อหิวาตกโรค วิบริโอ

ตามข้อมูลขององค์การอนามัยโลก อหิวาตกโรคเป็นโรคติดเชื้อที่มีลักษณะอาการท้องเสียเฉียบพลันรุนแรง ถ่ายอุจจาระเป็นน้ำข้าว ซึ่งเป็นผลมาจากการติดเชื้อ Vibrio cholerae เนื่องจากโรคนี้แพร่ระบาดได้อย่างกว้างขวาง มีอาการรุนแรง และมีอัตราการเสียชีวิตสูง อหิวาตกโรคจึงถือเป็นโรคติดเชื้อที่อันตรายอย่างยิ่ง

แหล่งกำเนิดของโรคอหิวาตกโรคในประวัติศาสตร์คือประเทศอินเดีย หรือพูดให้ชัดเจนกว่านั้นคือบริเวณสามเหลี่ยมปากแม่น้ำคงคาและแม่น้ำพรหมบุตร (ปัจจุบันคืออินเดียตะวันออกและบังกลาเทศ) ซึ่งมีโรคนี้มาตั้งแต่สมัยโบราณ (พบการระบาดของโรคอหิวาตกโรคในภูมิภาคนี้ตั้งแต่เมื่อ 500 ปีก่อนคริสตกาล) โรคอหิวาตกโรคที่ระบาดมานานในบริเวณนี้เกิดจากหลายสาเหตุ เชื้ออหิวาตกโรคไม่เพียงแต่สามารถดำรงชีวิตอยู่ในน้ำได้เป็นเวลานานเท่านั้น แต่ยังสามารถแพร่พันธุ์ได้ภายใต้สภาวะที่เหมาะสม เช่น อุณหภูมิสูงกว่า 12 องศาเซลเซียส มีสารอินทรีย์อยู่ สภาวะเหล่านี้พบเห็นได้ในอินเดีย ได้แก่ ภูมิอากาศแบบร้อนชื้น (อุณหภูมิเฉลี่ยต่อปีอยู่ที่ 25-29 องศาเซลเซียส) ฝนตกชุกและเต็มไปด้วยหนองน้ำ ความหนาแน่นของประชากรสูง โดยเฉพาะบริเวณสามเหลี่ยมปากแม่น้ำคงคา มีสารอินทรีย์จำนวนมากในน้ำ มลพิษทางน้ำตลอดทั้งปีจากน้ำเสียและอุจจาระ มาตรฐานการครองชีพที่ต่ำ และพิธีกรรมทางศาสนาและลัทธิต่างๆ ของประชากร

ในประวัติศาสตร์การระบาดของโรคอหิวาตกโรค สามารถแบ่งได้ 4 ช่วงเวลา

ระยะที่ 1 – จนถึงปี พ.ศ. 2360 เมื่อโรคอหิวาตกโรคระบาดเฉพาะในเอเชียตะวันออกและเอเชียใต้เท่านั้น โดยส่วนใหญ่อยู่ในอินเดีย และไม่ได้แพร่กระจายออกไปนอกเขตพื้นที่

ระยะที่ 2 - ตั้งแต่ปี 1817 ถึง 1926 ด้วยการก่อตั้งความสัมพันธ์ทางเศรษฐกิจที่กว้างขวางและอื่น ๆ ระหว่างอินเดียกับยุโรปและประเทศอื่น ๆ โรคอหิวาตกโรคได้แผ่ขยายออกไปนอกอินเดียและแพร่กระจายไปตามเส้นทางของความสัมพันธ์ทางเศรษฐกิจและศาสนาทำให้เกิดโรคระบาด 6 ครั้งซึ่งคร่าชีวิตผู้คนไปหลายล้านคน รัสเซียเป็นประเทศแรกในยุโรปที่โรคอหิวาตกโรคแพร่กระจาย ตั้งแต่ปี 1823 ถึง 1926 รัสเซียประสบกับโรคอหิวาตกโรค 57 ปี ในช่วงเวลานี้ผู้คนมากกว่า 5.6 ล้านคนล้มป่วยด้วยโรคอหิวาตกโรคและ 2.14 ล้านคนเสียชีวิตจากโรคนี้ ("40%)

ระยะที่ 3 - ระหว่างปี 1926 ถึง 1961 โรคอหิวาตกโรคกลับมาระบาดอีกครั้ง และช่วงที่โรคนี้เริ่มระบาดก็ดูเหมือนจะดีขึ้น ดูเหมือนว่าการพัฒนาระบบสมัยใหม่ในการทำความสะอาดน้ำดื่ม การกำจัดและฆ่าเชื้อในน้ำเสีย และการพัฒนามาตรการป้องกันอหิวาตกโรคโดยเฉพาะ รวมถึงการจัดตั้งบริการกักกันโรค จะทำให้ประเทศต่างๆ ทั่วโลกได้รับการปกป้องจากการรุกรานของโรคอหิวาตกโรคอีกครั้ง

ระยะที่สี่เริ่มขึ้นในปี 2504 และยังคงดำเนินต่อไปจนถึงปัจจุบัน ระยะที่เจ็ดไม่ได้เริ่มขึ้นในอินเดีย แต่เกิดขึ้นในอินโดนีเซีย แพร่กระจายอย่างรวดเร็วไปยังฟิลิปปินส์ จีน ประเทศในแถบอินโดจีน และแพร่กระจายไปยังประเทศอื่นๆ ในเอเชีย แอฟริกา และยุโรป ลักษณะเฉพาะของการระบาดใหญ่ครั้งนี้ ได้แก่ ประการแรก เกิดจากเชื้อ Cholera Vibrio สายพันธุ์พิเศษที่เรียกว่า V. cholerae eltor ซึ่งจนถึงปี 2504 ยังไม่มีการรับรองอย่างเป็นทางการว่าเป็นสาเหตุของอหิวาตกโรค ประการที่สอง ในแง่ของระยะเวลา การระบาดใหญ่ครั้งนี้รุนแรงกว่าการระบาดใหญ่ครั้งก่อนๆ ทั้งหมด ประการที่สาม เกิดขึ้นเป็น 2 รอบ รอบแรกกินเวลานานจนถึงปี พ.ศ. 2533 และรอบที่สองเริ่มในปี พ.ศ. 2534 และครอบคลุมหลายประเทศในอเมริกาใต้และอเมริกาเหนือ รวมทั้งสหรัฐอเมริกา ซึ่งไม่พบการระบาดของโรคอหิวาตกโรคเลยนับตั้งแต่ พ.ศ. 2409 ตั้งแต่ปี พ.ศ. 2504 ถึง พ.ศ. 2539 มีผู้ป่วยโรคอหิวาตกโรค 3,943,239 คนใน 146 ประเทศ

Vibrio cholerae ซึ่งเป็นสาเหตุของอหิวาตกโรค ถูกค้นพบในปี พ.ศ. 2426 ในช่วงการระบาดใหญ่ครั้งที่ 5 โดย R. Koch แต่ Vibrio นั้นถูกค้นพบครั้งแรกในอุจจาระของคนไข้ที่มีอาการท้องเสียในปี พ.ศ. 2397 โดย F. Pacini

V. cholerae เป็นแบคทีเรียในวงศ์ Vibrionaceae ซึ่งประกอบด้วยแบคทีเรียหลายสกุล (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium) สกุล Vibrio มีมากกว่า 25 ชนิดตั้งแต่ปี 1985 โดยชนิดที่สำคัญที่สุดสำหรับมนุษย์ ได้แก่ V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus และ V. fluvialis

