การตรวจดีเอ็นเอเพื่อพิสูจน์ความเป็นพ่อ: วิธีการทำและความแม่นยำเป็นอย่างไร

การตรวจดีเอ็นเอเพื่อพิสูจน์ความเป็นพ่อเป็นการตรวจทางพันธุกรรมที่ระบุว่าชายคนใดเป็นพ่อทางชีววิทยาของเด็กหรือไม่ วิธีการนั้นง่ายมาก: เด็กจะได้รับสารพันธุกรรมประมาณครึ่งหนึ่งจากแม่ทางชีววิทยาและอีกครึ่งหนึ่งจากพ่อทางชีววิทยา ดังนั้นห้องปฏิบัติการจึงเปรียบเทียบส่วนของดีเอ็นเอของเด็กกับส่วนของดีเอ็นเอของผู้ที่ถูกกล่าวหาว่าเป็นพ่อ และถ้าเป็นไปได้ก็เปรียบเทียบกับส่วนของดีเอ็นเอของแม่ด้วย [1]

การวิจัยสมัยใหม่โดยทั่วไปอาศัยการวิเคราะห์ลำดับดีเอ็นเอสั้นๆ ที่ซ้ำกันหลายลำดับ ห้องปฏิบัติการจะกำหนดโปรไฟล์ทางพันธุกรรมของผู้เข้าร่วมแต่ละคน จากนั้นประเมินว่าพ่อที่ถูกกล่าวหาสามารถอธิบายรูปแบบดีเอ็นเอที่เด็กไม่น่าจะได้รับมาจากแม่ได้หรือไม่ นี่เป็นพื้นฐานสำหรับการคำนวณความแข็งแกร่งทางสถิติของการจับคู่ [2]

ในทางปฏิบัติ เซลล์จากบริเวณแก้มด้านในมักถูกนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์ประเภทนี้ นี่เป็นวิธีการเก็บตัวอย่างที่เป็นมาตรฐาน ไม่รุกราน และสะดวก แหล่งข้อมูลอย่างเป็นทางการยังระบุว่าการเก็บตัวอย่างจากแก้มด้านในอย่างถูกต้องนั้นมีความแม่นยำเทียบเท่ากับการตรวจเลือด ดังนั้นโดยปกติแล้วจึงไม่จำเป็นต้องใช้เลือดสำหรับการทดสอบตามปกติ [3]

สิ่งสำคัญคือต้องเข้าใจว่าการทดสอบตอบคำถามเกี่ยวกับต้นกำเนิดทางชีววิทยาของเด็กเท่านั้น ไม่ได้ระบุว่าใครคือบิดาทางสังคม ใครเป็นผู้เลี้ยงดูเด็ก ใครคือบิดาตามกฎหมายของประเทศใดประเทศหนึ่ง หรือความรับผิดชอบในครอบครัวใดเกิดขึ้นแล้วภายใต้กฎหมาย ในสถานการณ์ครอบครัวที่ซับซ้อน ความเป็นบิดาทางชีววิทยา ทางสังคม และทางกฎหมายอาจไม่ตรงกัน [4]

จากมุมมองทางการแพทย์ การทดสอบดังกล่าวมีความสำคัญไม่เพียงเพราะข้อพิพาทเกี่ยวกับความเป็นพ่อแม่ของเด็กเท่านั้น การสร้างความสัมพันธ์ทางชีวภาพสามารถช่วยชี้แจงประวัติครอบครัว ประเมินความเสี่ยงของโรคทางพันธุกรรม และเข้าใจประวัติทางการแพทย์ของครอบครัวได้ดียิ่งขึ้น อย่างไรก็ตาม การทดสอบความเป็นพ่อเพียงอย่างเดียวไม่สามารถทดแทนการตรวจโรคทางพันธุกรรมอย่างเต็มรูปแบบได้ และไม่สามารถตอบคำถามได้ว่าเด็กมีโรคทางพันธุกรรมเฉพาะเจาะจงหรือไม่ [5]

ตารางที่ 1 สิ่งที่การทดสอบแสดงให้เห็นและสิ่งที่การทดสอบไม่แสดงให้เห็น

คำถาม	สามารถตอบได้	ตอบไม่ได้
ชายคนนี้เป็นพ่อแท้ๆ ของเด็กหรือไม่?	ใช่	-
ดีเอ็นเอส่วนใดส่วนหนึ่งของเด็กและผู้ชายตรงกันหรือไม่?	ใช่	-
ตามกฎหมายแล้ว ใครคือบิดาตามกฎหมาย?	บางส่วนเท่านั้น โดยต้องดำเนินการควบคู่ไปกับกระบวนการทางกฎหมาย	ใช่ การทดสอบนั้นเองไม่ได้แก้ปัญหานี้ได้
ใครเป็นผู้เลี้ยงดูเด็กและทำหน้าที่เป็นผู้ปกครอง?	เลขที่	ใช่
เด็กคนนี้มีโรคทางพันธุกรรมเฉพาะอย่างหรือไม่?	ไม่ จำเป็นต้องมีการวิจัยเพิ่มเติมเพื่อยืนยันเรื่องนี้	ใช่
สามารถสร้างรายงานการพยากรณ์โรคทางการแพทย์ของทั้งครอบครัวได้ทันทีจากผลการตรวจหรือไม่?	เลขที่	ใช่

แหล่งที่มาของตาราง [6]

การทดสอบนี้ดำเนินการเมื่อใด และใช้ตัวอย่างอะไรบ้าง?

