู้รับโดยการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ภายใต้แคปซูลไตหรือในห้องแพร่ปรากฏว่าเซลล์ stromal รากเหง้าในแหล่งกำเนิดรักษาฟีโนไทป์ที่แตกต่างกันซึ่งระบุถึงตัวตนของโซนปลูกปัจจัยข้อ จำกัด หรือไม่มี MSCs pluripotent เพียงอย่างเดียว ในขณะเดียวกันได้รับอนุญาตการดำรงอยู่ของชนิดที่หายากของเซลล์ต้นกำเนิด pluripotent ร่างกายซึ่งเป็นสารตั้งต้นที่พบบ่อยของเซลล์ต้นกำเนิดผู้ใหญ่

เมื่อวันที่หลาย แต่ไม่เป็นความจริงเซลล์ต้นกำเนิด pluripotent mesenchymal ถือว่าเป็นส่วนที่เล็กมากของเซลล์ไขกระดูกและมีความสามารถในบางกรณีเมื่อเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองแพร่หลายโดยไม่ต้องเข้ามาในความแตกต่างเป็นหลักฐานด้วยความมุ่งมั่นของพวกเขาเชื้อสายเหนี่ยวนำของเซลล์ในกระดูกกระดูกอ่อนไขมันเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อ เช่นเดียวกับใน tenocytes และองค์ประกอบ stromal สนับสนุน hematopoiesis โดยปกติแล้วการสัมผัสอย่างต่อเนื่องในระดับปานกลางวัฒนธรรมกับซีรั่มของทารกในครรภ์ลูกวัวกระตุ้นให้เกิดผลลัพธ์ใน MSCs stromal ของเซลล์ต้นกำเนิดความมุ่งมั่นที่ลูกหลานซึ่งผ่านความแตกต่างที่เกิดขึ้นเองเป็นครั้งสุดท้าย ในหลอดทดลองที่เป็นไปได้เพื่อให้บรรลุการสร้างกระดูกทิศทางโดยการเพิ่มเครื่อง dexamethasone กลาง SS-glycerophosphate และวิตามินซีในขณะที่การรวมกันของความแตกต่างของสัญญาณ dexamethasone อินซูลินและก่อให้เกิดการก่อตัวของ adipocytes

ยอมรับว่าก่อนที่จะเข้าสู่ขั้นตอนของความแตกต่างขั้ว MSCs ไขกระดูกในการสร้างเงื่อนไขวัฒนธรรมบางอย่างแรกความแตกต่างเข้าสู่เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal fibroblast เหมือน สัญญาซื้อขายล่วงหน้าของเซลล์เหล่านี้ในร่างกายมีส่วนร่วมในการก่อตัวของกระดูกอ่อนเอ็นไขมันและเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อเช่นเดียวกับการสนับสนุน stromal โลหิต เขียนหลายคนเข้าใจคำว่า "เซลล์ต้นกำเนิดหลายด้าน mesenchymal" เป็นจริง MSCs และมุ่งมั่นที่เซลล์ stromal รากเหง้าและกระดูกเนื้อเยื่อ mesenchymal วิเคราะห์ clonal ของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal หลายด้านของแหล่งกำเนิดไขกระดูกพบว่าน้อยกว่าหนึ่งในสามของโคลนแตกต่างใน osteo-, hondro- และ adipocytes ขณะที่เซลล์โคลนนิ่งเซลล์กระดูกอื่น ๆ ที่มีศักยภาพและรูปแบบเท่านั้น hondro- และ osteocytes โคลนนี้หลายด้านเซลล์ mesenchymal สารตั้งต้นเป็นห่วงอนามัย-9 ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมจุลภาคแตกต่างเข้าสู่เซลล์ที่มีฟีโนไทป์และลักษณะการทำงานไม่เพียง แต่ของเซลล์สร้างกระดูก, chondrocytes และ potsitov adic แต่เซลล์ stromal ที่สนับสนุนโลหิต ที่แยกได้จากเซลล์ไขกระดูกของหนูทารกในครรภ์โคลน RCJ3.1 แตกต่างเซลล์ mesenchymal ของ phenotypes ที่แตกต่างกัน โดยการดำเนินการรวมกันของวิตามินซี, B-glycerophosphate และ dexamethasone จากองค์ประกอบของเซลล์โคลนนี้จะเกิดขึ้นเป็นครั้งแรก myocytes multinucleated แล้วเนื่อง adipocytes, chondrocytes และเกาะเล็กเกาะน้อยกระดูก mineralized ประชากรของเซลล์เม็ดจากเชิงกรานของตัวอ่อนหนูสอดคล้องกับข้อผูกมัดหลายด้านเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal เป็นที่โดดเด่นด้วยอัตราที่ต่ำของการแพร่กระจายไม่แสดงเครื่องหมายของความแตกต่างและความแตกต่างในสภาพวัฒนธรรมในรูปแบบ hondro-, osteo- และ adipocytes และเซลล์กล้ามเนื้อเรียบ

ดังนั้นจึงควรได้รับการยอมรับว่าคำถามของ plyuri- หรือ multipotency จีโนมของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ยังคงเปิดอยู่ซึ่งส่งผลให้มีผลกระทบต่อการนำเสนอศักยภาพความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิด stromal ซึ่งยังไม่ได้ติดตั้งอย่างสมบูรณ์

ลักษณะสำคัญที่พิสูจน์ได้จากการทดลองและความสำคัญของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มสมองคือความสามารถในการปล่อยเนื้อเยื่อเนื้อเยื่อและหมุนเวียนไปในกระแสเลือดทั่วไป ในการเปิดใช้งานโปรแกรมพันธุกรรมของความแตกต่างเซลล์ต้นกำเนิดหมุนเวียนดังกล่าวควรตกอยู่ในสภาพแวดล้อมที่เหมาะสม มันแสดงให้เห็นว่าเมื่อยาโดยการฉีดไปยังกระแสเลือด MSCs สัตว์ผู้รับอ่อนเซลล์ฝังอยู่ในอวัยวะต่างๆและเนื้อเยื่อที่แตกต่างกันแล้วเป็นเซลล์เม็ดเลือด myocytes, adipocytes, chondrocytes และรบรา ดังนั้นในโซนเนื้อเยื่อท้องถิ่นมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างสัญญาณระหว่างเซลล์ต้นกำเนิด stromal ที่ไม่ได้เครดิตและมีความมุ่งมั่นและยังอยู่ระหว่างพวกเขาและเซลล์ที่อยู่รอบตัว สันนิษฐานว่าเป็นความแตกต่างของการเหนี่ยวนำจะดำเนินปัจจัย paracrine กฎระเบียบของการกำเนิด mesenchymal และ nemezenhimalnogo (ปัจจัยการเจริญเติบโต, eicosanoids โมเลกุล extracellular เมทริกซ์) ที่ให้ความสัมพันธ์ของพื้นที่และเวลาในจุลภาคของบรรพบุรุษ mesenchymal multipotential ดังนั้นความเสียหายของเนื้อเยื่อท้องถิ่น mesenchymal จะนำไปสู่การก่อตัวของโซนจุลภาคเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลหลายด้านที่แตกต่างกันในเชิงคุณภาพจากสัญญาณกฎระเบียบที่ซับซ้อนเนื้อเยื่อเหมือนเดิมซึ่งในกระบวนการทางสรีรวิทยาที่เกิดขึ้นแทนการฟื้นฟูซ่อมแซม ความแตกต่างนี้มีความสำคัญอย่างมากในแง่ของความชำนาญเฉพาะของเซลล์ต้นกำเนิดในสภาวะแวดล้อมที่เป็นปกติและความเสียหายที่เกิดขึ้น

ตามความคิดนี่คือกลไกของความแตกต่างพื้นฐานของกระบวนการที่รู้จักกันสองอย่างคือการฟื้นฟูสมรรถภาพทางสรีรวิทยาและการขยายตัวของการอักเสบ (inflammatory proliferation) ครั้งแรกของพวกเขาจบลงด้วยการบูรณะเซลล์เนื้อเยื่อเฉพาะและการทำงานของมันในขณะที่ผลของการขยายตัวคือการก่อตัวขององค์ประกอบเนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่เป็นผู้ใหญ่และการสูญเสียการทำงานของเนื้อเยื่อที่เสียหายโซน ดังนั้นสำหรับการพัฒนาโปรแกรมที่ดีที่สุดสำหรับการใช้เซลล์ต้นกำเนิดของ multiple mentenchional ในยาปฏิรูปพลาสติกการศึกษาอย่างรอบคอบเกี่ยวกับลักษณะของอิทธิพลของปัจจัยทางสภาพแวดล้อมในการสร้างความแตกต่างของ MSCs เป็นสิ่งจำเป็น