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

ลักษณะสำคัญของสกุล Vibrio

แบคทีเรียแกรมลบแท่งโค้งหรือตรง ไม่สร้างสปอร์และแคปซูล สั้น เส้นผ่านศูนย์กลาง 0.5 ไมโครเมตร และยาว 1.5-3.0 ไมโครเมตร เคลื่อนที่ได้ (V. cholerae เป็นแบคทีเรียที่มีเซลล์เดียว บางสปีชีส์มีแฟลกเจลลาที่มีขั้วสองเซลล์หรือมากกว่า) เจริญเติบโตได้ดีและรวดเร็วในอาหารเลี้ยงเชื้อทั่วไป เป็นคีโมออร์กาโนโทรฟ และหมักคาร์โบไฮเดรตเพื่อผลิตกรดโดยไม่มีก๊าซ (กลูโคสจะถูกหมักผ่านเส้นทางเอ็มบเดน-เมเยอร์ฮอฟ) ออกซิเดสเป็นบวก สร้างอินโดล รีดิวซ์ไนเตรตเป็นไนไตรต์ (V. cholerae ให้ปฏิกิริยาไนโตรโซอินโดลในเชิงบวก) ย่อยเจลาติน มักให้ปฏิกิริยาโวเกส-พรอสเคาเออร์ในเชิงบวก (กล่าวคือ สร้างอะซิทิลเมทิลคาร์บินอล) ไม่มียูรีเอส ไม่สร้าง H2S มีไลซีนและออร์นิทีนดีคาร์บอกซิเลส แต่ไม่มีอาร์จินีนไดไฮโดรเลส ลักษณะเด่นของสกุล Vibrio คือ สายพันธุ์ แบคทีเรีย ส่วนใหญ่มีความไว ต่อยา 0/129 (2,4-diamino-6,7-diazopropylpteridine) ในขณะที่ตัวแทนของวงศ์ Pseudomonadaceae และ Enterobacteriaceae ก็มีความต้านทานต่อยาตัวนี้ Vibrios เป็นแบคทีเรียที่มีอากาศและแบคทีเรียที่ไม่มีอากาศ อุณหภูมิที่เหมาะสมในการเจริญเติบโตคือ 18-37 องศาเซลเซียส ค่า pH 8.6-9.0 (เติบโตในช่วง pH 6.0-9.6) บางชนิด (halophiles) ไม่เจริญเติบโตในสภาวะที่ไม่มี NaCl ปริมาณ G + C ใน DNA คือ 40-50 โมล % (สำหรับ V. cholerae ประมาณ 47 โมล %) การทดสอบทางชีวเคมีใช้เพื่อแยกความแตกต่างภายในวงศ์ Vibrionaceae จากสกุล Aeromonas และ Plesiomonas ที่มีสัณฐานวิทยาคล้ายคลึงกัน รวมถึงเพื่อแยกความแตกต่างจากวงศ์ Enterobacteriaceae

เชื้ออหิวาตกโรควิบริโอแตกต่างจากเชื้อในวงศ์ Pseudomonadaceae ตรงที่เชื้อจะหมักกลูโคสได้เฉพาะผ่านเส้นทาง Embden-Meyerhof (โดยไม่เกี่ยวข้องกับ O2) ในขณะที่เชื้ออหิวาตกโรคจะบริโภคกลูโคสได้เฉพาะเมื่อมี O2 ความแตกต่างระหว่างเชื้อทั้งสองนี้สามารถเปิดเผยได้อย่างง่ายดายบนอาหารเลี้ยงเชื้อ Hugh-Leifson อาหารเลี้ยงเชื้อประกอบด้วยวุ้นสารอาหาร กลูโคส และอินดิเคเตอร์ การหว่านจะทำเป็น 2 คอลัมน์โดยใช้อาหารเลี้ยงเชื้อ Hugh-Leifson โดยคอลัมน์หนึ่งจะเติมปิโตรเลียมเจลลี (เพื่อสร้างสภาวะที่ไม่ใช้ออกซิเจน) ในกรณีของการเติบโตของเชื้ออหิวาตกโรควิบริโอ สีของอาหารเลี้ยงเชื้อจะเปลี่ยนไปในหลอดทดลองทั้งสองหลอด ส่วนในกรณีของการเติบโตของเชื้อ pseudomonad จะเปลี่ยนไปเฉพาะในหลอดทดลองที่ไม่มีปิโตรเลียมเจลลี (สภาวะที่ต้องใช้ออกซิเจน)

เชื้ออหิวาตกโรค Vibrio ไม่ต้องการสารอาหารมากนัก เชื้อสามารถขยายพันธุ์ได้ดีและรวดเร็วในน้ำเปปโตน (PV) ที่มีความเป็นด่าง 1% (pH 8.6-9.0) ที่มีโซเดียมคลอไรด์ 0.5-1.0% ซึ่งเร็วกว่าแบคทีเรียชนิดอื่น ๆ เพื่อยับยั้งการเติบโตของ Proteus ขอแนะนำให้เติมโพแทสเซียมเทลลูไรต์ (เจือจางครั้งสุดท้าย 1:100,000) ลงใน PV 1% PV 1% เป็นอาหารเสริมที่ดีที่สุดสำหรับเชื้ออหิวาตกโรค Vibrio ในระหว่างการเจริญเติบโต เชื้อจะสร้างฟิล์มสีเทาอ่อน ๆ หลวม ๆ บนพื้นผิวของ PV หลังจากผ่านไป 6-8 ชั่วโมง ซึ่งจะถูกทำลายได้ง่ายเมื่อเขย่าและตกลงไปที่ก้นเป็นแผ่น PV กลายเป็นสีขุ่นปานกลาง มีการเสนอให้ใช้สื่อผสมแบบเลือกสรรต่างๆ เพื่อแยกเชื้ออหิวาตกโรค ได้แก่ วุ้นอัลคาไลน์ วุ้นเกลือน้ำดี อัลบูมิเนตอัลคาไลน์ วุ้นอัลคาไลน์ผสมเลือด แล็กโทสซูโครส และสื่อผสมอื่นๆ สื่อผสมที่ดีที่สุดคือ TCBS (ไธโอซัลเฟตซิเตรต-โบรโมไทมอลซูโครส) และการปรับเปลี่ยน อย่างไรก็ตาม มักใช้ MPA อัลคาไลน์เป็นส่วนใหญ่ ซึ่งเชื้ออหิวาตกโรคจะสร้างโคโลนีรูปแผ่นดิสก์ที่เรียบ โปร่งใสเหมือนแก้ว มีสีออกฟ้า และมีความหนืดสม่ำเสมอ

เมื่อหว่านโดยการฉีดเข้าไปในคอลัมน์เจลาติน วิบริโอจะทำให้เกิดการเหลวไหลออกมาจากพื้นผิวในรูปของฟองอากาศ จากนั้นเป็นรูปกรวย และในที่สุดก็เป็นชั้นๆ หลังจากผ่านไป 2 วัน

ในนม วิบริโอจะขยายตัวอย่างรวดเร็ว ทำให้เกิดการแข็งตัวของเลือดหลังจากผ่านไป 24-48 ชั่วโมง จากนั้นจึงเกิดเปปโตไนเซชันในนม และหลังจากนั้น 3-4 วัน วิบริโอจะตายเนื่องจากค่า pH ของนมเปลี่ยนไปเป็นด้านที่เป็นกรด

B. Heiberg พิจารณาจากความสามารถในการหมักแมนโนส ซูโครส และอะราบิโนส และแบ่งวิบริโอทั้งหมด (อหิวาตกโรคและสารคล้ายอหิวาตกโรค) ออกเป็นหลายกลุ่ม ซึ่งปัจจุบันมีจำนวนถึง 8 กลุ่ม

Vibrio cholerae จัดอยู่ในกลุ่มแรกของกลุ่ม Heiberg

วิบริโอที่มีลักษณะคล้ายกับวิบริโออหิวาตกโรคทั้งในด้านสัณฐานวิทยา วัฒนธรรม และชีวเคมีนั้นถูกเรียกต่างกันไป ได้แก่ พาราคอเลอรา วิบริโอคล้ายคอเลอรา วิบริโอ NAG (วิบริโอที่ไม่เกาะกลุ่มกัน) วิบริโอที่ไม่จัดอยู่ในกลุ่ม O1 นามสกุลนี้เน้นย้ำถึงความสัมพันธ์ของวิบริโออหิวาตกโรคได้ชัดเจนที่สุด ตามที่ A. Gardner และ K. Venkat-Raman ได้ระบุไว้ วิบริโออหิวาตกโรคและวิบริโอคล้ายคอเลอรามีแอนติเจน H ร่วมกัน แต่แตกต่างกันที่แอนติเจน O ตามแอนติเจน O วิบริโออหิวาตกโรคและวิบริโอคล้ายคอเลอราแบ่งออกเป็นกลุ่ม O จำนวน 139 กลุ่ม แต่จำนวนของวิบริโอเหล่านี้ก็เพิ่มขึ้นเรื่อยๆ วิบริโออหิวาตกโรคจัดอยู่ในกลุ่ม O1 มีแอนติเจน A ทั่วไปและแอนติเจนจำเพาะสองชนิดคือ B และ C ซึ่งแยก V. cholerae ได้สามซีโรไทป์ ได้แก่ ซีโรไทป์ Ogawa (AB) ซีโรไทป์ Inaba (AC) และซีโรไทป์ Hikoshima (ABC) Vibrio cholera ในระยะการแตกตัวจะมีแอนติเจน OR ในเรื่องนี้ จะใช้ซีรัม O ซีรัม OR และซีรัมจำเพาะชนิด Inaba และ Ogawa เพื่อระบุ V. cholerae