การตรวจพิสูจน์ความเป็นพ่อมักจะดำเนินการในสามสถานการณ์หลัก สถานการณ์แรกคือเรื่องส่วนตัว เมื่อครอบครัวต้องการความชัดเจน สถานการณ์ที่สองคือเรื่องทางกฎหมาย เมื่อประเด็นเกี่ยวข้องกับการเลี้ยงดูบุตร การเป็นผู้ปกครอง การรับมรดก ขั้นตอนการเข้าเมือง หรือการเปลี่ยนแปลงเอกสาร สถานการณ์ที่สามคือเรื่องทางการแพทย์ เมื่อต้นกำเนิดของเด็กมีความสำคัญต่อประวัติครอบครัวและการประเมินความเสี่ยงสำหรับภาวะบางอย่าง [7]

หลังจากคลอดบุตรแล้ว โดยทั่วไปจะทำการทดสอบโดยใช้ตัวอย่างเซลล์จากเยื่อบุช่องปาก ซึ่งเป็นวิธีที่นิยมใช้มากที่สุด อย่างไรก็ตาม การตรวจทางพันธุกรรมโดยทั่วไปยังสามารถใช้ตัวอย่างอื่นๆ ได้อีกด้วย เช่น เลือด เส้นผม ผิวหนัง น้ำคร่ำ และเนื้อเยื่ออื่นๆ สำหรับการตรวจพิสูจน์ความเป็นพ่อตามมาตรฐาน มักจะนิยมใช้การเก็บตัวอย่างจากเยื่อบุช่องปาก เนื่องจากทำได้ง่าย ปลอดภัย และเหมาะสมกับงานในห้องปฏิบัติการทั่วไป [8]

หากบิดาที่ถูกกล่าวหาไม่สามารถติดต่อได้ เสียชีวิต หรือปฏิเสธที่จะให้ข้อมูล บางครั้งอาจสามารถแก้ไขปัญหาได้อย่างสมบูรณ์โดยการวิเคราะห์ญาติทางสายเลือดที่ใกล้ชิด เช่น บิดา มารดา พี่น้อง และญาติทางสายเลือดอื่นๆ ของชายผู้นั้น อย่างไรก็ตาม นี่ไม่ใช่การทดสอบความเป็นบิดาโดยตรงแบบคลาสสิกอีกต่อไป แต่เป็นการศึกษาความสัมพันธ์ทางสายเลือดที่ซับซ้อนกว่า พลังทางสถิติมักจะต่ำกว่า และการตีความต้องใช้ความระมัดระวังมากขึ้น [9]

สำหรับห้องปฏิบัติการ การออกแบบที่ดีที่สุดถือเป็นการศึกษาที่มีผู้เข้าร่วมสามคน ได้แก่ แม่ เด็ก และพ่อที่ถูกกล่าวหา การมีตัวอย่างของแม่ทำให้ห้องปฏิบัติการสามารถแยกส่วนของจีโนมของเด็กที่เป็นของแม่จากส่วนของจีโนมที่เป็นของพ่อได้ง่ายขึ้น และประเมินการมีส่วนร่วมของพ่อที่ถูกกล่าวหาได้อย่างแม่นยำยิ่งขึ้น หากทำการศึกษาโดยมีผู้เข้าร่วมเพียงสองคน ความแข็งแกร่งของหลักฐานยังคงสูงในหลายกรณี แต่ความเสี่ยงของการตีความที่ยากลำบากหรือไม่น่าเชื่อถือจะเพิ่มขึ้น [10]

ตัวอย่างที่ไม่เป็นไปตามมาตรฐาน เช่น แปรงสีฟัน มีดโกน ก้นบุหรี่ หมากฝรั่ง หรือเส้นผม อาจมี DNA ที่มีประโยชน์ในทางทฤษฎี แต่ก็มีความท้าทายมากกว่า ความยากลำบากหลักๆ ได้แก่ การปนเปื้อน การผสมกับวัสดุชีวภาพอื่นๆ ความไม่แน่นอนเกี่ยวกับเอกลักษณ์ของวัตถุ และความเหมาะสมที่ต่ำกว่าสำหรับการสรุปผลที่มีความสำคัญทางกฎหมาย ดังนั้น สำหรับการทดสอบที่เชื่อถือได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการทดสอบทางนิติวิทยาศาสตร์ ตัวอย่างดังกล่าวจึงถือเป็นตัวเลือกสำรองมากกว่าตัวเลือกหลัก [11]

ตารางที่ 2. ตัวอย่างใดที่ถูกนำมาใช้บ่อยที่สุด?