การพึ่งพาโครงสร้างของช่องเซลล์ต้นกำเนิดในเซลล์ประสาทและสารควบคุม autocrine การแสดงออกของสิ่งนี้ถูกปรับโดยสัญญาณภายนอกไม่มีใครสงสัย ในส่วนของหน้าที่ของปัจจัยด้านกฎระเบียบที่สำคัญที่สุดคือการควบคุมการแบ่งส่วนของ MSCs ที่ไม่สมมาตรและการแสดงออกของยีนที่กำหนดขั้นตอนของ commision และจำนวนหน่วยของเซลล์ สัญญาณภายนอกที่มีการพัฒนา MSC ขึ้นอยู่กับสภาพแวดล้อมของพวกเขา ใน MSCs อ่อนงอกเวลานานพอสมควรขณะที่การรักษาความสามารถในการแยกความแตกต่างในสาย adipocytes, myofibroblasts เนื้อเยื่อ stromal hematogenous เซลล์กระดูกอ่อนและกระดูก นอกจากนี้ยังพบว่าประชากรที่ จำกัด ของการไหลเวียนขององค์ประกอบของเซลล์ stromal SB34-เชิงลบจากการไหลเวียนทั่วไปจะถูกส่งกลับไปยังเนื้อเยื่อ stroma ไขกระดูกที่จะเปลี่ยนเป็นสายที่ CD34 บวกเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด ข้อสังเกตเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าเซลล์ mesenchymal หมุนเวียนรากเหง้าในกระแสเลือดของเนื้อเยื่อให้การสนับสนุนเพื่อความสมดุลของเซลล์ต้นกำเนิด stromal ในอวัยวะที่แตกต่างกันโดยการระดมสระว่ายน้ำร่วมกันของกระดูกอ่อนเซลล์ไขกระดูก stromal ความแตกต่างของ MSCs เข้าไปในเซลล์ที่มี phenotypes หลาย mesenchymal และมีส่วนร่วมในการซ่อมแซมหรือการงอกของกระดูกกระดูกอ่อนเส้นเอ็นและเนื้อเยื่อไขมันในร่างกายโดยแสดงให้เห็นถึงรูปแบบการถ่ายโอนบุญธรรมในสัตว์ทดลอง ตามที่ผู้เขียนอื่น ๆ การย้ายถิ่นที่ห่างไกลจากเตียงหลอดเลือด MSCs จะถูกรวมกับรางท้องถิ่นหรือ korotkodistantnym เซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลหลายด้านภายในเนื้อเยื่อกระดูกอ่อนที่ซ่อมแซมฟื้นฟูกล้ามเนื้อและลดปฏิกิริยาอื่น ๆ

ขอสงวนท้องถิ่นลำต้นฐานรากเนื้อเยื่อ stromal เล่นแหล่งบทบาทของเซลล์ในทางสรีรวิทยากระบวนการสร้างเนื้อเยื่อและได้รับการเติมเต็มด้วย MSCs ขนส่งที่ห่างไกลในฐานะแหล่งต้นกำเนิดจากการใช้จ่ายของเนื้อเยื่อ stromal อย่างไรก็ตามในความต้องการของการระดมฉุกเฉินของความจุซ่อมแซมโทรศัพท์มือถือเช่นการบาดเจ็บหลายในกระบวนการของการฟื้นฟูซ่อมแซมส่วนร่วม MSCs ทั้งรถไฟและปริมณฑลผ่านกระแสเลือดได้รับคัดเลือกเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลของไขกระดูก

การปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อชั้นกลาง

มีความคล้ายคลึงกันบางอย่างระหว่างกระบวนการฟื้นฟูสภาพร่างกายของเนื้อเยื่อและการก่อตัวของมันในช่วงระยะเวลาของการพัฒนามดลูก เอมบริโอของมนุษย์และสัตว์เลี้ยงลูกด้วยการก่อตัวของประเภทต่างๆของเซลล์พิเศษที่ได้มาจาก ecto, Meso และสระว่ายน้ำชั้น endodermal จมูก แต่ด้วยการมีส่วนร่วมบังคับของ mesenchyme เครือข่ายเซลลูล่าร์ที่หลวม ๆ ของเนื้อเยื่อ mesenchymal ตัวอ่อนมีหน้าที่ในการควบคุมการเผาผลาญโครงร่างและ morphogenetic จำนวนมาก Bookmark ร่างกายเฉพาะกาลจะดำเนินการเฉพาะหลังจากที่ mesenchyme ควบแน่นที่ค่าใช้จ่ายของการเจริญเติบโตของเซลล์ต้นกำเนิด clonogenic ที่สร้างหลัก morphogenetic สัญญาณอวัยวะ stromal มา mesenchyme ตัวอ่อนสร้างนั่งร้านร่างกายเฉพาะกาลและเป็นพื้นฐานของอนาคต energoplasticheskogo ให้แน่ใจเนื่องจากการเจริญเติบโตของเส้นเลือดหลักและเรือน้ำเหลือง กล่าวอีกนัยหนึ่งองค์ประกอบ stromal ของหน่วย microcirculatory ของอวัยวะทารกในครรภ์ปรากฏก่อนการก่อตัวของโครงสร้างของพวกเขาหน่วยงาน นอกจากนี้การย้ายถิ่นที่ใช้งานของเซลล์ mesenchymal ระหว่างอวัยวะให้อวกาศปฐมนิเทศการพัฒนาอวัยวะเนื่องจากการทำเครื่องหมายขอบเขตของพวกเขาโดยปริมาตร จำกัด homeotic Hox-tepov บนโครงนั่งร้านนอกจากนี้ยังมีการชุมนุมของโครงสร้างและหน้าที่หน่วยงานของอวัยวะในเส้นประสาทซึ่งมักจะมี morphogenetically และหน้าที่แตกต่างกันอย่างสมบูรณ์เซลล์ ดังนั้นใน embryogenesis mesenchyme มีฟังก์ชั่นหลักและดำเนินการโดยการสร้างสัญญาณการกำกับดูแลการเปิดใช้งานงอกต้นกำเนิดในระดับภูมิภาคและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เยื่อบุผิว เซลล์เยื่อบุตัวอ่อนสร้างปัจจัยการเจริญเติบโตเช่น LEG, HGF-b, CSF ซึ่งเซลล์ต้นกำเนิดของ parenchymal มีตัวรับที่สอดคล้องกัน ในเนื้อเยื่อผู้ใหญ่ผู้ใหญ่ของเซลล์ผู้ใหญ่เครือข่ายเซลล์ stromal ยังสร้างสัญญาณเพื่อรักษาความมีชีวิตและการขยายตัวของเซลล์ต้นกำเนิดของแหล่งที่มา non - mezenchymal อย่างไรก็ตามสเปกตรัม stromal สัญญาณกำกับดูแลในหลังคลอด ontogenesis อื่น ๆ (SCF, HGF, IL-6, IL-1, IL-8, IL-11, IL-12, IL-14, IL-15, GM-CSF, flt-3, LIF, ฯลฯ ) และมีจุดมุ่งหมายเพื่อให้การฟื้นฟูทางสรีรวิทยาหรือการซ่อมแซมบริเวณเนื้อเยื่อที่เสียหาย นอกจากนี้ลักษณะสเปกตรัมของปัจจัยด้านกฎระเบียบข้อต่อในเนื้อเยื่อแต่ละชนิดและแม้แต่ในอวัยวะเดียวกันต่างกัน โดยเฉพาะอย่างยิ่งโลหิตและ lymphopoiesis กับการคูณและความแตกต่างของเม็ดเลือดและ immunocompetent เซลล์เกิดขึ้นเฉพาะในบางอวัยวะภายในซึ่งทำหน้าที่ stromal จุลภาคให้เงื่อนไขสำหรับการเจริญเติบโตของเม็ดเลือดและต่อมน้ำเหลืองเซลล์ มันขึ้นอยู่กับปัจจัยการกำกับดูแลจุลภาคขึ้นอยู่กับความสามารถในการสร้างเลือดและน้ำเหลืองเซลล์ repopulate ร่างกายที่จะขยายและเติบโตเป็นซอกจุลภาคของมัน

ในบรรดาองค์ประกอบของ extracellular เมทริกซ์ซึ่งผลิตเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลหลายด้านก็ควรจะตั้งข้อสังเกต fibronectin, laminin, คอลลาเจนและ proteoglycans เช่นเดียวกับ CD44 (hyaluronan และรับทิน) ได้รับส่วนหลักในองค์กรของปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์และการก่อตัวของ extracellular เมทริกซ์ในไขกระดูกและกระดูก . มันเป็นเรื่องที่พิสูจน์ให้เห็นว่าไขกระดูก mesenchymal เซลล์หลายด้านสร้างจุลภาค stromal redshestvenniki, ให้อุปนัยและกฎระเบียบที่สัญญาณไม่เพียง แต่ MSC แต่ยังยุ่งเกี่ยวเม็ดเลือดและกระดูก nemezenhimalnye เซลล์ต้นกำเนิดไขกระดูก เป็นที่ทราบกันว่ามีส่วนร่วมใน MSCs โลหิตวัดจากความสามารถในการแยกความแตกต่างเข้าสู่เซลล์ stromal ที่สนับสนุนโลหิตประเด็นสัญญาณ MSK คำแนะนำการใช้งานที่ได้รับโดยตรงจากเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด นั่นคือเหตุผลที่วัฒนธรรมของเซลล์ต้นกำเนิดเครือข่าย stromal เป็นพื้นฐานสำหรับการให้อาหารของโคลนทั้งหมดของเซลล์เม็ดเลือดที่

ในความเข้มของชีวิตผู้ใหญ่ของการฟอกเลือดและ lymphopoiesis ในสถานะของความสมดุลแบบไดนามิกกับ "ค่าใช้จ่าย" ของเซลล์เม็ดเลือดผู้ใหญ่และเซลล์ระบบภูมิคุ้มกันในรอบนอก เนื่องจากเซลล์ไขกระดูก stromal และอวัยวะน้ำเหลืองการปรับปรุงไม่ค่อยโครงสร้างการปรับโครงสร้างอย่างมีนัยสำคัญ stromal ไม่ได้เกิดขึ้นในพวกเขา นำระบบสมดุลแบบไดนามิกเป็นไปได้ด้วยความช่วยเหลือของความเสียหายทางกลไปยังอวัยวะใด ๆ Hemo หรือ lymphopoiesis ซึ่งนำไปสู่ชนิดเดียวกันของการเปลี่ยนแปลงลำดับที่ส่งผลกระทบไม่เพียง แต่ไม่มากของเม็ดเลือดหรือต่อมน้ำเหลืองเซลล์เป็นโครงสร้าง stromal เสียหายอวัยวะ ในขั้นตอนของการฟื้นฟูกรอบ stromal ซ่อมแซมที่เกิดขึ้นส่วนใหญ่ที่แล้ว repopulating เม็ดเลือดหรือเซลล์ภูมิคุ้มกัน นี้ความเป็นจริงที่รู้จักกันมานานทำให้การฟื้นฟูหลังถูกทารุณกรรมรูปแบบที่สะดวกสำหรับการศึกษาจุลภาค stromal ของอวัยวะสร้างเลือด โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการตรวจสอบของการฟื้นฟูซ่อมแซมของไขกระดูกจะใช้กลล้างโพรงไขกระดูกของกระดูกยาว - ขูดมดลูกช่วยให้การได้อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพนำเนื้อเยื่อเม็ดเลือดจากรัฐสมดุลแบบไดนามิก เมื่อศึกษากระบวนการของการฟื้นฟูซ่อมแซมของเม็ดเลือดและกระดูก stromal ส่วนประกอบไขกระดูกหลังจากล้างกลของช่อง medullar ของหนูตะเภาแข้งพบว่าระหว่างตัวชี้วัดการงอกของเม็ดเลือดและ stromal เซลล์ (จำนวนของเซลล์เม็ดเลือดความเข้มข้นและปริมาณของเซลล์ stromal บังเกิดเกล้า) ไม่มีความสัมพันธ์โดยตรง นอกจากนี้ยังพบว่าการเพิ่มขึ้นของประชากรของเซลล์ต้นกำเนิด stromal ที่เกิดขึ้นในวันที่ก่อนหน้าหลังจากขูดมดลูกและตัวเองรบรา stromal มี fosfatazopolozhitelnymi ซึ่งเป็นลักษณะของเนื้อเยื่อเซลล์กระดูก มันก็ยังเป็นที่ยอมรับว่ากระดูกยาวขูด 3-5 นำไปสู่การเจริญเติบโตของประชากรเซลล์ในไขกระดูกและกระดูกที่ไม่ดำเนินการแม้จะอยู่ในม้ามซึ่งในหนูตะเภาเป็นเพียงร่างกาย lymphopoietic