ในปี 1992-1993 โรคอหิวาตกโรคระบาดครั้งใหญ่เริ่มขึ้นในบังกลาเทศ อินเดีย จีน มาเลเซีย และประเทศอื่นๆ โดยเชื้อก่อโรคคือซีโรวาร์ชนิดใหม่ที่ไม่เคยรู้จักมาก่อนของสายพันธุ์ Vibrio cholerae เชื้อนี้แตกต่างจาก V. cholerae O1 ตรงที่มีลักษณะแอนติเจน คือมีแอนติเจน 0139 และแคปซูลโพลีแซ็กคาไรด์ และไม่เกาะกลุ่มกับซีรั่ม O ชนิดอื่น คุณสมบัติทางสัณฐานวิทยาและชีวภาพอื่นๆ ทั้งหมด รวมถึงความสามารถในการทำให้เกิดโรคอหิวาตกโรค เช่น การสังเคราะห์เอ็กโซทอกซิน-โคเลอโรเจน พบว่ามีความคล้ายคลึงกับคุณสมบัติของ V. cholerae O1 ดังนั้น เชื้อก่อโรคชนิดใหม่ V. cholerae 0139 จึงเกิดขึ้นจากการกลายพันธุ์ที่ทำให้แอนติเจน O เปลี่ยนไป เชื้อนี้มีชื่อว่า V. cholerae 0139 เบงกอล

คำถามเกี่ยวกับความสัมพันธ์ระหว่างวิบริโอที่คล้ายอหิวาตกโรคกับ V. cholerae นั้นยังไม่ชัดเจนมาเป็นเวลานาน อย่างไรก็ตาม การเปรียบเทียบระหว่าง V. cholerae และวิบริโอที่คล้ายอหิวาตกโรค (NAG-vibrios) ด้วยลักษณะเด่นกว่า 70 ประการ เผยให้เห็นความคล้ายคลึงกันถึง 90% และระดับความคล้ายคลึงของดีเอ็นเอระหว่าง V. cholerae และวิบริโอที่คล้ายอหิวาตกโรคที่ศึกษาอยู่ที่ 70-100% ดังนั้น วิบริโอที่คล้ายอหิวาตกโรคจึงรวมเข้าเป็นสปีชีส์เดียวกับวิบริโออหิวาตกโรค ซึ่งแตกต่างกันหลักๆ ในส่วนของแอนติเจน O ซึ่งเรียกว่าวิบริโอของกลุ่มที่ไม่ใช่ 01 - V. cholerae non-01

เชื้อแบคทีเรีย V. cholerae แบ่งออกเป็น 4 ไบโอไทป์ ได้แก่ V. cholerae, V. eltor, V. proteus และ V. albensis ลักษณะของไวรัส El Tor เป็นที่ถกเถียงกันมานานหลายปีแล้ว โดย F. Gottschlich แยกไวรัสชนิดนี้ได้ในปี 1906 ที่สถานีกักกันไวรัส El Tor จากร่างของผู้แสวงบุญที่เสียชีวิตด้วยโรคบิด F. Gottschlich แยกไวรัสสายพันธุ์ดังกล่าวได้หลายสายพันธุ์ ซึ่งมีคุณสมบัติไม่ต่างจากไวรัส Cholera Vibrio ในทุกประการ และจับตัวกันเป็นก้อนโดย Cholera O-serum อย่างไรก็ตาม เนื่องจากไม่มีไวรัส Cholera ในหมู่ผู้แสวงบุญในเวลานั้น และไม่น่าจะเป็นไปได้ที่ไวรัส Cholera Vibrio จะแพร่พันธุ์ในระยะยาว ดังนั้น คำถามเกี่ยวกับบทบาทที่เป็นไปได้ของ V. eltor ในการเกิดโรคอหิวาตกโรคจึงยังคงเป็นที่ถกเถียงกันมาเป็นเวลานาน นอกจากนี้ ไวรัส El Tor Vibrio มีฤทธิ์ทำให้เม็ดเลือดแดงแตก ซึ่งแตกต่างจาก V. cholerae อย่างไรก็ตาม ในปี 1937 วิบริโอชนิดนี้ทำให้เกิดการระบาดของอหิวาตกโรคครั้งใหญ่และรุนแรงบนเกาะสุลาเวสี (อินโดนีเซีย) โดยมีอัตราการเสียชีวิตมากกว่า 60% ในที่สุด ในปี 1961 มันได้กลายเป็นตัวการของการระบาดใหญ่ครั้งที่ 7 และในปี 1962 คำถามเกี่ยวกับลักษณะของอหิวาตกโรคก็ได้รับการแก้ไขในที่สุด ความแตกต่างระหว่าง V. cholerae และ V. eltor เกี่ยวข้องกับลักษณะเฉพาะบางประการเท่านั้น ในคุณสมบัติอื่นๆ ทั้งหมด V. eltor ไม่แตกต่างโดยพื้นฐานจาก V. cholerae นอกจากนี้ ปัจจุบันได้มีการพิสูจน์แล้วว่าไบโอไทป์ของ V. proteus (V.finklerpriori) ประกอบด้วยกลุ่มวิบริโอทั้งหมด ยกเว้นกลุ่ม 01 (และปัจจุบันคือ 0139) ซึ่งก่อนหน้านี้เรียกว่า NAG vibrios ไบโอไทป์ของ V. albensis ถูกแยกได้จากแม่น้ำเอลเบและมีความสามารถในการเรืองแสง แต่เมื่อสูญเสียไป ก็ไม่ต่างจาก V. proteus จากข้อมูลเหล่านี้ ในปัจจุบัน แบคทีเรีย Vibrio cholerae แบ่งออกเป็นไบโอไทป์ 4 ชนิด ได้แก่ V. cholerae 01 cholerae, V. cholerae eltor, V. cholerae 0139 bengal และ V. cholerae non 01 โดยไบโอวาร์ 3 ชนิดแรกอยู่ในซีโรวาร์ 2 ชนิด คือ 01 และ 0139 ไบโอวาร์ชนิดสุดท้ายประกอบด้วยไบโอไทป์ก่อนหน้านี้ คือ V. proteus และ V. albensis และประกอบด้วยซีโรวาร์อื่นๆ ของวิบริโออีกมากมายที่ไม่ได้เกาะกลุ่มกันโดยซีโรวาร์ 01 และ 0139 นั่นคือ วิบริโอ NAG

ปัจจัยการก่อโรคของเชื้ออหิวาตกโรค

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

การเคลื่อนตัวของสารเคมีของ Vibrio cholerae

ด้วยความช่วยเหลือของคุณสมบัติเหล่านี้ วิบริโอจะโต้ตอบกับเซลล์เยื่อบุผิว ในวิบริโอกลายพันธุ์ของอหิวาตกโรค (ซึ่งสูญเสียความสามารถในการเคลื่อนที่แบบเคโมแท็กซ์) ความรุนแรงจะลดลงอย่างมาก ในวิบริโอกลายพันธุ์ของม็อบ (ซึ่งสูญเสียการเคลื่อนไหว) ความรุนแรงจะหายไปหมดหรือลดลงอย่างรวดเร็ว

ปัจจัยการยึดเกาะและการล่าอาณานิคมซึ่งวิบริโอเกาะติดกับไมโครวิลลีและล่าอาณานิคมในเยื่อเมือกของลำไส้เล็ก ปัจจัยการยึดเกาะได้แก่ มิวซิเนส เฮแมกกลูตินิน/โปรตีเอสที่ละลายน้ำได้ นิวรามินิเดส เป็นต้น ปัจจัยเหล่านี้ส่งเสริมการยึดเกาะและการล่าอาณานิคมโดยการทำลายสารที่เป็นส่วนหนึ่งของเมือก เฮแมกกลูตินิน/โปรตีเอสที่ละลายน้ำได้ส่งเสริมการแยกวิบริโอออกจากตัวรับของเซลล์เยื่อบุผิวและออกจากลำไส้สู่สภาพแวดล้อมภายนอก ทำให้มั่นใจได้ว่าจะแพร่กระจายอย่างรวดเร็ว นิวรามินิเดสทำให้พันธะระหว่างโคเลอราเจนและเซลล์เยื่อบุผิวแข็งแรงขึ้น และช่วยให้สารพิษแทรกซึมเข้าสู่เซลล์ได้ ซึ่งทำให้อาการท้องเสียรุนแรงขึ้น

พิษอหิวาตกโรค คือ สารก่อโรคอหิวาตกโรค

สิ่งที่เรียกว่าสารพิษใหม่ที่สามารถทำให้เกิดอาการท้องเสียแต่ไม่มีความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมหรือภูมิคุ้มกันกับโคเลอราเจน