ตัวอย่าง	มันสะดวกแค่ไหน?	เหตุการณ์แบบนี้เกิดขึ้นบ่อยแค่ไหน?	ความคิดเห็น
รอยเปื้อนจากด้านในแก้ม	สะดวกมาก	พื้นฐาน	มาตรฐานสำหรับการทดสอบส่วนใหญ่
เลือด	สะดวก แต่ก็รุกล้ำความเป็นส่วนตัวมากกว่า	น้อยลง	มีความแม่นยำเทียบเท่ากับการใช้ไม้สำลีป้ายแก้ม หากเก็บตัวอย่างอย่างถูกต้อง
ผมจากโคนผม	ความสะดวกสบายมีจำกัด	นานๆ ครั้ง	คุณภาพของวัสดุนั้นอาจคาดเดาได้ยาก
น้ำคร่ำ	เฉพาะกับการตรวจวินิจฉัยก่อนคลอดแบบรุกรานเท่านั้น	กรณีพิเศษ	ใช้ในสถานการณ์พิเศษ
เนื้อเยื่อรก	เฉพาะกับการตรวจวินิจฉัยก่อนคลอดแบบรุกรานเท่านั้น	กรณีพิเศษ	ไม่เหมาะสำหรับการตรวจหลังคลอดตามปกติ
ของใช้ในครัวเรือน	ความสามารถในการคาดการณ์ต่ำ	ตัวเลือกที่ไม่เป็นมาตรฐาน	เพิ่มความเสี่ยงต่อผลลัพธ์ที่เป็นข้อโต้แย้งและข้อสงสัยเกี่ยวกับความถูกต้อง

แหล่งที่มาของตาราง [12]

ตารางที่ 3 การศึกษาสำหรับผู้เข้าร่วม 3 คน และสำหรับผู้เข้าร่วม 2 คน

โครงการ	ใครเข้าร่วมบ้าง?	จุดแข็ง	ข้อจำกัด
วงจรเต็มรูปแบบ 3 สมาชิก	แม่ ลูก และผู้ที่ถูกกล่าวหาว่าเป็นพ่อ	ทรงพลังที่สุดและเข้าใจง่ายที่สุด	จำเป็นต้องเก็บตัวอย่างจากทั้ง 3 คน
โครงการที่มีผู้เข้าร่วม 2 คน	เด็กและพ่อที่ถูกกล่าวหา	เป็นไปได้หากมารดาไม่อยู่	ความเสี่ยงที่สูงขึ้นของการประเมินทางสถิติที่ซับซ้อน
การวิจัยความสัมพันธ์ทางเครือญาติทางอ้อม	เด็กและญาติของผู้ที่ถูกกล่าวหาว่าเป็นพ่อ	มีประโยชน์ในกรณีที่พ่อไม่สามารถมาด้วยตนเองได้	เส้นทางที่ไม่ตรงไปตรงมาและมักจะไม่น่าเชื่อถือเท่าไหร่

แหล่งที่มาของตาราง [13]

การวิเคราะห์ดำเนินการอย่างไร และผลลัพธ์ถูกอ่านอย่างไร?

หลังจากเก็บตัวอย่างแล้ว ห้องปฏิบัติการจะแยก DNA ระบุตัวแปรทางพันธุกรรมในผู้เข้าร่วมแต่ละคน และเปรียบเทียบกัน จากนั้นจะคำนวณตัวบ่งชี้ทางสถิติที่แสดงให้เห็นว่าข้อมูลที่ได้มานั้นอธิบายได้ดีกว่าสมมติฐานความเป็นพ่อทางชีววิทยามากน้อยเพียงใด เมื่อเทียบกับสมมติฐานที่ว่าไม่มีความสัมพันธ์ดังกล่าว ในพันธุศาสตร์นิติวิทยาศาสตร์ ตัวบ่งชี้นี้ถือเป็นอัตราส่วนความน่าจะเป็น และดัชนีความเป็นพ่อเป็นรูปแบบพิเศษของอัตราส่วนนี้สำหรับงานในการพิสูจน์ความเป็นพ่อ [14]

โดยทั่วไปแล้ว รายงานฉบับสุดท้ายไม่ได้แสดงข้อมูลทางพันธุกรรมดิบ แต่แสดงผลลัพธ์ที่ตีความแล้ว ในทางปฏิบัติ ห้องปฏิบัติการมักจะสรุปผลเป็นการตัดความเป็นไปได้ของการเป็นพ่อ หรือมีความน่าจะเป็นสูงมากของการเป็นพ่อ แหล่งข้อมูลทางคลินิกระบุอย่างชัดเจนว่า ในรายงานประจำวัน มักใช้ 0% สำหรับการตัดความเป็นไปได้ของการเป็นพ่อ และ 99.9% สำหรับผลการยืนยัน แม้ว่ารูปแบบที่แน่นอนของรายงานจะขึ้นอยู่กับห้องปฏิบัติการและวิธีการ [15]

อย่างไรก็ตาม ตัวเลขที่สวยงามเพียงอย่างเดียวไม่ได้หมายความว่าห้องปฏิบัติการและหน่วยงานทั้งหมดจะตีความผลลัพธ์เหมือนกัน ตัวอย่างเช่น ในทางปฏิบัติของการตรวจคนเข้าเมืองของสหรัฐอเมริกา ผลลัพธ์ 99.5% หรือสูงกว่านั้นถือว่าเพียงพอที่จะสร้างความสัมพันธ์ทางชีวภาพได้ ในขณะที่เอกสารการฝึกอบรมของสถาบันยุติธรรมแห่งชาติระบุว่าเกณฑ์ที่ใช้อาจแตกต่างกันไปในแต่ละประเทศและระบบการประเมิน ซึ่งหมายความว่าไม่ใช่แค่เปอร์เซ็นต์เท่านั้นที่สำคัญ แต่ยังรวมถึงบริบท การรับรองห้องปฏิบัติการ และคุณภาพของขั้นตอนการเก็บตัวอย่างด้วย [16]