กระบวนการภาพซ่อมแซมทางสัณฐานวิทยาในไขกระดูก kyuretirovannyh แข้งหนูตะเภาโดยทั่วไปสอดคล้องกับข้อมูลจากเอกสารที่ได้รับในการทดลองในสัตว์สายพันธุ์อื่น ๆ พลวัตของการเปลี่ยนแปลงที่เกิดขึ้นหลังจากการกำจัดของเนื้อเยื่อเม็ดเลือดจะเหมือนกันสำหรับทุกสายพันธุ์และความแตกต่างเพียงความกังวลพารามิเตอร์เวลา . Morphologically ขั้นตอนขั้นตอนสำหรับการเรียกคืนโลหิตในช่องไขสันหลังหมดในกระบวนการต่อเนื่องจัดเลือดก่อตัวก้อนกระดูกเส้นใยหยาบสลายของของไซน์และ stroma ก่อตาข่ายซึ่งต่อไป repopulating องค์ประกอบเม็ดเลือด จำนวนของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดในไขกระดูกการเพิ่มขึ้นของกระบวนการสร้างเนื้อเยื่อในการเพิ่มขึ้นขนานในเนื้อหาของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด

Gerasimov Yu et al, (2001) เมื่อเทียบกับการเปลี่ยนแปลงในจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดและปริมาณของสารตั้งต้นของเซลล์ stromal ในแต่ละขั้นตอนของกระบวนการฟื้นฟู นอกจากนี้ยังพบว่าการเปลี่ยนแปลงเชิงปริมาณในเซลล์ไขกระดูกใน kyuretirovannoy กระดูกตรงกับการเปลี่ยนแปลงของลักษณะทางสัณฐานวิทยาฟื้นฟู ลดในช่วงสามวันแรกของเนื้อหาเซลล์ในผู้เขียนงอกใหม่แอตทริบิวต์สูญเสียของเซลล์เม็ดเลือดเนื่องจากผลกระทบของจุลภาคซึ่งจะสร้างเนื้อเยื่อตาข่ายเติบโตในไขกระดูกที่เหลืออยู่ใน epiphysis และในสมัยในรูปแบบ osteoid จุดโฟกัสและความเสียหายหลอดเลือดด้วยการขูดมดลูก วันที่ 7-12 เพิ่มเซลล์ yaderosoderzhaschih เกิดขึ้นพร้อมกับการปรากฏตัวของจุดโฟกัสของแต่ละบุคคลในเม็ดเลือดเซลล์เม็ดเลือด stromal โซนการขยาย ในวันที่ 20 มีส่วนสำคัญของไขกระดูกสร้างใหม่และรูจมูกพัฒนาดีซึ่งจะมาพร้อมกับการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในจำนวนเซลล์ทั้งหมด อย่างไรก็ตามจำนวนเม็ดเลือดในช่วงนี้เป็น 68% ของระดับการควบคุม ซึ่งสอดคล้องกับข้อมูลที่เผยแพร่ก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าจำนวนของเซลล์สร้างเลือดหลังจากขูดมดลูกถึงมาตรฐานเพียง 35-40 วันหลังจากการดำเนินการ

ในช่วงต้นโพสต์บาดแผลที่เป็นแหล่งเซลล์หลักสำหรับการฟื้นฟู hemopoiesis คือองค์ประกอบของเซลล์ที่เก็บรักษาไว้ในการขูดมดลูก ในระยะเวลาต่อมาแหล่งที่มาหลักของการงอกใหม่ของเนื้อเยื่อโลหิตเป็นไขกระดูกคือเซลล์ต้นกำเนิด repopulating โซน stromal ฟรี สำหรับบางประเภทของเซลล์ stromal (endothelial, reticular และ osteogenic), แหล่งที่มาของการก่อตัวของพวกเขาในระหว่างการบูรณะโพรงมดลูกยังคงไม่สามารถอธิบายได้ ผลของ Yu.V. Gerasimov และผู้ร่วมเขียน (2001) เป็นพยานว่าในไขกระดูกที่เก็บรักษาไว้หลังจากขูดมดลูกความเข้มข้นของเซลล์ที่สร้างโคโลนีพังผืดจะสูงกว่าในไขกระดูกตามปกติอย่างมีนัยสำคัญ ผู้เขียนเชื่อว่าด้วยการขูดมดลูกเป็นชะเลือกที่รุนแรงมากขึ้นของเซลล์เม็ดเลือดเมื่อเทียบกับอดีตอาณานิคม stromal เซลล์ที่มีส่วนร่วมในการก่อตัวของ stroma และเชื่อมต่อกับสารพื้นฐานกว่าเซลล์เม็ดเลือดมั่นคงขึ้น

พลวัตของการเปลี่ยนแปลงในจำนวนของเซลล์การสร้างอาณานิคมรบรามีความสัมพันธ์กับความรุนแรงของ osteogenesis การประมวลผลที่ตามมาสลายกระดูก trabecular และการก่อตาข่าย stroma ซึ่งเติมเซลล์เม็ดเลือด เซลล์ต้นกำเนิดของ stromal ส่วนใหญ่จะเป็นเนื้อเยื่อกระดูกหยาบและเนื้อเยื่อตาหมี่ในช่วงเวลาที่เกิดใหม่ สำหรับการหักของกระดูกต้นขาในเงื่อนไขของการ osteosynthesis เป็นเวลานานในวันที่ 5 ในโซนการฟื้นฟูเพิ่มความเข้มข้นของเซลล์และจำนวนของอาณานิคมรูปรบราและการสร้างกระดูกในเข้มข้นจำนวนของพวกเขาจะเพิ่มขึ้น 6 ครั้ง เป็นที่ทราบกันดีว่าเซลล์ของกระดูกที่อยู่ในโคโลนีพังผืดเป็นตัวยับยั้งการเสื่อมของกระดูก จำนวนเซลล์ต้นกำเนิดของ stromal เพิ่มขึ้นก่อนการล่าอาณานิคมของพื้นที่ของไขสันหลังรูร้าโดยเซลล์เม็ดเลือด ข้อตกลงนี้เป็นข้อตกลงที่ดีกับหลักฐานที่แสดงว่าเซลล์ stromal สร้างการสร้างสภาพแวดล้อมของเม็ดเลือดขาว เห็นได้ชัดว่าการสร้างเม็ดเลือดจุลภาคสอดคล้องกับระดับหนึ่งของการฟื้นฟูของเนื้อเยื่อ stromal และเพิ่มจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดเมื่อ stromal ขยายตัวสะพานเหมาะสำหรับโลหิต

ข้อมูลที่น่าสนใจที่สุดคือข้อมูลของผู้เขียนว่าทันทีหลังจากที่ขูดรีดจำนวนเซลล์ต้นกำเนิด stromal ในส่วนที่ห่างไกลของโครงกระดูกเพิ่มขึ้น เริ่มต้นจากเวลาเที่ยงและโดยรวมวันที่ยี่สิบของแข้ง contralateral เป็นที่สังเกตในมากกว่าสองเท่าเพิ่มขึ้นในระดับความเข้มข้นและจำนวนของเซลล์อดีตอาณานิคมของเซลล์ กลไกของปรากฏการณ์นี้อาจจะมีการเชื่อมต่อกับความจริงที่ได้รับบาดเจ็บกระดูกขนาดใหญ่ที่เกิดขึ้นในการก่อตัวของจำนวนมากของเลือดอุดตันในขณะเดียวกันการทำลายจำนวนมากของเกล็ดเลือดและปล่อยเข้าสู่เลือดของเกล็ดเลือดที่ได้มาจากปัจจัยการเจริญเติบโต (RBSK) ซึ่งเป็นที่รู้จักกันจะทำให้เกิดการแพร่กระจายของเซลล์การสร้างอาณานิคม fibroblasts ที่อยู่ในร่างกายอยู่นอกสระว่ายน้ำ proliferative ในการทดลองในกระต่ายปกครองส่วนท้องถิ่น MSCs ส่งเสริมการฟื้นฟูความเสียหายของกระดูกอ่อนของข้อเข่าผ่าตัดซึ่งสามารถเชื่อมโยงกับการก่อตัวของ chondrocytes มาจาก MSCs แนะนำ อย่างไรก็ตามการฟื้นฟูกระดูกข้อบกพร่องในหนูในห้องทดลองมีผลดีขึ้นโดยการใช้เซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อชั้นในที่ห่อหุ้มไว้ในกรอบเซรามิค ดังนั้นเราจึงสามารถสรุปได้ว่าถ้าคุณทำไม่ RBOK แล้วปัจจัยอื่น ๆ ที่ได้มาจากเซลล์ stromal ความเสียหายมีผลต่อการกระตุ้นที่ห่างไกลในการแพร่กระจายของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ในพื้นที่เหมือนเดิมของไขกระดูกและกระตุ้นการอพยพเข้ามาในพื้นที่ของเนื้อเยื่อไขกระดูกข้อบกพร่อง ในทางกลับตรงกันข้ามนี้ข้อมูลวรรณกรรมของปีก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ stromal มีความรับผิดชอบในจุลภาคซึ่งแตกต่างจากเซลล์เม็ดเลือดไม่สามารถที่จะโยกย้ายและมาจากแหล่งท้องถิ่น