ปัจจัยที่ทำให้เกิดโรคผิวหนังและเลือดออก ลักษณะของปัจจัยที่เป็นพิษเหล่านี้และบทบาทของปัจจัยเหล่านี้ในการเกิดโรคอหิวาตกโรคยังไม่ได้รับการศึกษาอย่างเพียงพอ

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ]

เอนโดทอกซินของ Vibrio cholerae

ไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ของ V. cholerae มีคุณสมบัติเป็นพิษต่อร่างกายอย่างรุนแรงและทำให้เกิดอาการพิษทั่วไป

ปัจจัยก่อโรคหลักที่ระบุไว้ของ cholera vibrio คือ exotoxin choleragen (CTX AB) ซึ่งกำหนดการก่อโรคนี้ โมเลกุลของอหิวาตกโรคประกอบด้วยสองส่วนคือ A และ B ส่วน A ประกอบด้วยเปปไทด์สองส่วนคือ A1 และ A2 มีคุณสมบัติเฉพาะของอหิวาตกโรคและทำให้มีคุณสมบัติเป็นซุปเปอร์แอนติเจน ส่วน B ประกอบด้วยซับยูนิตที่เหมือนกัน 5 ซับยูนิต ทำหน้าที่สองอย่าง: 1) จดจำตัวรับ (monosialoganglioside) ของ enterocyte และจับกับตัวรับ 2) สร้างช่องไฮโดรโฟบิกภายในเยื่อหุ้มเซลล์เพื่อให้ซับยูนิต A ผ่านได้ เปปไทด์ A2 ทำหน้าที่จับกับเศษส่วน A และ B หน้าที่ของพิษที่แท้จริงคือโดยเปปไทด์ Aj (ADP-ribosyltransferase) โดยเปปไทด์จะโต้ตอบกับ NAD ทำให้เกิดการไฮโดรไลซิส ADP-ribose ที่เกิดขึ้นจะจับกับซับยูนิตควบคุมของอะดีไนเลตไซเคลส ซึ่งจะทำให้เกิดการยับยั้งการไฮโดรไลซิสของ GTP คอมเพล็กซ์ GTP + อะดีไนเลตไซเคลสที่เกิดขึ้นจะทำให้เกิดการไฮโดรไลซิสของ ATP พร้อมกับการก่อตัวของ cAMP (อีกเส้นทางหนึ่งสำหรับการสะสมของ cAMP คือการยับยั้งเอนไซม์ที่ไฮโดรไลซิส cAMP เป็น 5-AMP โดยโคเลอราเจน) การแสดงออกของหน้าที่ของยีน ctxAB ที่เข้ารหัสการสังเคราะห์เอ็กโซทอกซินนั้นขึ้นอยู่กับหน้าที่ของยีนก่อโรคอื่นๆ จำนวนมาก โดยเฉพาะอย่างยิ่งยีน tcp (ที่เข้ารหัสการสังเคราะห์ของพิลียึดเกาะที่ควบคุมโดยสารพิษ - TCAP) ยีนควบคุม toxR, toxS และ toxT, hap (เฮแมกกลูตินิน/โปรตีเอสที่ละลายน้ำได้) และยีนนิวรามินิเดส (นิวรามินิเดส) ดังนั้น การควบคุมทางพันธุกรรมของการก่อโรคของ V. cholerae จึงมีความซับซ้อน

เมื่อพิจารณาแล้ว พบว่ามีเกาะก่อโรคอยู่ 2 เกาะในโครโมโซม V. cholerae เกาะหนึ่งคือจีโนมของฟาจแปลงปานกลางแบบเส้นใย CTXφ และอีกเกาะหนึ่งคือจีโนมของฟาจแปลงปานกลางแบบเส้นใย VPIcp เกาะก่อโรคเหล่านี้แต่ละเกาะประกอบด้วยตลับยีนที่ระบุไว้ในโปรเฟส ซึ่งกำหนดความก่อโรคของเชื้อก่อโรคอหิวาตกโรค โปรฟาจ CTXφ มียีน CTX ยีนของสารพิษใหม่ zot และ ace ยีน ser (การสังเคราะห์ adhesin) และยีน ortU (การสังเคราะห์ผลิตภัณฑ์ที่มีหน้าที่ไม่ทราบ) ตลับยีนนี้ยังรวมถึงยีน nei และบริเวณฟาจ RS2 ซึ่งเข้ารหัสสำหรับการจำลองและการรวมโปรฟาจเข้าในโครโมโซม ยีน zot, ace และ ortU เป็นสิ่งจำเป็นต่อการสร้างไวรัสฟาจเมื่อโปรฟาจถูกแยกออกจากโครโมโซมของเชื้อก่อโรค

โพรฟาจ VPIcp มียีน TCP (ที่เข้ารหัสการผลิตพิลี (โปรตีน TCPA)), toxT, toxR, act (ปัจจัยการล่าอาณานิคมเพิ่มเติม, ยีนการเคลื่อนที่ (อินทิเกรเซสและทรานสโพเซส)) การถอดรหัสยีนก่อโรคถูกควบคุมโดยยีนควบคุมสามยีน ได้แก่ toxR, toxS และ toxT ยีนเหล่านี้จะเปลี่ยนกิจกรรมของยีนก่อโรคมากกว่า 20 ยีน ได้แก่ ctxAB, tcp และยีนอื่นๆ ในระดับการถอดรหัส ยีนควบคุมหลักคือยีน toxR ความเสียหายหรือการขาดหายไปของยีนจะนำไปสู่ภาวะไม่ก่อโรคหรือทำให้การผลิต CTX และ TCPA ซึ่งเป็นสารพิษของอหิวาตกโรคลดลงมากกว่า 100 เท่า อาจเป็นไปได้ว่านี่เป็นวิธีที่ยีนก่อโรคถูกควบคุมอย่างประสานงานกันในเกาะก่อโรคที่เกิดจากฟาจที่เปลี่ยนสภาพที่อุณหภูมิห้องและในแบคทีเรียสายพันธุ์อื่นๆ ได้รับการยืนยันแล้วว่ามีโปรฟาจ K139 อีกตัวหนึ่งในโครโมโซมของ V. cholerae eltor แต่ยังคงมีการศึกษาจีโนมของโปรฟาจดังกล่าวน้อยมาก

ยีน hap อยู่บนโครโมโซม ดังนั้นความรุนแรง (ความก่อโรค) และความสามารถในการแพร่ระบาดของ V. cholerae จึงถูกกำหนดโดยยีน 4 ตัว ได้แก่ ctxAB, tcp, toxR และ hap

มีวิธีการต่างๆ มากมายที่สามารถนำมาใช้เพื่อตรวจจับความสามารถของ V. cholerae ในการผลิตคอเลอเรเจน

การทดสอบทางชีวภาพกับกระต่าย เมื่อฉีดเชื้ออหิวาตกโรคเข้ากล้ามเนื้อกระต่ายที่กินนมแม่ (อายุไม่เกิน 2 สัปดาห์) กระต่ายจะมีอาการผิดปกติทางระบบย่อยอาหาร ได้แก่ ท้องเสีย ขาดน้ำ และกระต่ายตาย

การตรวจหาโคเลอราเจนโดยตรงด้วย PCR, IFM หรือปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันทำลายเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ (โคเลอราเจนจับกับ Gmj ของเม็ดเลือดแดง และสลายตัวเมื่อเติมแอนติบอดีและส่วนประกอบต่อต้านพิษ) อย่างไรก็ตาม การตรวจหาความสามารถในการผลิตสารพิษเพียงอย่างเดียวไม่เพียงพอที่จะระบุอันตรายจากการระบาดของสายพันธุ์ดังกล่าวได้ ดังนั้นจึงจำเป็นต้องตรวจหาการมีอยู่ของยีน hap ดังนั้น วิธีที่ดีที่สุดและเชื่อถือได้มากที่สุดในการแยกแยะสายพันธุ์ก่อพิษและระบาดของวิบริโออหิวาตกโรคของกลุ่มซีโรกรุ๊ป 01 และ 0139 คือ PCR โดยใช้ไพรเมอร์เฉพาะเพื่อตรวจหายีนก่อโรคทั้ง 4 ยีน ได้แก่ ctxAB, tcp, toxR และ hap

ความสามารถของ V. cholerae อื่นที่ไม่ใช่ซีโรกรุ๊ป 01 หรือ 0139 ในการก่อให้เกิดโรค ท้องร่วงแบบสุ่มหรือเป็นกลุ่ม ในมนุษย์อาจเกิดจากการมีอยู่ของเอนเทอโรทอกซินประเภท LT หรือ ST ซึ่งกระตุ้นระบบอะดีไนเลตหรือกัวนิเลตไซเคลสตามลำดับ หรือเกิดจากการมีอยู่ของยีน ctxAB เพียงอย่างเดียวแต่ไม่มียีน hap