วิธีที่ห้องปฏิบัติการจัดการกับความไม่ตรงกันก็มีความสำคัญเช่นกัน โดยทั่วไปแล้ว แนวทางความสัมพันธ์ทางสายเลือด ความไม่ตรงกันที่เห็นได้ชัดหลายจุดมักนำไปสู่การตัดออก แต่จุดที่มีปัญหาเพียงจุดเดียวไม่ได้หมายความว่าผู้ชายคนนั้นไม่ใช่พ่อเสมอไป ในบางกรณี การกลายพันธุ์ในบริเวณดีเอ็นเอที่กำลังวิเคราะห์เป็นสาเหตุ ดังนั้นกรณีที่ยากลำบากจึงต้องใช้แผงเครื่องหมายที่กว้างขึ้นและการประเมินโดยผู้เชี่ยวชาญที่รอบคอบกว่า แทนที่จะสรุปแบบกลไกโดยอิงจากบริเวณที่น่าสงสัยเพียงจุดเดียว [17]

ข้อสรุปเชิงปฏิบัติที่สำคัญมาจากสิ่งนี้: วลี "การทดสอบมีความแม่นยำ 99.9%" ทำให้ความเป็นจริงง่ายเกินไป ความน่าเชื่อถือขึ้นอยู่กับคุณภาพของตัวอย่าง จำนวนและประเภทของเครื่องหมายที่ทดสอบ การมีส่วนร่วมของมารดา การไม่มีญาติสนิทในกลุ่มบิดาที่เป็นไปได้ และการคำนวณทางสถิติที่ถูกต้อง ดังนั้น การทดสอบที่ดีจึงไม่ใช่แค่เรื่องของเทคโนโลยีในห้องปฏิบัติการเท่านั้น แต่ยังรวมถึงการจัดการขั้นตอนทั้งหมดอย่างเหมาะสม ตั้งแต่การเก็บตัวอย่างไปจนถึงการออกข้อสรุปด้วย [18]

ตารางที่ 4. วิธีการตีความผลลัพธ์โดยทั่วไป

ตัวเลือกเอาต์พุต	มันหมายความว่าอย่างไร
การรับรองความเป็นพ่อไม่รวมอยู่ในเงื่อนไขนี้	ข้อมูลทางพันธุกรรมไม่สอดคล้องกับความเป็นพ่อทางชีววิทยา
ความเป็นไปได้ของการเป็นพ่อยังไม่ถูกตัดออกไป โอกาสค่อนข้างสูงมาก	หลักฐานทางพันธุกรรมสนับสนุนอย่างหนักแน่นว่าบุคคลนั้นเป็นพ่อทางชีววิทยา
ผลลัพธ์ที่ได้ไม่น่าเชื่อถือเพียงพอ	จำเป็นต้องมีตัวบ่งชี้เพิ่มเติม ตัวอย่างจากมารดา หรือการทดสอบซ้ำ
ผลลัพธ์ที่ได้เป็นที่ถกเถียงกันเนื่องจากเป็นกรณีที่ซับซ้อน	อาจมีความสัมพันธ์ใกล้ชิดกันระหว่างบิดาที่ถูกกล่าวหา การกลายพันธุ์ ปรากฏการณ์ทางชีวภาพที่หายาก หรือปัญหาจากตัวอย่าง

แหล่งที่มาของตาราง [19]

การตรวจที่บ้าน ถูกต้องตามกฎหมาย และการตรวจก่อนคลอด

สำหรับการใช้งานส่วนตัว มีรูปแบบที่เรียกว่าแบบทำเองที่บ้าน: ผู้เข้าร่วมจะเก็บตัวอย่างด้วยตนเองและส่งไปยังห้องปฏิบัติการ ตัวเลือกนี้สะดวกสำหรับการสืบสวนส่วนตัว แต่ข้อเสียหลักคือไม่สามารถพิสูจน์ได้อย่างน่าเชื่อถือว่าใครเป็นผู้ให้ตัวอย่าง ดังนั้นผลลัพธ์ดังกล่าวจึงมักไม่เหมาะสมสำหรับศาลหรือกระบวนการทางราชการอื่น ๆ [20]

การวิจัยที่มีความสำคัญทางกฎหมายมีโครงสร้างที่แตกต่างกัน ตัวอย่างจะถูกเก็บรวบรวม ณ จุดเก็บรวบรวมที่ได้รับการอนุมัติ ตัวตนของผู้เข้าร่วมจะได้รับการยืนยันด้วยเอกสาร และการเคลื่อนย้ายวัสดุจะได้รับการบันทึกตั้งแต่การเก็บรวบรวมจนถึงการออกรายงาน มาตรฐานวิชาชีพสำหรับห้องปฏิบัติการตรวจสอบความสัมพันธ์ทางเครือญาติและขั้นตอนของรัฐบาลอย่างเป็นทางการนั้นอาศัยสิ่งนี้เป็นหลัก ไม่เพียงแต่ความถูกต้องของการวิเคราะห์เท่านั้น แต่ยังรวมถึงการเก็บรักษาตัวอย่างอย่างต่อเนื่องและมีเอกสารประกอบด้วย [21]