อย่างไรก็ตามผลของการศึกษา Gerasimov Yu et al, (2001) ชี้ให้เห็นว่าแอพลิเคชันของการบาดเจ็บกลสาเหตุไม่ได้เป็นเพียงการปรับโครงสร้างความคมชัดของเนื้อเยื่อ stromal ในกระดูก kyuretirovannoy แต่ยังมีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในกระดูกระยะไกล stroma เหมือนเดิมนั่นคือมีการตอบสนองของระบบ เนื้อเยื่อชั้นในสำหรับการบาดเจ็บในท้องถิ่น และเมื่อนำมาใช้ polytrauma - หลายขูดมดลูก - ปฏิกิริยานี้จะขยายและสังเกตไม่เพียง แต่ในการดำเนินการของกระดูกและชิ้นส่วนที่ห่างไกลของโครงกระดูก แต่ยังอยู่ในอวัยวะน้ำเหลืองโดยเฉพาะอย่างยิ่งม้าม กลไกของการตอบสนองอย่างฉับพลันของกระดูกเนื้อเยื่อกระดูกและม้ามต่อการบาดเจ็บในท้องถิ่นและ polytrauma ยังไม่ทราบ สันนิษฐานว่ากระบวนการนี้เกี่ยวข้องกับผลกระทบของปัจจัย humoral ที่ปล่อยออกมาจาก stroma mesenchymal ของช่องไขสันหลังูของไขกระดูก ความเป็นไปได้ของการทำเซลล์ stromal ไขกระดูกและม้าม organonespetsificheskogo ปัจจัยร่างกายรับผิดชอบในการเพิ่มจำนวนเซลล์, อดีตอาณานิคมรบราบ่งบอกถึงข้อมูลเกี่ยวกับอาณานิคมกระตุ้นกิจกรรมของพวกเขาใน monolayer วัฒนธรรมของไขกระดูก

ในเรื่องนี้ก็เป็นที่น่าสังเกตว่าเมื่อผู้หลายด้านระบบเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคล repopulating อนุพันธ์ของพวกเขาไม่เพียง แต่ไขกระดูก แต่ยังเนื้อเยื่ออื่น ๆ ที่ถูกนำมาใช้โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการรักษาด้วยยีน มันแสดงให้เห็นว่าหลังจากที่บริหารทางหลอดเลือดดำในปริมาณมากของ MSCs กับจีโนมของหนูชนิดป่ากับเซลล์กลายพันธุ์คอลลาเจนยีนฉันผู้บริจาคเปลี่ยนได้ถึง 30% ของเซลล์ในกระดูกและกระดูกอ่อนเนื้อเยื่อของผู้รับและ mesenchymal เซลล์ต้นกำเนิดเมาส์ transfected หลั่ง IL-3 ของมนุษย์ 9 เดือน ได้อย่างมีประสิทธิภาพสนับสนุนโลหิตในกรณีของการบริหารงานพร้อมกันของพวกเขาด้วยเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดเข้าไปในหนูที่ไม่มีภูมิคุ้มกันโรค

[3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10]

การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มสมอง

ประสบความสำเร็จในการทดลองเพิ่มเติมของการดัดแปลงพันธุกรรมควรจะสังเกต MSCs transfection ปัจจัยยีนทรงเครื่อง MSCs มนุษย์ตามด้วยการถ่ายโอนของเซลล์ transfectants หนูภูมิคุ้มกันโรคซึ่งนำไปสู่การปรากฏตัวในเลือด Antihemophilic ปัจจัย B กว่า 8 สัปดาห์หลังการปลูก ในการทดลองนี้ทำการปรับเปลี่ยนการจัดแจง posttranslational factor IX กับ y-glutamyl carboxylase ในเซลล์ที่ได้รับการ transfected พลังงานของ MSCs กับเวกเตอร์ไวรัสเข้ารหัสปัจจัยทรงเครื่องของมนุษย์ได้รับความสำเร็จน้อย - แนะนำที่ตามมาของเซลล์เหล่านี้กับสุนัขฮีโมฟีเลียในระดับการรักษาของทรงเครื่องปัจจัยที่สนับสนุนปกติห้ามเลือดเข้มแข็งตัวเพียง 12 วัน

การปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อในสมองไปสู่เนื้อเยื่อสมองของสัตว์ได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ที่ไม่สมบูรณ์ของผู้บริจาคมีการเปลี่ยนแปลงทั้งในกลุ่มประชากรของเซลล์ประสาทและเซลล์ประสาท engraftment อนุพันธ์ประสาทเนื้อเยื่อ mesenchymal ผู้บริจาคที่มีสุขภาพดีในทางทฤษฎีทำให้เป็นไปได้การแก้ไขความผิดปกติของพันธุกรรมของการเผาผลาญอาหารสมองในผู้ป่วยที่มีโรค Gaucher และความผิดปกติอื่น ๆ ของการเผาผลาญไขมันคาร์โบไฮเดรตหรือ gangliosides

อย่างต่อเนื่องทดลองเงื่อนไขการค้นหา transdifferentiation ของเซลล์ต้นกำเนิดในเซลล์ไขกระดูกปูชนียบุคคล stromal ในเนื้อเยื่อประสาทและตับ ความสนใจของนักวิจัยมุ่งเน้นไปที่การรวมกันของตัวเหนี่ยวนำการทำให้เกิดความแตกต่างและสื่อการปรับอากาศแบบพิเศษ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการแยกวัฒนธรรมหลักที่มี 10% ซีรั่มของทารกในครรภ์ลูกวัวเซลล์ stromal ไขกระดูกล้างและ resuspended ในสื่อ DMEM / วัฒนธรรม F12 (1/1) เมล็ดที่อัตราความหนาแน่น 200,000 / cm2 หลังจาก 24 ชั่วโมงเซลล์ nonadherent จะถูกลบและติดอยู่กับเซลล์ fibroblast พลาสติกเพาะเลี้ยงเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ สำหรับความแตกต่างของเซลล์ stromal ไขกระดูกเพื่อ neuroblasts ใช้สื่อปรับอากาศที่ได้จากการเพาะเลี้ยงวัฒนธรรมสามวันของเมาส์หลักรบราตัวอ่อนเช่นเดียวกับในหมู่ DMEM / F12 (1/1) กับ 2% เซรั่มน่องทารกในครรภ์และเสริมด้วย 20 ng / ml หรือ 10-6 M LiF retinoic กรด (neyroinduktory ซึ่งจะถูกนำไปใช้กับความแตกต่างของระบบประสาทเมาส์เซลล์ต้นกำเนิดตัวอ่อนและมนุษย์) ความแตกต่างของเซลล์ stromal ไขกระดูกเข้าสู่เซลล์ต้นกำเนิดลงในเซลล์ตับถูกเหนี่ยวนำให้เกิดสภาพแวดล้อมปรับอากาศสร้างขึ้นเป็นผลมาจากสามวันเลี้ยงวัฒนธรรมหลักของเซลล์ตับเมาส์ตัวอ่อนใน DMEM / F12 (1/1) กลางเสริมด้วย 10% ซีรั่มของทารกในครรภ์ลูกวัว