ระหว่างการระบาดครั้งที่ 7 เชื้อ V. cholerae ที่มีระดับความรุนแรงแตกต่างกันได้ถูกแยกออกมา ได้แก่ เชื้อก่อโรค (ก่อโรคร้ายแรง) เชื้อก่อโรคเล็กน้อย (ก่อโรคร้ายแรงน้อย) และไม่ก่อโรค (ไม่ก่อโรค) โดยทั่วไปแล้ว เชื้อ V. cholerae ที่ไม่ก่อโรคจะมีฤทธิ์ทำลายเม็ดเลือดแดง ไม่ถูกทำลายโดย HDF(5) ซึ่งเป็นแบคทีเรียโฟจวินิจฉัยโรคอหิวาตกโรค และไม่ก่อให้เกิดโรคในมนุษย์

สำหรับการตรวจชนิดฟาจของ V. cholerae 01 (รวมถึง El Tor) S. Mukherjee ได้เสนอชุดของฟาจ ซึ่งต่อมาได้มีการเสริมด้วยฟาจชนิดอื่นๆ ในรัสเซีย ชุดของฟาจดังกล่าว (1-7) ช่วยให้สามารถแยกแยะประเภทของฟาจระหว่าง V. cholerae 0116 ได้ สำหรับการระบุ V. cholerae El Tor ที่ก่อให้เกิดพิษและไม่ก่อให้เกิดพิษ แทนที่จะใช้ HDF-3, HDF-4 และ HDF-5 ปัจจุบัน รัสเซียได้เสนอให้ใช้ฟาจ CTX* (ไลส์ ท็อกซิเจนิก วิบริโอ El Tor) และ CTX" (ไลส์ ท็อกซิเจนิก วิบริโอ El Tor)

[ 19 ], [ 20 ], [ 21 ]

ความต้านทานต่อเชื้อก่อโรคอหิวาตกโรค

แบคทีเรียอหิวาตกโรคสามารถอยู่รอดได้ดีในอุณหภูมิต่ำ โดยสามารถอยู่รอดได้ในน้ำแข็งนานถึง 1 เดือน ในน้ำทะเล - นานถึง 47 วัน ในน้ำแม่น้ำ - นาน 3-5 วันถึงหลายสัปดาห์ ในน้ำแร่ต้มสุกสามารถอยู่รอดได้นานกว่า 1 ปี ในดิน - นาน 8 วันถึง 3 เดือน ในอุจจาระสด - นานถึง 3 วัน ในผลิตภัณฑ์ต้ม (ข้าว บะหมี่ เนื้อ โจ๊ก ฯลฯ) สามารถอยู่รอดได้ 2-5 วัน ในผักสด - 2-4 วัน ในผลไม้ - 1-2 วัน ในนมและผลิตภัณฑ์จากนม - 5 วัน เมื่อเก็บไว้ในที่เย็น ระยะเวลาการอยู่รอดจะเพิ่มขึ้น 1-3 วัน ในผ้าลินินที่ปนเปื้อนอุจจาระ พวกมันอยู่รอดได้นานถึง 2 วัน และในวัสดุที่ชื้น - หนึ่งสัปดาห์ แบคทีเรียอหิวาตกโรคสามารถตายได้ภายใน 5 นาทีที่อุณหภูมิ 80 °C และตายทันทีที่อุณหภูมิ 100 °C พวกมันมีความไวต่อกรดสูง พวกมันจะตายภายใน 5-15 นาทีภายใต้อิทธิพลของคลอรามีนและสารฆ่าเชื้ออื่นๆ พวกมันไวต่อความแห้งและแสงแดดโดยตรง แต่พวกมันสามารถอยู่รอดได้ดีและเป็นเวลานาน และสามารถขยายพันธุ์ในแหล่งน้ำเปิดและน้ำเสียที่มีสารอินทรีย์ในปริมาณมาก โดยมีค่า pH เป็นด่างและอุณหภูมิสูงกว่า 10-12 องศาเซลเซียส พวกมันไวต่อคลอรีนมาก: คลอรีนที่มีฤทธิ์ 0.3-0.4 มก./ล. ของน้ำใน 30 นาทีสามารถฆ่าเชื้ออหิวาตกโรคได้อย่างน่าเชื่อถือ

Vibrio ก่อโรคในมนุษย์ที่ไม่ใช่สายพันธุ์ Vibrio Cholerae

สกุล Vibrio มีมากกว่า 25 ชนิด ซึ่งนอกจาก V. cholerae แล้ว ยังมีอย่างน้อย 8 ชนิดที่สามารถทำให้เกิดโรคในมนุษย์ได้ ได้แก่ V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus, V. fluvialis, V. fumissii, V. mimicus, V. damsela และ V. hollisae เชื้อ Vibrio เหล่านี้อาศัยอยู่ในทะเลและอ่าว การติดเชื้อเกิดขึ้นได้จากการว่ายน้ำหรือกินอาหารทะเล พบว่าเชื้อ Vibrio ในกลุ่มอหิวาตกโรคและกลุ่มที่ไม่ใช่อหิวาตกโรคสามารถทำให้เกิดโรคกระเพาะและลำไส้อักเสบได้ เชื้อ Vibrio ในกลุ่มที่ไม่ใช่อหิวาตกโรคสามารถทำให้เกิดการติดเชื้อที่แผลได้ ความสามารถนี้พบได้ใน V. cholerae กลุ่ม 01 และกลุ่มที่ไม่ใช่ 01 ได้แก่ V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. mimicus, V. damsela และ V. vulnificus ทำให้เกิดกระบวนการอักเสบในเนื้อเยื่ออ่อนเมื่อได้รับความเสียหายจากเปลือกของสัตว์ทะเลหรือเมื่อสัมผัสน้ำทะเลที่ติดเชื้อโดยตรง

จากรายชื่อแบคทีเรียวิบริโอที่ก่อโรคที่ไม่ใช่อหิวาตกโรค แบคทีเรียที่น่าสนใจที่สุด ได้แก่ V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus และ V. fluvialis

V. parahaemolyticus - วิบริโอชนิดพาราเฮโมไลติก - ถูกแยกครั้งแรกในญี่ปุ่นในปี 1950 ระหว่างการระบาดของโรคอาหารเป็นพิษครั้งใหญ่ที่เกิดจากการบริโภคปลาซาร์ดีนกึ่งแห้ง (อัตราการตายอยู่ที่ 7.5%) เชื้อก่อโรคอยู่ในสกุล Vibrio โดย R. Sakazaki ในปี 1963 เขาแบ่งสายพันธุ์ที่ศึกษาออกเป็น 2 สปีชีส์: V. parahaemolyticus และ V. alginolyticus ทั้งสองสปีชีส์พบในน้ำทะเลชายฝั่งและในสิ่งมีชีวิตที่อาศัยอยู่ พวกมันเป็นพวกชอบเกลือ (ภาษากรีก hals แปลว่า เกลือ) ซึ่งแตกต่างจากวิบริโอทั่วไป วิบริโอที่ชอบเกลือจะไม่เติบโตในอาหารที่ไม่มี NaCl และขยายพันธุ์ได้ดีในความเข้มข้นสูง วิบริโอที่ชอบเกลือจะจัดอยู่ในกลุ่มสปีชีส์ตามความสามารถในการหมักซูโครส สร้างอะเซทิลเมทิลคาร์บินอล และขยายพันธุ์ใน PV ที่มี NaCl 10% ลักษณะทั้งหมดเหล่านี้มีอยู่ในสายพันธุ์ V. alginolyticus แต่ไม่มีใน V. parahaemolyticus

วิบริโอพาราเฮโมไลติกมีแอนติเจนสามประเภท ได้แก่ แอนติเจน H แฟลกเจลลาร์ที่ไม่ไวต่อความร้อน แอนติเจน O ทนความร้อนซึ่งไม่ถูกทำลายด้วยความร้อนถึง 120 °C เป็นเวลา 2 ชั่วโมง และแอนติเจน K บนพื้นผิวซึ่งถูกทำลายด้วยความร้อน วัฒนธรรมของ V. parahaemolyticus ที่แยกออกมาใหม่มีแอนติเจน K ที่กำหนดอย่างชัดเจนซึ่งปกป้องวิบริโอที่มีชีวิตจากการเกาะกลุ่มกันโดย O-sera ที่เป็นโฮโมโลกัส แอนติเจน H จะเหมือนกันสำหรับสายพันธุ์ทั้งหมด แต่แอนติเจน H ของโมโนทริคัสแตกต่างจากแอนติเจน H ของเพอริทริช ตามแอนติเจน O V. parahaemolyticus แบ่งออกเป็น 14 ซีโรกรุ๊ป ภายในซีโรกรุ๊ป วิบริโอถูกแบ่งออกเป็นซีโรไทป์ตามแอนติเจน K ซึ่งมีจำนวนทั้งหมด 61 ตัว โครงร่างแอนติเจนของ V. parahaemolyticus ได้รับการพัฒนาสำหรับสายพันธุ์ที่แยกได้จากมนุษย์เท่านั้น