การตรวจพิสูจน์ความเป็นพ่อก่อนคลอดเป็นไปได้ วิธีการที่ไม่รุกรานนี้อาศัยข้อเท็จจริงที่ว่าดีเอ็นเอของทารกในครรภ์ไหลเวียนอยู่ในเลือดของหญิงตั้งครรภ์ แหล่งข้อมูลอย่างเป็นทางการเกี่ยวกับดีเอ็นเอของทารกในครรภ์ระบุว่าการตรวจเลือดดังกล่าวสามารถทำได้เร็วที่สุดในสัปดาห์ที่ 10 ของการตั้งครรภ์ และบทวิจารณ์สมัยใหม่ยืนยันว่าวิธีการตรวจพิสูจน์ความเป็นพ่อก่อนคลอดกำลังได้รับการพัฒนาบนพื้นฐานนี้เช่นกัน [22]

นอกจากนี้ยังมีทางเลือกการตรวจครรภ์แบบรุกรานด้วย โดยทั่วไปแล้วการตรวจตัวอย่างรก (CVS) จะทำในช่วง 10 ถึง 13 สัปดาห์ และการเจาะน้ำคร่ำจะทำในช่วง 15 ถึง 20 สัปดาห์ อย่างไรก็ตาม ทั้งสองวิธีมีความเสี่ยงต่อการแท้งบุตร สำหรับการเจาะน้ำคร่ำ บริการสุขภาพแห่งชาติของสหราชอาณาจักรระบุว่ามีความเสี่ยงสูงถึง 1 ใน 200 ครั้งหลัง 15 สัปดาห์ ในขณะที่สำหรับ CVS ความเสี่ยงจะน้อยกว่า 1 ใน 200 สำหรับการตั้งครรภ์เดี่ยวส่วนใหญ่ [23]

ดังนั้น ในการปฏิบัติสมัยใหม่ การตรวจพิสูจน์ความเป็นพ่อก่อนคลอดจึงต้องใช้แนวทางที่สมดุลเป็นพิเศษ หากคำถามเกี่ยวข้องกับการพิสูจน์ความเป็นพ่อทางชีวภาพเท่านั้น ไม่ใช่การวินิจฉัยทางการแพทย์ของทารกในครรภ์ด้วยเหตุผลทางสูติกรรม ก็ควรพิจารณาทางเลือกที่ไม่รุกรานก่อนและปรึกษาผู้เชี่ยวชาญด้านพันธุกรรม วิธีการที่รุกรานควรพิจารณาหลังจากมีการพูดคุยแยกต่างหากเกี่ยวกับความเสี่ยง ประโยชน์ และทางเลือกอื่น ๆ นี่ไม่ใช่ข้อห้าม แต่เป็นการสรุปทางคลินิกอย่างระมัดระวังโดยอิงจากข้อเท็จจริงที่ว่าทางเลือกที่ปลอดภัยและมีความเสี่ยงนั้นแตกต่างกันโดยพื้นฐาน [24]

ตารางที่ 5 การทดสอบที่มีความสำคัญส่วนบุคคลและทางกฎหมาย

ลักษณะเฉพาะ	แบบทดสอบบุคลิกภาพ	การทดสอบที่มีความสำคัญทางกฎหมาย
ใครเป็นผู้เก็บตัวอย่าง?	โดยปกติแล้วจะเป็นผู้เข้าร่วมเอง	ผู้เชี่ยวชาญที่ได้รับอนุญาต
การตรวจสอบตัวตน	มีจำกัดหรือไม่มีอยู่เลย	บังคับ
การบันทึกการเคลื่อนย้ายตัวอย่าง	โดยปกติแล้วไม่ใช่	ใช่
เหมาะสำหรับสนาม	โดยปกติแล้วไม่ใช่	ใช่ ถ้าหากเป็นไปตามข้อกำหนดทางกฎหมาย
เป้าหมายหลัก	ความชัดเจนส่วนบุคคล	หลักฐานอย่างเป็นทางการ

แหล่งที่มาของตาราง [25]

ตารางที่ 6. ตัวเลือกสำหรับการพิสูจน์ความเป็นพ่อก่อนคลอด

วิธี	จะเป็นไปได้เมื่อไหร่?	วัสดุ	ข้อดี	ข้อจำกัด
การตรวจเลือดแบบไม่เจาะเลือดสำหรับหญิงตั้งครรภ์	โดยปกติจะเริ่มตั้งแต่สัปดาห์ที่ 10 เป็นต้นไป	ดีเอ็นเอของทารกในครรภ์ที่ลอยอยู่ในเลือดของหญิงตั้งครรภ์	ปลอดภัยกว่าสำหรับหญิงตั้งครรภ์	วิธีการวิจัยแตกต่างกันไปในแต่ละห้องปฏิบัติการ
การตรวจตัวอย่างรก	ประมาณ 10-13 สัปดาห์	เนื้อเยื่อรก	ระยะแรก	ความรุนแรงและความเสี่ยงต่อการแท้งบุตร
การเจาะถุงน้ำคร่ำ	โดยปกติประมาณ 15-20 สัปดาห์	น้ำคร่ำ	วัสดุนี้มีคุณค่าในการวินิจฉัยสูง	ความรุนแรงและความเสี่ยงต่อการแท้งบุตร

แหล่งที่มาของตาราง [26]