นี่มันควรจะตั้งข้อสังเกตอีกว่าอาณานิคมอดีตเซลล์ stromal ไขกระดูก heteromorphic และสามารถแบ่งออกเป็นสองประเภท ประเภทแรกรวมถึง filopodia เซลล์ fibroblast ขึ้นรูปที่มีนิวเคลียสขนาดใหญ่และหนึ่งหรือสอง nucleoli ประเภทที่สองจะแสดงด้วยเซลล์ขนาดเล็กที่มีรูปร่างเป็นแกนหมุน ในทั้งสองประเภทของการเพาะเลี้ยงเซลล์ในระดับปานกลางปรับอากาศที่ได้รับในชั้นป้อนเมาส์หลักรบราตัวอ่อนและในวันที่ Z-4-TH ของเซลล์วัฒนธรรมปรากฏคล้ายกับ neuroblasts ในขั้นตอนนี้พวกเขามักจะมีหนึ่งหรือสองกระบวนการยาวยุติ filopodia รูปแกน เซลล์รูปปิรามิดหรือ stellate ที่มี dendrites สั้น ๆ น้อยลง dendrites หนึ่ง neuroblasts มีการขยายตัวปกติ (การเจริญเติบโตของไต) และแตกแขนงในส่วนปลายของมัน, อื่น ๆ - มีที่แตกต่างกันกรวยเจริญเติบโต filopodia ผ่านที่ Dendrite การเจริญเติบโตที่เกิดขึ้น ลักษณะทางสัณฐานคล้ายกัน (ไตกรวยการเจริญเติบโตและ filopodia ก) neuroblastoma โดยธรรมชาติแตกต่างในเซลล์ประสาทจะมีการอธิบายในรายละเอียดในเอกสารโดย neurogenesis บนพื้นฐานนี้ผู้เขียนบางคนสรุปว่าเซลล์ที่พวกเขาตรวจพบในวัฒนธรรมเป็น neuroblasts โดยเฉพาะอย่างยิ่ง Schegelskaya อี, et al (2002) หลังจากวัฒนธรรมหลักของเซลล์ stromal เพาะเลี้ยงเป็นเวลาสองสัปดาห์ในแบบถอดเปลี่ยนได้ทุกวันขนาดกลางปรับอากาศ Z-4 และพบว่าส่วนหนึ่งของเซลล์ชนิดที่ยังคงรักษาสถานะที่แตกต่าง ภายนอกเซลล์เหล่านี้คล้ายกับเซลล์และระบุในวัฒนธรรมพร้อมกับ neuroblasts ความแตกต่าง ส่วนใหญ่ของเซลล์ (ประมาณ 80%) มีความแตกต่างกันในแต่ละขั้นตอนของความแตกต่างในเซลล์เนื้อเยื่อระบบประสาทเด่นในเซลล์ประสาท กระบวนการ dendritic ของเซลล์เหล่านี้ในการสัมผัสใกล้ชิดกับแต่ละอื่น ๆ เพื่อให้เซลล์ค่อยๆเกิดขึ้นบนพื้นผิวส่วนโครงข่ายประสาทเทียมในรูปแบบของเส้นยาวเซลล์ เงี่ยง dendritic neuroblasts กลายเป็นมากอีกต่อไปบางส่วนของพวกเขาในวันที่ 8-10 ครั้งยิ่งใหญ่กว่าความยาวของร่างกายของเซลล์ประสาทที่ ค่อยๆสัดส่วนของเซลล์เสี้ยมและ stellate เพิ่มขึ้น Dendrites ของเซลล์ stellate แยก ตามที่ผู้เขียนที่แตกต่างต่อมาเสี้ยมและ stellate เซลล์เมื่อเทียบกับที่สอดคล้องชะลูดลำดับของขั้นตอนปกติของ neurogenesis ในสัตว์ เป็นผลให้ผู้เขียนสรุปได้ว่าเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์ stromal ไขกระดูกจะสัมผัสเหนี่ยวนำให้เกิด neurogenesis ซึ่งกระบวนการในหลอดทดลอง neuroblasts สร้างขึ้นจากทั้งสามประเภทหลักของเซลล์ประสาท สารตั้งต้นของเซลล์ประสาทนอกจากนี้ยังพบในวัฒนธรรมของเซลล์ stromal ไขกระดูกสำหรับ 3-4 วันในระดับปานกลางกับซีรั่มของทารกในครรภ์ 2% และ 20 ng / ml LIF แต่ในกรณีนี้เซลล์ต้นกำเนิดถูกแบ่งออกช้ามากแตกต่างของ neuroblasts เกิดขึ้นเฉพาะใน 30% ของกรณีและพวกเขาไม่ได้ในรูปแบบเครือข่ายเส้นประสาท ใช้เป็นเซลล์ประสาทแตกต่างปฏิกิริยากรด retinoic ผู้เขียนที่ได้รับในวัฒนธรรม 25-30% ของเซลล์ประสาทที่มีความเด่นของเซลล์ glial - การ astrocytes และ oligodendrocytes เซลล์ประสาทเป็นเพียงหนึ่งในสามของเซลล์ประสาททั้งหมดถึงแม้ว่าพวกเขาถูกนำเสนอทั้งสามประเภท: กระสวยเสี้ยมและเซลล์ stellate ในวันที่ 6 ของเซลล์เพาะเลี้ยง stromal ใน retinoic กรดเซลล์ประสาทกลางกลายเป็นความแตกต่างมากขึ้นขณะที่ซอนของแต่ละเสี้ยมเซลล์ถูกพบว่าใน neuroontogenesis ปกติปรากฏภายหลังการก่อตัวของกระบวนการ dendritic ตามที่ผู้เขียนแม้จะมีผลผลิตต่ำของเซลล์ประสาทวิธีการกระตุ้นให้เกิดการ retinoic กรดมีข้อได้เปรียบ: astrocytes และ oligodendrocytes และ myelinating งานฟังก์ชั่ฟีดในช่วงการเจริญเติบโตของซอนและ dendrites และเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการสร้างเนื้อเยื่อเส้นประสาทปกติ ดังนั้นเพื่อซ่อมแซมจุดที่เสียหายในเซลล์ร่างกายใช้ระงับดีขึ้นอุดมในเซลล์ glial

ในชุดที่สองของการทดลองผู้เขียนพยายามที่จะทำให้เกิดความแตกต่างของเซลล์ stromal strokal ในเซลล์ตับ หลังจากวัฒนธรรมสามวันของเซลล์ต้นกำเนิดไขกระดูก stromal ในสื่อปรับอากาศที่ได้จากการบ่มเมาส์เซลล์ตับจากตัวอ่อนขนาดใหญ่เซลล์รูปทรงกลมมีการตรวจพบมักจะสองนิวเคลียร์หุ้มนิวเคลียสที่มีขนาดแตกต่างกัน เซลล์เหล่านี้อยู่ในขั้นตอนต่างๆของความแตกต่างและแตกต่างกันในขนาดจำนวนนิวเคลียสและการรวมใน cytoplasm ในส่วนของเซลล์เหล่านี้ได้รับการตรวจพบไกลโคเจนโดยเราได้ระบุว่าพวกเขาเป็นเซลล์ตับสารตั้งต้น ตั้งแต่การเพาะเลี้ยงเซลล์ไม่ถูกตรวจพบคล้ายกับ neuroblasts ตามข้อสรุปว่าในกลางปรับอากาศที่ได้จากการเพาะเลี้ยงเซลล์ตับตัวอ่อนมีปัจจัยของความแตกต่างของเซลล์ประสาทและไม่ตรงกันข้ามมีปัจจัยที่ทำให้เกิดความแตกต่างของเซลล์ stromal ไขกระดูกเข้าสู่เซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์ตับ . ผู้เขียนขอแนะนำการปรากฏตัวของเซลล์ pluripotent จากไขกระดูก stroma เช่นที่พวกเขาแตกต่างในหลอดทดลองเข้าสู่เซลล์ของเนื้อเยื่อตับหรือประสาทขึ้นอยู่กับสื่อที่เฉพาะเจาะจงปรับอากาศและตัวเหนี่ยวนำ

ในงานบางแห่งความแตกต่างของเซลล์ stroma จากไขกระดูกใน cardiomyocytes, cartilage, bone และเซลล์เนื้อเยื่อประสาทได้แสดงอย่างถูกต้อง มีข้อมูลว่าในหมู่เซลล์ของไขกระดูกมีประชากรของเซลล์ต้นกำเนิดที่สามารถแยกความแตกต่างเป็นเซลล์ตับได้ ในแง่ของผลการเหล่านี้ไปทดลองในหนูจะยังคงได้รับการพิจารณาเป็นการยืนยันการแสดงตนในเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูก pluripotent mesenchymal มีความสามารถในการอื่นเพื่อความแตกต่างเข้าสู่เซลล์ของเนื้อเยื่อต่างๆของสิ่งมีชีวิตผู้ใหญ่

การปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อชั้นกลาง

ในการปลูกถ่ายทางคลินิกของมนุษย์เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal สามารถนำมาใช้สำหรับการขยายตัวของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดและลูกหลานของพวกเขาในช่วงต้น prekommitirovannyh โดยเฉพาะอย่างยิ่งการแนะนำของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด autologous และผู้ป่วยโรคมะเร็ง MSCs หลังจากรักษาด้วยเคมีบำบัดโดยสูงเพิ่มความเร็วในการกู้คืนในนิวโทรฟิและเกล็ดเลือดในเลือด autologous และปลูก allogeneic ของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ใช้ในการรักษาหลาย myeloma aplastic จาง thrombocytopenia ธรรมชาติ - โรคที่เกี่ยวข้องกับข้อบกพร่องหลักเนื้อเยื่อเม็ดเลือด stromal ประสิทธิภาพของการรักษาด้วยเซลล์ในโรคทางโลหิตวิทยาในหลายกรณีดังกล่าวข้างต้นในขณะที่การแนะนำของ stromal และเซลล์ต้นกำเนิด hemopoietic ซึ่งประจักษ์การลดลงของระยะเวลาการกู้หลังผ่าตัดเลือดลดลงในจำนวนผู้เสียชีวิตเนื่องจากการไม่เลือกทำลายเซลล์มะเร็งในระดับภูมิภาคและการไหลเวียนที่ตายและรากเหง้าของตัวเองเซลล์ผู้ป่วยเม็ดเลือด MSCs มีแนวโน้มการใช้งานและเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลหลายด้านอื่น ๆ ในการปฏิบัติทางคลินิกเนื่องจากความสะดวกในญาติของพวกเขาได้รับการดูดจากไขกระดูกการขยายตัวในวัฒนธรรมและ transfection ของยีนบำบัดรักษาโรค ดังนั้นเพื่อชดเชยข้อบกพร่องเนื้อเยื่อท้องถิ่นสามารถใช้การปลูกในท้องถิ่นของเซลล์ mesenchymal ปูชนียบุคคลหลายด้านและความผิดปกติของระบบของเนื้อเยื่อของแหล่งกำเนิด mesenchymal ไม่ได้รับการยกเว้นการแนะนำของพวกเขาในการไหลเวียนของทั่วไป