ความก่อโรคของ V. parahaemolyticus เกี่ยวข้องกับความสามารถในการสังเคราะห์เฮโมไลซินซึ่งมีคุณสมบัติเป็นพิษต่อลำไส้ โดยสามารถตรวจพบด้วยวิธีคานากาวะ สาระสำคัญอยู่ที่ข้อเท็จจริงที่ว่า V. parahaemolyticus ซึ่งเป็นโรคในมนุษย์ ทำให้เกิดการแตกของเม็ดเลือดใสบนวุ้นที่มีโซเดียมคลอไรด์ 7% บนวุ้นที่มีโซเดียมคลอไรด์น้อยกว่า 5% การแตกของเม็ดเลือดเกิดจาก V. parahaemolyticus หลายสายพันธุ์ และบนวุ้นที่มีโซเดียมคลอไรด์ 7% - เฉพาะสายพันธุ์ที่มีคุณสมบัติก่อโรคต่อลำไส้เท่านั้น Vibrio parahaemolyticus พบได้ตามชายฝั่งทะเลญี่ปุ่น ทะเลแคสเปียน ทะเลดำ และทะเลอื่นๆ ทำให้เกิดการติดเชื้อพิษจากอาหาร และโรคคล้ายโรคบิด การติดเชื้อเกิดขึ้นเมื่อรับประทานอาหารทะเลดิบหรือกึ่งดิบที่ติดเชื้อ V- parahaemolyticus (ปลาทะเล หอยนางรม สัตว์จำพวกกุ้ง ฯลฯ)

ในบรรดาเชื้อวิบริโอที่ไม่ใช่อหิวาตกโรค 8 ชนิดที่กล่าวถึงข้างต้น เชื้อที่ก่อโรคในมนุษย์มากที่สุดคือ V. vulnificus ซึ่งถูกระบุครั้งแรกในปี 1976 ในชื่อ Beneckea vulnificus จากนั้นจึงจัดประเภทใหม่เป็น Vibrio vulnificus ในปี 1980 เชื้อนี้มักพบในน้ำทะเลและสิ่งมีชีวิตในน้ำทะเล และทำให้เกิดโรคต่างๆ ในมนุษย์ สายพันธุ์ของ V. vulnificus ที่มีต้นกำเนิดจากทะเลและทางคลินิกไม่แตกต่างกันทั้งในด้านลักษณะทางกายภาพและทางพันธุกรรม

การติดเชื้อแผลที่เกิดจาก V. vulnificus ลุกลามอย่างรวดเร็วและนำไปสู่การสร้างเนื้องอกซึ่งส่งผลให้เนื้อเยื่อตายในเวลาต่อมา โดยมีอาการไข้ หนาวสั่น ปวดอย่างรุนแรงบางครั้ง และในบางกรณีอาจต้องตัดแขนขาออก

พบว่า V. vulnificus สร้างสารพิษจากภายนอก การทดลองกับสัตว์แสดงให้เห็นว่าเชื้อก่อโรคนี้ก่อให้เกิดความเสียหายในบริเวณที่ได้รับผลกระทบอย่างรุนแรง โดยทำให้เกิดอาการบวมน้ำและเนื้อเยื่อตาย ตามมาด้วยการเสียชีวิต ปัจจุบันกำลังศึกษาบทบาทของสารพิษจากภายนอกในการเกิดโรค

นอกจากการติดเชื้อที่บาดแผลแล้ว V. vulnificus ยังทำให้เกิดปอดบวมในผู้จมน้ำและเยื่อบุโพรงมดลูกอักเสบในผู้หญิงหลังจากสัมผัสกับน้ำทะเลได้อีกด้วย การติดเชื้อที่รุนแรงที่สุดที่เกิดจาก V. vulnificus คือภาวะติดเชื้อในกระแสเลือดขั้นต้นซึ่งเกี่ยวข้องกับการกินหอยนางรมดิบ (และอาจรวมถึงสัตว์ทะเลอื่นๆ ด้วย) โรคนี้พัฒนาอย่างรวดเร็วมาก โดยผู้ป่วยจะมีอาการไม่สบาย มีไข้ หนาวสั่น และอ่อนแรง จากนั้นจึงเกิดความดันโลหิตต่ำอย่างรุนแรง ซึ่งเป็นสาเหตุหลักของการเสียชีวิต (อัตราการเสียชีวิตอยู่ที่ประมาณ 50%)

V. fluvialis ได้รับการระบุครั้งแรกว่าเป็นเชื้อก่อโรคกระเพาะและลำไส้อักเสบในปี 1981 โดยจัดอยู่ในกลุ่มย่อยของวิบริโอที่ไม่ก่อโรคอหิวาตกโรค ซึ่งมีเอนไซม์อาร์จินีนไดไฮโดรเลสแต่ไม่มีเอนไซม์เนทอร์นิทีนและไลซีนดีคาร์บอกซิเลส (V. fluvialis, V. furnissii, V. damsela หรือกล่าวอีกนัยหนึ่งคือ มีลักษณะทางฟีโนไทป์คล้ายกับ Aeromonas) V. fluvialis เป็นสาเหตุทั่วไปของโรคกระเพาะและลำไส้อักเสบ ซึ่งมาพร้อมกับอาการอาเจียนรุนแรง ท้องเสีย ปวดท้อง มีไข้ และขาดน้ำอย่างรุนแรงหรือปานกลาง ปัจจัยก่อโรคหลักคือเอนเทอโรทอกซิน

ระบาดวิทยาของโรคอหิวาตกโรค

แหล่งที่มาหลักของการติดเชื้อมีเพียงบุคคล - ผู้ป่วยอหิวาตกโรคหรือพาหะของเชื้อ Vibrio รวมถึงน้ำที่ปนเปื้อนเชื้อเหล่านี้ สัตว์ในธรรมชาติไม่มีเชื้ออหิวาตกโรค เส้นทางของการติดเชื้อคืออุจจาระและช่องปาก เส้นทางของการติดเชื้อ: ก) เส้นทางหลัก - ผ่านทางน้ำที่ใช้สำหรับดื่มอาบน้ำและของใช้ในครัวเรือน ข) การสัมผัสในครัวเรือน และ ค) ผ่านทางอาหาร โรคระบาดใหญ่และการระบาดใหญ่ของอหิวาตกโรคทั้งหมดเกี่ยวข้องกับน้ำ Vibrio ของเชื้ออหิวาตกโรคมีกลไกการปรับตัวที่ช่วยให้ประชากรของเชื้อมีอยู่ทั้งในร่างกายมนุษย์และในระบบนิเวศบางแห่งของแหล่งน้ำเปิด อาการท้องร่วงรุนแรงซึ่งเกิดจากเชื้อ Vibrio ของเชื้ออหิวาตกโรคนำไปสู่การทำความสะอาดลำไส้จากแบคทีเรียที่แข่งขันกันและมีส่วนทำให้เชื้อโรคแพร่กระจายอย่างกว้างขวางในสิ่งแวดล้อม โดยเฉพาะในน้ำเสียและในแหล่งน้ำเปิดที่เชื้อเหล่านี้ถูกทิ้ง ผู้ป่วยอหิวาตกโรคจะขับถ่ายเชื้อก่อโรคในปริมาณมาก ตั้งแต่ 100 ล้านถึง 1 พันล้านตัวต่ออุจจาระ 1 มิลลิลิตร ผู้ที่ติดเชื้อวิบริโอจะขับวิบริโอ 100-100,000 ตัวต่ออุจจาระ 1 มิลลิลิตร ปริมาณเชื้อที่ทำให้เกิดโรคได้คือประมาณ 1 ล้านวิบริโอ ระยะเวลาการขับถ่ายวิบริโอของเชื้ออหิวาตกโรคใน ผู้ที่ติดเชื้อ ปกติคือ 7-42 วัน และ 7-10 วันในผู้ที่หายป่วยแล้ว การขับถ่ายนานกว่านั้นพบได้น้อยมาก