ข้อจำกัดของวิธีการ กรณีศึกษาที่ยาก และข้อสรุปเชิงปฏิบัติ

แม้ว่าการตรวจพิสูจน์ความเป็นพ่อจะถือว่ามีความแม่นยำสูง แต่ก็ไม่ใช่การทดสอบมหัศจรรย์ที่ได้ผลอย่างสมบูรณ์แบบในทุกสถานการณ์ กรณีที่มีญาติสนิทอยู่ในกลุ่มพ่อที่เป็นไปได้นั้นมีความท้าทายอย่างยิ่ง การคำนวณตามประชากรแสดงให้เห็นว่าความเสี่ยงของผลบวกเท็จจะสูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อทำการทดสอบเฉพาะเด็กและพ่อที่ถูกกล่าวหาเท่านั้น เมื่อเทียบกับการทดสอบทั้งหมดรวมถึงแม่ด้วย [27]

ปัญหาที่หายากแต่สำคัญอีกกลุ่มหนึ่งเกิดขึ้นจากสถานการณ์ทางชีววิทยาที่ผิดปกติ มีการอธิบายกรณีของภาวะไคเมอริสซึม ซึ่งบุคคลคนเดียวมีเซลล์สองสายพันธุ์ที่แตกต่างกันทางพันธุกรรม ในสถานการณ์เช่นนี้ DNA จากตัวอย่างที่เก็บจากแก้มหรือเลือดอาจไม่ตรงกับ DNA จากเซลล์สืบพันธุ์ และการทดสอบมาตรฐานอาจตัดความเป็นไปได้ของบิดาทางชีววิทยาที่แท้จริงออกไปอย่างผิดพลาด กรณีนี้หายากมาก แต่เป็นข้อยกเว้นเหล่านี้เองที่อธิบายว่าทำไมในกรณีที่มีข้อโต้แย้ง จึงมีการร้องขอการทดสอบซ้ำในเนื้อเยื่ออื่นและการตรวจสอบที่ครอบคลุมมากขึ้นในบางครั้ง [28]

สิ่งสำคัญอย่างยิ่งที่ต้องจำไว้คือต้นกำเนิดทางชีววิทยาเป็นเพียงแง่มุมหนึ่งของปัญหาเท่านั้น ในการรับบุตรบุญธรรม การใช้เซลล์สืบพันธุ์จากผู้บริจาค การอุ้มบุญ และสถานการณ์อื่นๆ บางประการ บทบาททางสังคมและทางกฎหมายของผู้ปกครองอาจไม่สอดคล้องกับบทบาททางพันธุกรรม สำหรับห้องปฏิบัติการ ความสัมพันธ์ทางชีววิทยาเป็นสิ่งสำคัญ แต่สำหรับครอบครัวและศาล บางครั้งสิ่งนี้ไม่เพียงพอที่จะแก้ไขข้อพิพาททั้งหมดได้ [29]

การตรวจทางพันธุกรรมไม่เพียงแต่ก่อให้เกิดภาระทางห้องปฏิบัติการเท่านั้น แต่ยังก่อให้เกิดภาระทางจิตใจด้วย ข้อมูลทั่วไปเกี่ยวกับความเสี่ยงของการตรวจทางพันธุกรรมระบุว่าผลลัพธ์อาจทำให้เกิดความวิตกกังวล ความรู้สึกผิด ภาวะซึมเศร้า และความตึงเครียดภายในครอบครัว ในกรณีของการตรวจพิสูจน์ความเป็นพ่อ ผลที่ตามมามักส่งผลกระทบต่อความไว้วางใจ ภาระผูกพันทางการเงิน และความสัมพันธ์ในครอบครัว ดังนั้นจึงควรพิจารณาอย่างรอบคอบก่อนทำการตรวจ ไม่ใช่ด้วยความหุนหันพลันแล่น แต่หลังจากเข้าใจอย่างถ่องแท้แล้วว่าผลลัพธ์จะนำไปสู่สิ่งใด [30]

แนวทางที่สมเหตุสมผลที่สุดดูเหมือนจะเป็นการกำหนดวัตถุประสงค์ของการศึกษาก่อน จากนั้นเลือกเส้นทางโดยตรงหรือโดยอ้อม รวมตัวอย่างจากมารดาหากเป็นไปได้ ใช้เฉพาะห้องปฏิบัติการที่ได้รับการรับรองซึ่งมีเอกสารขั้นตอนการทำงานของตัวอย่างเพื่อวัตถุประสงค์อย่างเป็นทางการ และหารือเกี่ยวกับความปลอดภัยของวิธีการแยกต่างหากในระหว่างตั้งครรภ์ หากผลลัพธ์ไม่เป็นไปตามที่คาดไว้หรือขัดแย้งกับสถานการณ์ที่ชัดเจน สิ่งที่จำเป็นไม่ใช่เรื่องอื้อฉาว แต่เป็นการประเมินใหม่โดยผู้เชี่ยวชาญเกี่ยวกับคุณภาพของตัวอย่าง องค์ประกอบของผู้เข้าร่วม และข้อยกเว้นทางชีววิทยาที่หายาก [31]