ระมัดระวังมากขึ้นในการขัดแย้งของพวกเขาเขียนผลงานซึ่งในมุมมองของ MSCs ท้องถิ่นปลูกระบบและยีนบำบัดมีการวิเคราะห์จากมุมมองของเซลล์ stromal ชีววิทยา ไขกระดูกหลังคลอดได้รับการยกย่องเป็นประเพณีที่ร่างกายประกอบด้วยสองระบบหลักของเซลล์ที่แตกต่างกัน - เนื้อเยื่อเม็ดเลือดจริงและเกี่ยวข้อง stroma สนับสนุน ดังนั้นกระดูกเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูก mesenchymal เดิมได้รับการยกย่องเป็นเพียงแหล่งที่มาของพื้นฐาน stromal สำหรับการผลิตปัจจัยการกำกับดูแลจุลภาคเม็ดเลือดได้ จากนั้นความสนใจของนักวิจัยได้เปลี่ยนไปศึกษาบทบาทของ MSC ในฐานะที่เป็นต้นกำเนิดของเนื้อเยื่อโครงกระดูก ข้อมูลล่าสุดระบุถึงศักยภาพที่ไม่คาดคิดในการสร้างความแตกต่างของเซลล์ Stromal Staphal ด้วยการก่อตัวของเนื้อเยื่อประสาทหรือกล้ามเนื้อ ในคำอื่น ๆ เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal จัดแสดงปั้น transgermalnuyu - ความสามารถในการแยกความแตกต่างเข้าสู่เซลล์ชนิดเซลล์เนื้อเยื่อ phenotypically ไม่ใช่ต้นฉบับ แต่บางแง่มุมของชีววิทยาของเซลล์ stromal ไขกระดูกยังไม่ชัดเจนและยังไม่ได้แก้ไขในการวางแผนทางชีวภาพทั่วไปและในรายละเอียดบางอย่างรวมทั้งบัตรประจำตัว, ธรรมชาติ, แหล่งกำเนิดและการพัฒนาและการทำงานในกระดูกร่างกายเซลล์ไขกระดูก stromal เช่นเดียวกับความแตกต่างที่อาจเกิดขึ้นได้รับอนุญาตร่างกายอดีตและความเป็นไปได้ การใช้บำบัดในร่างกาย ข้อมูลเกี่ยวกับโอกาสที่มีศักยภาพของ MSCs เช่นเดียวกับผลการศึกษาศักยภาพการปฏิรูปอื่น ๆ ของเซลล์ต้นกำเนิดในคมชัดด้วยความเชื่อที่จัดตั้งขึ้นในทางชีววิทยา

เมื่อเลี้ยงภายใต้สภาวะความหนาแน่นต่ำเซลล์ต้นกำเนิดจากกระดูกจะก่อตัวเป็นอาณานิคมที่แตกต่างกันซึ่งแต่ละอนุพันธ์จะเป็นอนุพันธ์ของเซลล์ตัวเดียว เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ต้นกำเนิด stromal ในเซลล์ไขสันหลังรังขึ้นอยู่กับความสามารถในการสร้างอาณานิคมขึ้นอยู่กับเงื่อนไขของการเพาะปลูกและชนิดของ MSC ยกตัวอย่างเช่นในหนูที่จะได้รับจำนวนเงินสูงสุดของเซลล์ต้นกำเนิด stromal เป็นสิ่งจำเป็นอย่างยิ่งในการปรากฏตัวของวัฒนธรรมป้อนฉายรังสีของเซลล์ไขกระดูกและซีรั่มในขณะที่อาณานิคมขึ้นรูปที่มีประสิทธิภาพของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal มนุษย์เป็นอิสระจากการป้อนหรือจากอาหารเลี้ยงเชื้อ จำนวนของปัจจัย mitogenic ที่รู้จักกระตุ้นการแพร่กระจายของเซลล์ต้นกำเนิด stromal มีจำนวน จำกัด ซึ่งรวมถึง PDGF, EGF, FGF, TGF-b และ IGF1 ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม, การเพาะเลี้ยง MSCs สายโพลียังคงอยู่ในหลอดทดลองมานานกว่า 50 การแบ่งเซลล์ซึ่งจะทำให้มันเป็นไปได้ที่จะได้รับพันล้านเซลล์ stromal ไขกระดูกจาก 1 มิลลิลิตรดูดมัน

แต่ประชากรของเซลล์ stromal ไขกระดูกคือต่างกันที่ปรากฏตัวเป็นความแปรปรวนในขนาดของอาณานิคมอัตราที่แตกต่างกันของการก่อตัวของพวกเขาและความหลากหลายของลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ซึ่งครอบคลุมช่วงของแกน fibroblast เหมือนไปยังเซลล์แบนที่มีขนาดใหญ่ กับการพัฒนาของพืชดังกล่าวหลังจาก 20 วันยังไม่ทราบความแตกต่างของฟีโนไทป์ เป็นส่วนหนึ่งของอาณานิคมที่โดดเด่นด้วยการแสดงออกสูงของอัลคาไลน์ฟอสฟาคนอื่นไม่ได้แสดงมันและอาณานิคมชนิดที่สามเป็น fosfatazopozitivnymi ในเขตภาคกลางและ fosfatazonegativnymi ที่อยู่รอบนอก อาณานิคมแยกจากกันเป็นก้อนของเนื้อเยื่อกระดูก (จุดเริ่มต้นของแร่ธาตุเมทริกซ์จะถูกทำเครื่องหมายเมื่อย้อมด้วย alizarin red หรือแคลเซียมโดย Van-Koss) ในอาณานิคมอื่น ๆ การสะสมไขมันเกิดขึ้นโดยการย้อมสี G ด้วยสีแดงเป็นสีแดง มักไม่ค่อยมีอาณานิคมของเซลล์ต้นกำเนิดจากลำไส้ซึ่งมีสี alcyan)

หลังจากการปลูกถ่ายมดลูกในสัตว์ทดลองโพลีเส้น MGK รูปแบบ stroma กระดูกมดลูกกับ setchatoobraznoy เกี่ยวข้องกับ myelopoiesis และ adipocytes เป็นอย่างดี แต่ไม่ค่อยมีเนื้อเยื่อกระดูกอ่อน ในสายโมโนโคลนอลการปลูกถ่ายเซลล์ stromal ไขกระดูกในบางกรณีมี chimerism ขัดแย้งเดอโนโวเนื้อเยื่อกระดูกรูปแบบที่ประกอบด้วยเซลล์กระดูก adipocytes ประกอบด้วย stroma และผู้บริจาคกำเนิดในขณะที่เซลล์ของเม็ดเลือดและระบบหลอดเลือดจะได้มาจากผู้รับ

ผลจากการศึกษาเหล่านี้ยืนยันลักษณะของต้นกำเนิดของเซลล์ไขกระดูก stromal สารตั้งต้นจากการที่เส้น clonal ถูกได้รับ นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่าการโคลนนิ่งทั้งหมดในเซลล์เพาะเลี้ยงไม่ได้เป็นเซลล์ต้นกำเนิดที่หลากหลาย นักวิจัยบางคนเชื่อและเราแบ่งปันความคิดเห็นของพวกเขาว่าข้อมูลที่ถูกต้องที่สุดเกี่ยวกับศักยภาพที่แท้จริงของความแตกต่างของโคลนของแต่ละบุคคลเท่านั้นที่สามารถได้รับในร่างกายหลังการปลูกมากกว่าโดยการกำหนดฟีโนไทป์ของสัญญาซื้อขายล่วงหน้าในหลอดทดลอง การแสดงออกในเครื่องหมายวัฒนธรรม osteo- ฟีโนไทป์ hondro- หรือ adipogenesis (กำหนดโดย mRNA หรือผ่านทางเทคนิคฮีสโตเคมี) และแม้กระทั่งการผลิตของเมทริกซ์ mineralized ไม่ได้สะท้อนให้เห็นถึงระดับของ pluripotency โคลนเดียวในร่างกาย ดังนั้นบัตรประจำตัวของเซลล์ต้นกำเนิดในกลุ่มเซลล์ stromal จะใช้ได้เฉพาะ posteriori ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมปลูกตัวอย่างทางชีวภาพ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง chondrogenesis มากไม่ค่อยสังเกตในระบบเปิดการปลูกถ่ายในขณะที่การก่อตัวของกระดูกอ่อนไม่ได้เป็นเรื่องผิดปกติในระบบปิดเช่นห้องการแพร่กระจายหรือในวัฒนธรรม mikromassnyh ของเซลล์ stromal ในหลอดทดลองที่นั้นบรรลุความตึงเครียดออกซิเจนต่ำในท้องถิ่นมีส่วนร่วมในการก่อตัวของกระดูกอ่อน ดังนั้นแม้เทคนิคการปลูกเช่นเดียวกับที่ไม่เฉพาะเจาะจงในสภาพวัฒนธรรมหลอดทดลองอย่างมีนัยสำคัญส่งผลกระทบต่อช่วงของความแตกต่างของ MSCs

การปลูกถ่ายทดลองด้วยการปฏิบัติตามเงื่อนไขการทดลองเป็นมาตรฐานทองคำในการกำหนดศักยภาพในการสร้างความแตกต่างของเซลล์ stromal strokal และองค์ประกอบหลักของการระบุที่ถูกต้อง ในอดีตการศึกษาเกี่ยวกับการปลูกถ่ายไขกระดูกในกระดูก stromal มีส่วนเกี่ยวข้องกับปัญหาการปลูกถ่ายไขกระดูกทั่วไป ได้รับการยอมรับว่าสร้าง microenvironment เกี่ยวกับ hemopoietic โดยการปลูกถ่ายเซลล์เม็ดเลือดแดงของกระดูกและให้การพัฒนาเนื้อเยื่อโลหิตในบริเวณ transplantation แหล่งกำเนิดของสภาพแวดล้อมขนาดเล็กจากผู้บริจาคและเนื้อเยื่อโลหิต - จากโฮสต์ช่วยให้เราสามารถรักษากระดูก ectopic เป็น "inverted" การปลูกถ่ายไขกระดูกที่แท้จริง การปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากกระดูกในท้องถิ่นช่วยในการแก้ไขข้อบกพร่องของกระดูกอย่างมีประสิทธิภาพยิ่งกว่าการฟื้นฟูที่เกิดขึ้นเอง การศึกษา preclinical ในรูปแบบการทดลองหลายชิ้นได้แสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ในการใช้การปลูกถ่ายไขกระดูกในกระดูกในเนื้อเยื่อกระดูกแม้ว่าจะต้องใช้การวิเคราะห์และการวิเคราะห์อย่างละเอียดที่สุดเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพเทคนิคเหล่านี้แม้ในกรณีที่ง่ายที่สุด โดยเฉพาะอย่างยิ่งสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการขยายตัวของเซลล์เนื้อเยื่อกระดูก osteogenic ex vivo ยังไม่ได้รับการจัดตั้งโครงสร้างและองค์ประกอบของผู้ให้บริการอุดมคติยังคงไม่ได้ใช้เช่นเดียวกับจำนวนของเซลล์ที่จำเป็นสำหรับการฟื้นฟูกระดูกเป็นกลุ่ม