ลักษณะเฉพาะของโรคอหิวาตกโรคคือโดยทั่วไปแล้วหลังจากนั้นจะไม่มีการแพร่เชื้อในระยะยาวและไม่มีการสร้างจุดศูนย์กลางของโรคประจำถิ่นที่มั่นคง อย่างไรก็ตาม ดังที่ได้ระบุไว้ข้างต้นแล้ว เนื่องมาจากการปนเปื้อนของแหล่งน้ำเปิดด้วยน้ำเสียที่มีสารอินทรีย์ ผงซักฟอก และเกลือแกงจำนวนมาก ในฤดูร้อน เชื้ออหิวาตกโรคไม่เพียงแต่จะอยู่รอดในแหล่งน้ำเหล่านั้นเป็นเวลานาน แต่ยังเพิ่มจำนวนขึ้นอีกด้วย

ข้อเท็จจริงที่มีความสำคัญทางระบาดวิทยาอย่างยิ่งคือความจริงที่ว่าเชื้อวิบริโออหิวาตกโรคของกลุ่ม 01 ทั้งที่ไม่ก่อให้เกิดพิษและก่อให้เกิดพิษสามารถคงอยู่ได้เป็นเวลานานในระบบนิเวศทางน้ำต่างๆ ในรูปแบบที่ไม่ได้เพาะเลี้ยง โดยใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ยีน vct ของเชื้อ V. chokrae ในรูปแบบที่ไม่ได้เพาะเลี้ยงถูกตรวจพบในแหล่งน้ำต่างๆ ในพื้นที่ที่มีการระบาดเฉพาะถิ่นหลายแห่งของ CIS ในระหว่างการศึกษาทางแบคทีเรียวิทยาที่เป็นลบ

จุดสนใจของเชื้อไวรัส El Tor cholera อยู่ที่อินโดนีเซีย การเกิดโรคระบาดครั้งที่ 7 ครั้งนี้เชื่อกันว่ามีความเกี่ยวข้องกับการขยายความสัมพันธ์ทางเศรษฐกิจของอินโดนีเซียกับโลกภายนอกหลังจากได้รับเอกราช และระยะเวลาและการพัฒนาอย่างรวดเร็วของโรคระบาด โดยเฉพาะระลอกที่สอง ได้รับอิทธิพลอย่างเด็ดขาดจากการขาดภูมิคุ้มกันต่อโรคอหิวาตกโรคและความวุ่นวายทางสังคมต่างๆ ในประเทศต่างๆ ในเอเชีย แอฟริกา และอเมริกา

ในกรณีโรคอหิวาตกโรค จะใช้มาตรการป้องกันการแพร่ระบาดหลายประการ โดยมาตรการหลักและสำคัญที่สุดคือ การตรวจจับและแยกผู้ป่วยในระยะเฉียบพลันและผิดปกติ รวมถึงผู้ที่เป็นพาหะของเชื้อ Vibrio ที่มีสุขภาพดีอย่างทันท่วงทีและดำเนินการอย่างทันท่วงที มีการดำเนินการเพื่อป้องกันช่องทางการติดเชื้อที่อาจเกิดขึ้น ให้ความสำคัญเป็นพิเศษกับแหล่งน้ำ (การเติมคลอรีนในน้ำดื่ม) ปฏิบัติตามเงื่อนไขด้านสุขอนามัยและสุขอนามัยในสถานประกอบการอาหาร สถาบันเด็ก สถานที่สาธารณะ มีการควบคุมอย่างเข้มงวด รวมถึงด้านแบคทีเรียในแหล่งน้ำเปิด การฉีดวัคซีนให้กับประชากร เป็นต้น

[ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ]

อาการของโรคอหิวาตกโรค

ระยะฟักตัวของอหิวาตกโรคจะแตกต่างกันไปตั้งแต่หลายชั่วโมงจนถึง 6 วัน โดยส่วนใหญ่มักจะอยู่ที่ 2-3 วัน เมื่อเข้าไปในลำไส้เล็กแล้ว วิบริโอของอหิวาตกโรคจะเคลื่อนที่และเคลื่อนที่ไปตามเยื่อเมือก จึงมุ่งไปที่เมือก เพื่อให้สามารถแทรกซึมเข้าไปได้ วิบริโอจะผลิตเอนไซม์หลายชนิด ได้แก่ นิวรามินิเดส มิวซิเนส โปรตีเอส เลซิทิเนส ซึ่งจะทำลายสารที่มีอยู่ในเมือกและอำนวยความสะดวกในการเคลื่อนตัวของวิบริโอไปยังเซลล์เยื่อบุผิว วิบริโอจะเกาะติดกับไกลโคคาลิกซ์ของเยื่อบุผิวเมื่อเคลื่อนที่ไม่ได้ และเมื่อเคลื่อนที่ไม่ได้แล้ว จะเริ่มขยายพันธุ์อย่างรวดเร็ว โดยเข้าไปตั้งรกรากในไมโครวิลลีของลำไส้เล็ก (ดูแผ่นแทรกสี รูปที่ 101.2) และผลิตเอ็กโซทอกซิน-โคเลอโรเจนในปริมาณมากในเวลาเดียวกัน โมเลกุลของโคเลอราเจนจะจับกับโมโนไซอาโลกังกลิโอไซด์ Gni! และแทรกซึมผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ ซึ่งจะไปกระตุ้นระบบอะดีไนเลตไซเคลส และการสะสมของ cAMP จะทำให้มีการหลั่งของเหลว ไอออนบวก และไอออนลบ Na, HCO, Kl, Cl จากเอนเทอโรไซต์มากเกินไป ซึ่งนำไปสู่โรคท้องร่วงจากอหิวาตกโรค ภาวะขาดน้ำ และการแยกเกลือออกจากร่างกาย โรคนี้มี 3 ประเภท ได้แก่

• โรคท้องร่วงรุนแรงที่ทำให้ร่างกายขาดน้ำอย่างรุนแรงซึ่งส่งผลให้คนไข้เสียชีวิตภายในไม่กี่ชั่วโมง
• อาการไม่รุนแรงมาก หรือท้องเสียโดยไม่ขาดน้ำ
• ระยะของโรคที่ไม่มีอาการ (พาหะของวิบริโอ)

ในกรณีโรคอหิวาตกโรคที่รุนแรง ผู้ป่วยจะมีอาการท้องเสีย อุจจาระบ่อยขึ้น อุจจาระมีปริมาณมากขึ้น กลายเป็นน้ำ อุจจาระไม่มีกลิ่น และมีลักษณะเหมือนน้ำซุปข้าว (ของเหลวขุ่นที่มีเมือกและเซลล์เยื่อบุผิวลอยอยู่ในนั้น) จากนั้นจะเกิดอาการอาเจียนที่ทำให้ร่างกายทรุดโทรม โดยเริ่มจากสิ่งที่อยู่ในลำไส้ก่อน จากนั้นอาเจียนออกมาในลักษณะคล้ายน้ำซุปข้าว อุณหภูมิร่างกายของผู้ป่วยจะลดลงต่ำกว่าปกติ ผิวหนังเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงิน มีรอยย่น และเย็นจัด เรียกว่าโรคอหิวาตกโรค เป็นผลจากการขาดน้ำ เลือดจะข้นขึ้น เกิดอาการเขียวคล้ำ ขาดออกซิเจน ไตทำงานผิดปกติอย่างรุนแรง ชัก ผู้ป่วยหมดสติ และเสียชีวิต อัตราการเสียชีวิตจากโรคอหิวาตกโรคในช่วงการระบาดใหญ่ครั้งที่ 7 แตกต่างกันไปตั้งแต่ 1.5% ในประเทศพัฒนาแล้วจนถึง 50% ในประเทศกำลังพัฒนา

ภูมิคุ้มกันหลังการติดเชื้อจะแข็งแรง อยู่ได้นาน และโรคที่กลับมาเป็นซ้ำนั้นเกิดขึ้นได้น้อย ภูมิคุ้มกันจะมีฤทธิ์ต้านพิษและต้านจุลินทรีย์ เกิดจากแอนติบอดี (สารต้านพิษคงอยู่ได้นานกว่าแอนติบอดีต้านจุลินทรีย์) เซลล์ความจำของระบบภูมิคุ้มกัน และเซลล์ฟาโกไซต์

การวินิจฉัยโรคอหิวาตกโรคในห้องปฏิบัติการ

วิธีหลักและสำคัญในการวินิจฉัยโรคอหิวาตกโรคคือการตรวจทางแบคทีเรียวิทยา โดยวัสดุสำหรับการตรวจจากผู้ป่วยคืออุจจาระและอาเจียน การตรวจอุจจาระเพื่อหาพาหะของวิบริโอ การตรวจลำไส้เล็กและถุงน้ำดีที่รัดไว้จะถูกนำส่งไปตรวจจากผู้ที่เสียชีวิตจากโรคอหิวาตกโรค การตรวจจากวัตถุจากสิ่งแวดล้อมภายนอก ได้แก่ น้ำจากอ่างเก็บน้ำเปิดและน้ำเสีย