ตารางที่ 7 สถานการณ์ที่มักทำให้การตีความซับซ้อนขึ้น

สถานการณ์	ทำไมจึงสำคัญ?
การศึกษาโดยไม่ใช้กลุ่มตัวอย่างจากมารดา	ลดกำลังทางสถิติเมื่อเทียบกับการออกแบบแบบเต็มรูปแบบ
ผู้ที่อาจเป็นพ่อได้แก่ พี่ชายหรือญาติสนิทคนอื่นๆ	เพิ่มความเสี่ยงต่อการเปิดใช้งานผิดพลาด
ความไม่ตรงกันที่ไม่คาดคิดในบริเวณดีเอ็นเอ 1 บริเวณ	อาจเกี่ยวข้องกับการกลายพันธุ์และจำเป็นต้องทำการทดสอบเพิ่มเติม
ปรากฏการณ์ทางชีวภาพที่หายาก เช่น ภาวะไคเมอริซึม	พวกเขาอาจให้ข้อยกเว้นที่เป็นเท็จ
แหล่งที่มาของตัวอย่างไม่ได้รับการยืนยัน	ทำให้ข้อสรุปดังกล่าวมีความเสี่ยงทางกฎหมาย
การใช้วัตถุที่ไม่เป็นมาตรฐานแทนการใช้พู่กันแบบมาตรฐาน	เพิ่มความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนและข้อพิพาทเรื่องกรรมสิทธิ์ในวัสดุ

แหล่งที่มาของตาราง [32]

คำถามที่พบบ่อย

การตรวจพิสูจน์ความเป็นพ่อมีความแม่นยำแค่ไหน?
ด้วยการเก็บตัวอย่างและการดำเนินการในห้องปฏิบัติการที่เหมาะสม การตรวจนี้ถือว่ามีความแม่นยำสูง รายงานทางคลินิกมักระบุผลลัพธ์ 99.9% สำหรับข้อสรุปที่ยืนยันได้ ในขณะที่แนวทางปฏิบัติอย่างเป็นทางการของสำนักงานตรวจคนเข้าเมืองสหรัฐฯ ถือว่า 99.5% หรือสูงกว่านั้นเพียงพอที่จะสร้างความสัมพันธ์ทางชีวภาพได้ อย่างไรก็ตาม ความแม่นยำไม่ได้ขึ้นอยู่กับห้องปฏิบัติการเท่านั้น แต่ยังขึ้นอยู่กับผู้ที่เกี่ยวข้องในการทดสอบและวิธีการเก็บตัวอย่างด้วย [33]

สามารถทำการทดสอบโดยไม่มีแม่ได้หรือไม่?
ได้ แต่เป็นตัวเลือกที่มีประสิทธิภาพน้อยกว่าการออกแบบที่สมบูรณ์โดยมีแม่ การศึกษาที่มีผู้เข้าร่วมสองคนมักจะเปิดโอกาสให้มีการตีความทางสถิติที่ซับซ้อนมากขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งหากมีญาติสนิทอยู่ในกลุ่มพ่อที่เป็นไปได้ [34]

สามารถทำการทดสอบโดยไม่ต้องระบุตัวพ่อที่ถูกกล่าวหาได้หรือไม่?
บางครั้งก็ทำได้ โดยการตรวจสอบญาติสายเลือดใกล้ชิดของเขา อย่างไรก็ตาม นี่ไม่ใช่การทดสอบความเป็นพ่อโดยตรงแบบคลาสสิกอีกต่อไป แต่เป็นการศึกษาความสัมพันธ์ทางสายเลือดที่ซับซ้อนกว่า ซึ่งข้อสรุปมักจะไม่ตรงไปตรงมาและขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของญาติที่มีอยู่ [35]

การใช้สำลีป้ายแก้มเพียงพอหรือไม่ หรือต้องใช้เลือดด้วย?
ในกรณีส่วนใหญ่ การใช้สำลีป้ายแก้มก็เพียงพอแล้ว แหล่งข้อมูลอย่างเป็นทางการระบุว่าการใช้สำลีป้ายแก้มที่ทำอย่างถูกต้องนั้นมีความแม่นยำเทียบเท่ากับการตรวจเลือด นี่คือเหตุผลที่ถือว่าเป็นวัสดุมาตรฐานสำหรับการทดสอบความเป็นพ่อส่วนใหญ่ [36]

ศาลจะยอมรับการทดสอบที่บ้านหรือไม่?
โดยปกติแล้วจะไม่ การใช้งานอย่างเป็นทางการต้องมีการตรวจสอบตัวตนของผู้เข้าร่วมและความสมบูรณ์ของตัวอย่างที่บันทึกไว้ตั้งแต่การเก็บตัวอย่างจนถึงการยืนยันในห้องปฏิบัติการ ชุดทดสอบที่บ้านโดยทั่วไปไม่ได้ให้สิ่งนี้ [37]

เป็นไปได้หรือไม่ที่จะพิสูจน์ความเป็นพ่อในระหว่างตั้งครรภ์?
ได้ วิธีการที่ไม่รุกรานนั้นอาศัยดีเอ็นเอของทารกในครรภ์ที่อยู่ในเลือดของมารดา และโดยทั่วไปสามารถทำได้ตั้งแต่สัปดาห์ที่ 10 เป็นต้นไป นอกจากนี้ยังมีทางเลือกที่รุกราน แต่มีความเสี่ยงต่อการแท้งบุตร ดังนั้นจึงต้องพิจารณาแยกต่างหาก [38]