นอกจากจะใช้ขยายพันธุ์ ex vivo กระดูกเซลล์ไขกระดูก stromal สำหรับฟื้นฟูเนื้อเยื่อของแหล่งกำเนิด mesenchymal นอกรีต MSC เหนียวเปิดการใช้งานที่มีศักยภาพสำหรับการฟื้นฟูของเซลล์ประสาทหรือการส่งมอบผลิตภัณฑ์ยีนในระบบประสาทส่วนกลาง ในหลักการนี้ช่วยลดความยุ่งยากในการรักษาด้วยเซลล์ในความพ่ายแพ้ของระบบประสาทเนื่องจากไม่จำเป็นต้องได้รับเซลล์ต้นกำเนิดจากเซลล์ประสาท autologous จากมนุษย์ มีรายงานเกี่ยวกับความเป็นไปได้ในการใช้เซลล์ไขกระดูกในการสร้าง cardiomyocytes และ myogenic precursor cells เป็นแหล่งกำเนิดของ stromal และ extrinsic อย่างแท้จริง

กำลังดำเนินการทดลองเกี่ยวกับการปลูกถ่ายเซลล์ต้นกำเนิดจากกระดูกเพื่อรักษาโรคโครงกระดูกโดยทั่วไป ไม่ต้องสงสัยเลยว่าเซลล์ไขกระดูก stromal มีประชากรรับผิดชอบสำหรับความผิดปกติทางพันธุกรรมในโรคของกระดูกซึ่งเป็นตัวอย่างที่ดีโดยการโอนเวกเตอร์โดยใช้ข้อมูลทางพันธุกรรมของเซลล์ซึ่งนำไปสู่การก่อตัวของเนื้อเยื่อกระดูกพยาธิวิทยาในสัตว์ทดลอง อย่างไรก็ตามความสามารถของเซลล์ stromal ในการปลูก, เติบโต, คูณและความแตกต่างในกระดูกของโครงกระดูกหลังจากที่นำไปสู่กระแสเลือดทั่วไปยังไม่ได้รับการพิสูจน์

นี้เป็นส่วนหนึ่งเนื่องจากความจริงที่ว่าขั้นตอนมาตรฐานของไขกระดูก stroma จะไม่ได้รับการปลูกถ่ายเนื้อเยื่อเม็ดเลือดเกณฑ์ที่เข้มงวดเพื่อให้การประเมิน engraftment ประสบความสำเร็จของระบบการบริหารเซลล์ stromal ยังไม่ได้รับการพัฒนา ควรจำไว้ว่าการปรากฏตัวของยีนเครื่องหมายในสารสกัดจากเนื้อเยื่อหรือการแยกเซลล์ในเซลล์ต้นกำเนิดของผู้บริจาคบ่งชี้ว่าไม่เกี่ยวกับการผสมเทียมของเซลล์ แต่เป็นการรอดชีวิตเท่านั้น แม้การฉีดภายในหลอดเลือดแดงของเซลล์ stromal ไขกระดูกในขาเมาส์สามารถนำไปสู่ผลเกือบเป็นศูนย์ engraftment แม้จะมีความจริงที่ว่าผู้บริจาคเซลล์ที่ได้มาจะพบว่าในจำนวนมากภายในเครือข่ายไขกระดูก microvascular แต่น่าเสียดายที่เซลล์ดังกล่าวมักจะอธิบายว่าเป็น "engrafted" เฉพาะบนพื้นฐานของผลของการกำหนดยีนผู้ให้ยีนเครื่องหมายในสภาพการเพาะเลี้ยง ex vivo นอกจากนี้ยังจำเป็นต้องให้หลักฐานที่น่าเชื่อถือของการรวมระยะยาวในเนื้อเยื่อของเซลล์ที่แตกต่างและมีบทบาทหน้าที่ของแหล่งกำเนิดผู้บริจาค ในงานตีพิมพ์จำนวนมากที่มีรายงานเกี่ยวกับการ engraftment ของกระดูก stromal เซลล์ในโครงกระดูกขาดข้อมูลที่ชัดเจนของชนิดนี้เป็นที่โดดเด่น อย่างไรก็ตามควรมีการสังเกตว่าในการทดลองที่ถูกต้องเกี่ยวกับสัตว์อย่างไรก็ตามมีการสร้างเซลล์ต้นกำเนิด stromal ที่ จำกัด แต่มีความเป็นจริงหลังจากที่ได้รับการบริหารระบบแล้ว

ข้อมูลเหล่านี้สอดคล้องกับผลการศึกษาความเป็นไปได้ในการส่งเซลล์ตัวอ่อนของไขกระดูกไปสู่กล้ามเนื้อผ่านระบบลำเลียง อย่างไรก็ตามไม่ควรลืมว่าโครงกระดูกและเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อเกิดขึ้นระหว่างการพัฒนาและการเจริญเติบโตบนพื้นฐานของการเคลื่อนไหวของเซลล์ extravascular ที่ใช้กระบวนการอพยพที่ไม่เกี่ยวข้องกับการไหลเวียนในเลือด ถ้ามีเส้นทางการไหลเวียนโลหิตที่เป็นอิสระสำหรับการส่งเซลล์ต้นกำเนิดไปยังเนื้อเยื่อเฟสทรัมที่เป็นของแข็งคุณสามารถอนุญาตให้มีการมีอยู่ของเซลล์ต้นกำเนิดที่มีการหมุนเวียนทางสรีรวิทยาได้หรือไม่? อะไรคือจุดกำเนิดของเซลล์เหล่านี้ทั้งในสิ่งมีชีวิตที่กำลังพัฒนาและหลังคลอดและพวกเขาจะเจาะผนังหลอดเลือดได้อย่างไร? การแก้ปัญหาของปัญหาเหล่านี้เป็นสิ่งจำเป็นอย่างยิ่งและต้องมีการวิเคราะห์ทางคลินิกเบื้องต้นอย่างละเอียดที่สุด แม้ว่าจะพบคำตอบสำหรับคำถามเหล่านี้แล้วก็ตามปัญหาทางจลศาสตร์ที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตของโครงกระดูกและการเปลี่ยนแปลงของเนื้อเยื่อเกี่ยวพันยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด ในเวลาเดียวกันการรักษาความผิดปกติเกี่ยวกับการเกิดภาวะ osteogenesis โดยการแทนที่ประชากรทั้งหมดของเซลล์ต้นกำเนิดที่กลายพันธุ์ด้วยเซลล์ stromal ที่มีสุขภาพดีดูเหมือนจะเป็นมุมมองทางคลินิกที่แท้จริง ในกรณีนี้โซนท้องถิ่นของการแตกหักหรือการเปลี่ยนรูปเนื่องจากการเสื่อมสภาพทางพยาธิวิทยาเช่นเดียวกับการเปลี่ยนแปลงที่ทำลายในเนื้อเยื่อกระดูกสามารถแก้ไขได้โดยการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองในหลอดทดลองในหลอดทดลอง stromal stem cell ดังนั้นทิศทางของการวิจัยในอนาคตควรจะมุ่งเน้นไปที่ปัญหาของการเปลี่ยนแปลงหรือการแก้ไขทางพันธุกรรมของเซลล์ต้นกำเนิด osteogenic autologous กลายพันธุ์ ex vivo

พันธุวิศวกรรมของเซลล์ชั่วคราวหรือถาวรกลายเป็นพื้นฐานของเซลล์และชีวโมเลกุลแหล่งที่มาของการค้นพบทางวิทยาศาสตร์จำนวนมากที่เกี่ยวข้องกับบทบาทของโปรตีนของแต่ละบุคคลในการเผาผลาญสารโทรศัพท์มือถือในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลองที่ การใช้เทคนิคโมเลกุลเพื่อแก้ไขโรคทางพันธุกรรมและโรคของมนุษย์มีแนวโน้มมากสำหรับยาในทางปฏิบัติเนื่องจากคุณสมบัติของเซลล์ต้นกำเนิด stromal ไขกระดูกที่ได้รับอนุญาตในการพัฒนาวงจรที่ไม่ซ้ำกันปลูกสำหรับการแก้ไขของโรคทางพันธุกรรมของโครงกระดูก ในกรณีนี้เซลล์ mesenchymal ต้นกำเนิดสามารถรับได้ค่อนข้างง่ายจากผู้รับในอนาคตพวกเขาจะคล้อยตามการจัดการทางพันธุกรรมและสามารถที่จะก่อให้เกิดจำนวนมากในระยะเวลาสั้น ๆ การใช้เซลล์ต้นกำเนิดที่เป็น mesenchymal หลีกเลี่ยงข้อ จำกัด และความเสี่ยงที่เกี่ยวข้องกับการจัดส่งข้อมูลทางพันธุกรรมไปยังผู้ป่วยโดยตรงผ่านโครงสร้างเวกเตอร์ที่เป็นเวกเตอร์ กลยุทธ์นี้ใช้ได้กับปี่เซลล์ต้นกำเนิดตัวอ่อน แต่หลังคลอด autologous ไขกระดูกเซลล์ stromal - วัสดุที่ต้องการเพราะการบริหารงานของพวกเขาไปได้ไม่รวมภาวะแทรกซ้อนภูมิคุ้มกัน posttransplantation เพื่อให้บรรลุผลในระยะสั้นเช่นในเพื่อที่จะเร่งฟื้นฟูกระดูกวิธีการที่ดีที่สุดคือการดัดแปลงพันธุกรรมของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ใช้ elektroporatsrsh ฟิวชั่นเคมี lipofection, พลาสมิดและสร้าง adenoviral โดยเฉพาะอย่างยิ่งการถ่ายโอนไวรัสไปยังเซลล์ BMP-2 stromal strokal จากกระดูกมีผลในการเร่งการฟื้นฟูกระดูกใน polytrauma ทดลอง การสร้างโครงสร้างเวคเตอร์ adenoviral เป็นที่นิยมเนื่องจากไม่มีความเป็นพิษ อย่างไรก็ตามการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมของเซลล์ stromal strokal ในกรณีนี้เป็นลักษณะความมั่นคงต่ำมาก นอกจากนี้ปกติเปลี่ยนเซลล์ไขกระดูก stromal ต้องใช้ผู้ให้บริการเวกเตอร์ของข้อมูลทางพันธุกรรม 10 ครั้งติดเชื้อมากกว่าเซลล์ชนิดอื่น ๆ ซึ่งมีนัยสำคัญเพิ่มร้อยละของการตายของเซลล์ transfected ที่ที่