เมื่อดำเนินการศึกษาทางแบคทีเรียวิทยา จะต้องปฏิบัติตามเงื่อนไขสามประการต่อไปนี้:

• เพาะเชื้อจากคนไข้ให้เร็วที่สุด (เชื้ออหิวาตกโรคสามารถมีชีวิตอยู่ในอุจจาระได้เพียงช่วงเวลาสั้นๆ)
• ภาชนะที่ใส่สารเคมีเข้าไปไม่ควรฆ่าเชื้อด้วยสารเคมี และไม่ควรมีร่องรอยของสารเคมีเหล่านั้นอยู่ เนื่องจากเชื้ออหิวาตกโรคไวต่อสารเคมีเหล่านี้มาก
• ป้องกันและลดความเสี่ยงในการปนเปื้อนเชื้อไปสู่ผู้อื่น

วัฒนธรรมจะถูกแยกตามรูปแบบต่อไปนี้: การหว่านบน PV, MPA ที่มีฤทธิ์เป็นด่างพร้อมกันหรืออาหารเลี้ยงเชื้อแบบเลือกชนิดใดๆ (TCBS ดีที่สุด) หลังจากผ่านไป 6 ชั่วโมง จะตรวจสอบฟิล์มที่เกิดขึ้นบน PV และหากจำเป็น จะทำการถ่ายโอนไปยัง PV ที่สอง (อัตราการหว่านของเชื้ออหิวาตกโรคในกรณีนี้จะเพิ่มขึ้น 10%) จาก PV จะทำการถ่ายโอนไปยัง MPA ที่มีฤทธิ์เป็นด่าง โคโลนีที่น่าสงสัย (โปร่งใสเหมือนแก้ว) จะถูกถ่ายโอนเพื่อให้ได้วัฒนธรรมบริสุทธิ์ ซึ่งจะถูกระบุโดยคุณสมบัติทางสัณฐานวิทยา วัฒนธรรม ชีวเคมี การเคลื่อนที่ และสุดท้ายจะทำการกำหนดประเภทโดยใช้ซีรัมจับกลุ่มเพื่อการวินิจฉัย O-, OR-, Inaba และ Ogawa และฟาจ (HDF) มีการเสนอตัวเลือกต่างๆ สำหรับการวินิจฉัยแบบเร่งรัด ซึ่งวิธีที่ดีที่สุดคือวิธีเรืองแสง-ซีรัมโลยี ช่วยให้ตรวจจับอหิวาตกโรควิบริโอได้โดยตรงในวัสดุทดสอบ (หรือหลังจากการเพาะเลี้ยงเบื้องต้นในหลอดทดลองสองหลอดที่มี PV 1% ซึ่งเติมฟาจอหิวาตกโรคลงไปหนึ่งหลอด) ภายใน 1.5-2 ชั่วโมง เพื่อตรวจจับอหิวาตกโรควิบริโออย่างรวดเร็ว IEM ของ Nizhny Novgorod ได้เสนอชุดดิสก์ตัวบ่งชี้กระดาษที่ประกอบด้วยการทดสอบทางชีวเคมี 13 รายการ (ออกซิเดส อินโดล ยูเรียส แล็กโทส กลูโคส ซูโครส แมนโนส อะราบิโนส แมนนิทอล อิโนซิทอล อาร์จินีน ออร์นิทีน ไลซีน) ซึ่งช่วยให้สามารถแยกตัวแทนของสกุล Vibrio จากสกุล Aeromonas, Plesiomonas, Pseudomonas, Comamonas และจากวงศ์ Enterobacteriaceae เพื่อตรวจจับอหิวาตกโรควิบริโออย่างรวดเร็วในอุจจาระและในวัตถุในสิ่งแวดล้อม สามารถใช้ RPGA ที่มีแอนติบอดีวินิจฉัยได้ เพื่อตรวจหาเชื้ออหิวาตกโรคที่ไม่ได้เพาะเลี้ยงในวัตถุในสิ่งแวดล้อม จะใช้เพียงวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสเท่านั้น

ในกรณีที่แยก V. cholerae ที่ไม่ใช่กลุ่ม Ol ควรพิมพ์โดยใช้ซีรั่มจับกลุ่มที่สอดคล้องกันของกลุ่มซีรั่มอื่น การแยก V. cholerae ที่ไม่ใช่กลุ่ม Ol จากผู้ป่วยที่มีอาการท้องเสีย (รวมถึงอาการท้องเสียคล้ายอหิวาตกโรค) ต้องใช้มาตรการป้องกันการแพร่ระบาดแบบเดียวกับกรณีการแยก V. cholerae ที่ไม่ใช่กลุ่ม Ol หากจำเป็น ให้ตรวจหาการมีอยู่ของยีนก่อโรค ctxAB, tcp, toxR และ hap ในวิบริโอดังกล่าวโดยใช้ PCR

การวินิจฉัยโรคอหิวาตกโรคด้วยซีรัมวิทยาเป็นการวินิจฉัยเพิ่มเติม โดยอาจใช้ปฏิกิริยาการจับตัวเป็นก้อนก็ได้ แต่จะดีกว่าหากกำหนดระดับของแอนติบอดีต่อไวบริโอไซด์หรือแอนติท็อกซิน (แอนติบอดีต่อโรคอหิวาตกโรคจะกำหนดโดยใช้เอนไซม์อิมมูโนแอสเซย์หรือวิธีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์)

การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการของเชื้อวิบริโอที่ก่อโรคที่ไม่ใช่โรคอหิวาตกโรค

วิธีการหลักในการวินิจฉัยโรคที่เกิดจากวิบริโอที่ก่อโรคที่ไม่ใช่โรคอหิวาตกโรคคือการใช้แบคทีเรียบางชนิด เช่น TCBS, MacConkey เป็นต้น การที่วัฒนธรรมที่แยกออกมาจะจัดอยู่ในสกุล Vibrio นั้นพิจารณาจากลักษณะสำคัญของแบคทีเรียในสกุลนี้

การรักษาโรคอหิวาตกโรค

การรักษาผู้ป่วยโรคอหิวาตกโรคควรประกอบด้วยการให้สารน้ำและฟื้นฟูการเผาผลาญเกลือน้ำให้เป็นปกติ เพื่อจุดประสงค์นี้ ขอแนะนำให้ใช้สารละลายน้ำเกลือที่มีองค์ประกอบดังต่อไปนี้ เช่น NaCl 3.5, NaHC03 2.5, KCl 1.5 และกลูโคส 20.0 กรัมต่อน้ำ 1 ลิตร การรักษาที่พิสูจน์ทางพยาธิวิทยาดังกล่าวร่วมกับการบำบัดด้วยยาปฏิชีวนะที่เหมาะสมจะช่วยลดอัตราการเสียชีวิตจากโรคอหิวาตกโรคลงเหลือ 1% หรือต่ำกว่านั้น

การป้องกันอหิวาตกโรคโดยเฉพาะ

เพื่อสร้างภูมิคุ้มกันเทียม ได้ มีการเสนอให้สร้าง วัคซีนป้องกันโรคอหิวาตกโรคซึ่งรวมถึงวัคซีนที่ทำจากเชื้อสายพันธุ์ Inaba และ Ogawa ที่ถูกฆ่าแล้ว วัคซีนป้องกันอหิวาตกโรคสำหรับฉีดใต้ผิวหนัง และวัคซีนเคมีแบบสองสายพันธุ์สำหรับรับประทานทางปากซึ่งประกอบด้วยอนาทอกซินและแอนติเจนทางร่างกายของเชื้อ Inaba และ Ogawa เนื่องจากไม่มีการสร้างภูมิคุ้มกันข้ามสายพันธุ์ อย่างไรก็ตาม ภูมิคุ้มกันหลังฉีดวัคซีนจะมีระยะเวลาไม่เกิน 6-8 เดือน ดังนั้นการฉีดวัคซีนจึงดำเนินการตามข้อบ่งชี้ทางระบาดวิทยาเท่านั้น การป้องกันด้วยยาปฏิชีวนะได้รับการพิสูจน์แล้วว่าได้ผลดีในเชื้ออหิวาตกโรค โดยเฉพาะอย่างยิ่งเตตราไซคลิน ซึ่งเชื้อวัณโรคมีความไวสูง ยาปฏิชีวนะอื่นๆ ที่มีประสิทธิภาพต่อเชื้อ V. cholerae ก็สามารถใช้เพื่อจุดประสงค์เดียวกันได้