ระหว่างตั้งครรภ์ วิธีใดดีกว่ากัน: วิธีที่ไม่ต้องผ่าตัดหรือวิธีที่ต้องผ่าตัด?
หากเป้าหมายคือการตรวจสอบความเป็นพ่อมากกว่าการวินิจฉัยทางการแพทย์ก่อนคลอดที่จำเป็นสำหรับข้อบ่งชี้ทางสูติกรรม ในทางปฏิบัติมักจะฉลาดกว่าที่จะปรึกษาหารือเกี่ยวกับวิธีที่ไม่ต้องผ่าตัดก่อน การผ่าตัดมีความเสี่ยงจากขั้นตอนการผ่าตัด ดังนั้นจึงต้องตัดสินใจอย่างระมัดระวังเป็นพิเศษ [39]

การทดสอบอาจผิดพลาดได้หรือไม่ หากพ่อที่ถูกกล่าวหาเป็นพี่ชายของพ่อที่แท้จริง?
ใช่ กรณีเหล่านี้เป็นกรณีที่ยากที่สุด ญาติสนิทมักมี DNA ร่วมกันมากกว่าคนแปลกหน้า ดังนั้นความเสี่ยงที่จะเกิดผลบวกเท็จจึงเพิ่มขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งหากไม่มีตัวอย่างของแม่ [40]

มีการยกเว้นพ่อที่แท้จริงอย่างไม่ถูกต้องหรือไม่? เกิด
ขึ้นได้ยาก แต่ก็เกิดขึ้นได้ภายใต้สถานการณ์พิเศษ สาเหตุต่างๆ ที่อธิบายไว้ ได้แก่ การกลายพันธุ์ในภูมิภาคที่ศึกษา และปรากฏการณ์ที่หายากมาก เช่น ไคเมอริสซึม ซึ่งองค์ประกอบทางพันธุกรรมของเนื้อเยื่อต่างๆ ของบุคคลหนึ่งไม่ตรงกันอย่างสมบูรณ์ [41]

สามารถใช้การทดสอบลำดับวงศ์ตระกูลแทนการทดสอบความเป็นพ่อได้หรือไม่?
ไม่ได้ การทดสอบลำดับวงศ์ตระกูลและการทดสอบความเป็นพ่อมีวัตถุประสงค์ที่แตกต่างกัน ในการยืนยันความเป็นพ่อทางชีวภาพ จำเป็นต้องใช้การทดสอบบรรพบุรุษเฉพาะ ไม่ใช่การทดสอบบรรพบุรุษทั่วไปสำหรับผู้บริโภค [42]

การทดสอบดังกล่าวมีประโยชน์ทางการแพทย์ต่อเด็กหรือไม่?
ใช่ ในบางกรณี การระบุต้นกำเนิดทางชีวภาพช่วยให้สามารถรวบรวมประวัติครอบครัวได้อย่างแม่นยำยิ่งขึ้น และเข้าใจว่ามีภาวะทางพันธุกรรมใดในครอบครัวที่แพทย์ควรทราบหรือไม่ อย่างไรก็ตาม นี่ไม่ได้หมายความว่าการทดสอบความเป็นพ่อเป็นการทดสอบโรคโดยอัตโนมัติ [43]

บทสรุป

การตรวจดีเอ็นเอเพื่อพิสูจน์ความเป็นพ่อเป็นวิธีการตรวจทางพันธุกรรมที่มีความแม่นยำสูง ซึ่งจะได้ผลดีที่สุดเมื่อวัตถุประสงค์ชัดเจนล่วงหน้า มีการเก็บตัวอย่างอย่างถูกต้อง และห้องปฏิบัติการปฏิบัติตามมาตรฐานวิชาชีพ วิธีที่น่าเชื่อถือที่สุดคือการวิเคราะห์โดยตรงที่เกี่ยวข้องกับผู้เข้าร่วมสามคน ได้แก่ แม่ ลูก และผู้ที่ถูกกล่าวหาว่าเป็นพ่อ สำหรับขั้นตอนอย่างเป็นทางการ ไม่เพียงแต่ความแม่นยำของห้องปฏิบัติการเท่านั้น แต่ความถูกต้องของตัวอย่างที่ได้รับการบันทึกไว้ก็มีความสำคัญเช่นกัน [44]

ข้อจำกัดหลักของวิธีนี้ไม่ได้มาจากข้อเท็จจริงที่ว่า "ดีเอ็นเอสามารถโกหกได้" แต่มาจากข้อเท็จจริงที่ว่าสถานการณ์ครอบครัวที่แท้จริงอาจซับซ้อนกว่าสูตรง่ายๆ ญาติสนิทในหมู่พ่อที่เป็นไปได้ การไม่มีตัวอย่างจากมารดา การกลายพันธุ์ที่หายาก ภาวะคิเมริซึม การใช้วัตถุที่ไม่เป็นมาตรฐาน และความสับสนของความเป็นพ่อทางชีววิทยา สังคม และกฎหมาย สามารถทำให้การตีความซับซ้อนขึ้นอย่างมาก ดังนั้น การทดสอบที่ดีที่สุดจึงไม่ใช่แพ็กเกจส่งเสริมการขายที่ฉูดฉาดที่สุด แต่เป็นการตรวจสอบที่จัดอย่างเหมาะสมและได้รับการตีความอย่างมืออาชีพ [45]