สำหรับการรักษาโรคที่เกิดจากการด้อยจำเป็นปรับเปลี่ยนเวลานานหรือถาวรต่ำหรือศูนย์กิจกรรมทางชีวภาพของยีนบางอย่างของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ซึ่งต้องใช้ adeno-associated ไวรัสเบื้องหลังไวรัส, lentiviruses และความเพ้อฝัน adeno ไวรัส ไซต์การขนส่งของไวรัสเหล่านี้มีความสามารถในการขนส่งดีเอ็นเอขนาดใหญ่ (สูงสุด 8 กิโลไบต์) วรรณกรรมทางวิทยาศาสตร์ได้ปรากฏข้อมูลแล้วเกี่ยวกับกิจกรรมทางชีวภาพของเซลล์ภายนอกไขกระดูก stromal transfected กับโครงสร้างไวรัสเข้ารหัสการสังเคราะห์โมเลกุลของกฎระเบียบและเครื่องหมาย - IL-3, CD2 ปัจจัย VIII และเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องในการสังเคราะห์ของ L-DOPA แต่ในผลงานเหล่านี้ผู้เขียนชี้ให้เห็นถึงข้อ จำกัด หลายอย่างที่ต้องเอาชนะก่อนที่จะมีการใช้เทคโนโลยีนี้ในทางปฏิบัติ ปัญหาแรกคือการเพิ่มประสิทธิภาพกระบวนการปรับเปลี่ยน MCK ex vivo เป็นที่ทราบกันดีว่าการขยายตัวของเซลล์กระดูกในไขกระดูกในหลอดทดลองเป็นเวลานาน (3-4 สัปดาห์) ในหลอดทดลองลดการถ่ายเลือดลง ในเวลาเดียวกันจำเป็นต้องมีการถ่ายวัฏจักรหลายครั้งเพื่อให้ได้ระดับการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมของ MSC ในระดับสูง ปัญหาที่สองเกี่ยวข้องกับระยะเวลาของการแสดงออกของยีนบำบัดซึ่งยังไม่เกินสี่เดือน การลดลงของการแสดงออกของยีนที่มีประสิทธิภาพตามธรรมชาติลดลงเนื่องจากการใช้งานโปรโมเตอร์และการตายของเซลล์ที่ถูกปรับเปลี่ยน ในการถ่ายโอนลูกค้าเป้าหมายทั่วไปของข้อมูลทางพันธุกรรมโดยใช้เซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal ผลการศึกษาเบื้องต้นบ่งชี้ถึงความจำเป็นในการเพิ่มประสิทธิภาพต่อไปของวิธีการ transfection ex vivo ที่เลือกก่อการเพียงพอควบคุมกิจกรรมทางชีวภาพในทิศทางที่เหมาะสมและเพิ่มความสามารถของกระดูกเซลล์ไขกระดูก stromal แก้ไขเพื่อตัวเองต่ออายุในร่างกายหลังการปลูก ควรสังเกตว่าการใช้การออกแบบ retroviral เพื่อปรับเปลี่ยนเซลล์ stromal strokal ในทิศทางที่ถูกต้องไม่จำเป็นต้อง engraftment บังคับของพวกเขา เซลล์ต้นกำเนิดเยื่อหุ้มสมองที่ผ่านการถ่ายทอดแล้วสามารถทำหน้าที่แก้ไขต่อภูมิหลังของที่พักอาศัยได้อย่างมั่นคงและไม่มีการรวมกลุ่มทางกายภาพที่ใช้งานได้บังคับและทำงานในเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน ในกรณีนี้พวกเขาควรได้รับการพิจารณาว่าเป็นมินิปั๊มทางชีววิทยาซึ่งผลิตในร่างกายปัจจัยการขาดดุลซึ่งกำหนดการสำแดงของพยาธิวิทยาทางพันธุกรรม

ใช้เปลี่ยนเซลล์ไขกระดูก stromal สำหรับการรักษาโรคทางพันธุกรรมที่โดดเด่นที่มีเอกลักษณ์เฉพาะด้วยการแสดงออกของยีนที่ผิดปกติหรือกิจกรรมทางชีวภาพทางพยาธิวิทยาที่เป็นปัญหามากขึ้นเพราะในกรณีนี้มันเป็นสิ่งจำเป็นเพื่อป้องกันการถ่ายโอนหรือขายข้อมูลทางพันธุกรรมที่บิดเบี้ยว หนึ่งในวิธีการทางวิศวกรรมทางพันธุกรรมคือการรวมตัวของเซลล์ต้นกำเนิดจากตัวอ่อนเพื่อสร้างสัตว์ดัดแปรพันธุกรรม อย่างไรก็ตามในระดับต่ำมากของ recombinant คล้ายคลึงกันรวมกับปัญหาของประชาชน, การแยกและการขยายตัวของโคดังกล่าวไม่น่าจะส่งเสริมการใช้อย่างแพร่หลายของเทคนิคนี้ในอนาคตอันใกล้แม้ว่าการพัฒนาวิธีการเทคโนโลยีใหม่ แนวทางที่สองที่จะรักษาด้วยยีนอยู่บนพื้นฐานที่โดดเด่นพยาธิวิทยาการแก้ไขอัตโนมัติดีเอ็นเอเสียหายกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมอาจได้รับการแก้ไขโดยการแนะนำของดีเอ็นเอจากภายนอกด้วยลำดับที่ต้องการ (oligonucleotides ดีเอ็นเอสั้นหรือ RNA ลูกผสม / oligonucleotides DNA) ผูกที่ homologs ในจีโนมที่เสียหาย สามศูนย์รวมให้ล็อคการส่งข้อมูลทางพยาธิวิทยาซึ่งประสบความสำเร็จผ่านการใช้ oligonucleotides ออกแบบมาโดยเฉพาะซึ่งผูกกับยีนโดยเฉพาะอย่างยิ่งในรูปแบบโครงสร้างขดลวด ternary ซึ่งไม่รวมเป็นไปได้ของการถอดรหัส

แม้ว่าการแก้ไขของโรคทางพันธุกรรมในระดับจีโนมที่มีความเหมาะสมและวิธีการรักษาที่ต้องการ mRNA ยังเป็นเวกเตอร์ที่มีแนวโน้ม (บางทีอาจจะเข้าถึงได้มากขึ้น) สำหรับการปิดกั้นยีนเชิงลบที่โดดเด่น เพื่อที่จะยับยั้งการแปลและ / หรือเพิ่มการย่อยสลาย mRNA มีมานานแล้วใช้กับโมเลกุลของโปรตีน antisense oligonucleotide ลำดับหรือปิดกั้นเต็มผูกพันของ mRNA อุปกรณ์ชีวสังเคราะห์ของเซลล์ นอกจากนี้ RNA แบบเกลียวซึ่งก่อให้เกิดการสลายตัวของ mRNA อย่างรวดเร็วกลไกที่ยังไม่ชัดเจน แต่ก็ไม่น่าที่การกำจัดเพียงของ mRNA ถอดความจากอัลลีลกลายพันธุ์ที่มีการกลายพันธุ์สั้นหรือเดียวจะส่งเสริมการแสดงออกของอัลลีลปกติ ทางเลือกที่เป็นหัวค้อนใช้ ribozinov และกิ๊บมีความสามารถในการเชื่อมโยงกับเว็บไซต์ที่เฉพาะเจาะจงสูงของ mRNA ด้วยการเหนี่ยวนำที่ตามมาของความแตกแยกและการใช้งานของพวกเขาระหว่างการแปล ขณะนี้มีการศึกษาความเป็นไปได้ในการใช้วิธีนี้ในการรักษาโรคกระดูกเสื่อมทางพยาธิวิทยา โดยไม่คำนึงถึงว่าสิ่งที่เป็นเป้าหมาย - องค์ประกอบของจีโนมหรือนิวเคลียสความสำเร็จของเทคโนโลยียีนบำบัดใหม่จะถูกกำหนดโดยประสิทธิภาพของการรวมของสารเคมีในไขกระดูกเซลล์ stromal ex vivo เป็นทางเลือกที่ดีที่สุดของเวกเตอร์โดยเฉพาะอย่างยิ่งและความสามารถที่มีเสถียรภาพของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal แสดงปัจจัยที่ต้องการในร่างกาย

ดังนั้นการค้นพบเซลล์ต้นกำเนิดที่มีคุณสมบัติที่ไม่คาดฝันจึงทำให้เกิดแนวคิดใหม่สำหรับการพัฒนาสายพันธุ์เซลล์ แต่การที่จะเข้าใจบทบาททางชีวภาพของเซลล์ stromal ต้นกำเนิดของธรรมชาติของพวกเขาความสามารถในการ transdifferentiation หรือ dedifferentiation สำคัญทางสรีรวิทยาของพวกเขาอยู่ในขั้นตอนของการพัฒนาของตัวอ่อนเจริญเติบโตหลังคลอด, การเจริญเติบโตและริ้วรอยเช่นเดียวกับในโรคของมนุษย์ต้องมีการวิจัยสหวิทยาการเพิ่มเติม