งานทดลองเกี่ยวกับการปลูกถ่าย allogeneic keratinocytes บนแผลเป็นที่เกิดจากหนูขาว

ความปรารถนาที่จะใช้ศักยภาพของเซลล์และความต้องการในการค้นหาวิธีการใหม่ที่มีประสิทธิภาพในการปรับปรุงลักษณะความงามของรอยแผลเป็นทำให้เกิดความคิดที่จะพยายามศึกษาถึงความเป็นไปได้ที่การปลูกถ่าย keratinocyte จะทำให้เกิดรอยแผลเป็น

เพื่อพิสูจน์ความเป็นไปได้ของการใช้วัฒนธรรม keratinocyte เพื่อเพิ่มการปรากฏตัวของรอยแผลเป็นจากการทำงานที่ได้รับการทดลองทำในหนูทดลองสีขาวซึ่งถูกสร้างขึ้นบนพื้นผิวแผลเป็น หนูรุ่นแผลเป็นที่ถูกจัดทำขึ้นโดยเทียมรักษาบาดแผลแผลที่ด้านหลังพร้อมกระดูกสันหลัง หนูถูกตัดชิ้นส่วนของหนังเดียวกันขนาดของ 2x3 ซม. หลังจากที่ 2.5 เดือนหลังจากการดำเนินการ "จำลองรอยแผลเป็น" หนูได้ดำเนินการผ่าตัด Dermabrasion (การกำจัดของชั้นบนผ่าน ignioperation กระเพาะ) และปลูก keratinocytes allogenic ที่แยกออกมาจากผิวหนังของหนูหนุ่ม 2-4 วัน หลังคลอด

การแยกและการเจริญเติบโตของ epidermocytes หนูได้ดำเนินการในห้องปฏิบัติการของเทคโนโลยีโทรศัพท์มือถือของสถาบันวิทยาศาสตร์วิทยา RAS ของเทคโนโลยีต่อไปนี้

ผิวที่ได้รับการล้างในน้ำเกลือของแฮงค์ที่มี 200 U / ml gentamicin หั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ พื้นที่ 0.2-0.5 เซนติเมตร2ก้อนผิวถูกบ่มในสารละลาย disaspase 0.5% ในสารละลายน้ำเกลือที่มีความเค็มที่เป็นฟอสเฟตที่สมดุลที่ 37 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ชิ้นนี้ถูกถ่ายโอนไปยังน้ำเกลือฟอสเฟตของ Dulbecco และหนังกำพร้าถูกแยกออกจากผิวหนังชั้นหนังแท้ หนังกำพร้าถูกบ่มในสารละลาย trypsin 0.125% เป็นเวลา 10-15 นาทีด้วยการกวนที่ 50 รอบ / นาทีหลังจากนั้นการกระทำของเอนไซม์ถูกหยุดโดยการเพิ่ม 5% ของทารกในครรภ์เซรุ่ม หนึ่งในสามของการระงับเซลล์ที่ได้รับถูกนำมาใช้ในรูปแบบบริสุทธิ์สำหรับหนึ่งในรูปแบบของการปลูกถ่ายเป็นแผลเป็นที่สองที่สองคือการปลูกบนฟิล์มเคลือบชีวภาพ biocompatible "Polypor" ที่สามบนจาน Petri โดยไม่ต้องพื้นผิว การผ่าตัดแผลเป็นที่ได้รับจากแผลเป็นที่ได้รับในหนูที่มีการปลูกถ่าย epidermocytes หนูในภายหลังได้ดำเนินการภายใต้การดมยาสลบอีเทอร์โดยใช้เครื่องช่วยความร้อน

กลุ่มแรกของหนูหลังจาก Dermabrasion บนขัดล้างด้วยน้ำเกลือและผิวแห้งกระเพาะหมันทับชิ้นส่วนของสนามหญ้าซึ่งถูกวางตะกาย allogeneic หนู epidermotsitov สารละลายที่มีความเข้มข้น 1.5 ล้านเซลล์ต่อ 1 มล (ตามสถาบันของเซลล์วิทยา) ชิ้น Batistovye พอดีกับแผลเป็นขัดเพื่อให้เซลล์อยู่บนพื้นผิวของแผลเป็น ผ้าพันแผลของหลายชั้นของผ้าพันแผลถูกเย็บขึ้นด้านบนซึ่งถูกเย็บไปที่ขอบของแผลเป็น

เป็นส่วนหนึ่งของเซลล์แขวนลอยส่งผลให้ได้รับการชุบในอาหารเลี้ยงเชื้อผ่านการฆ่าเชื้อบนแผ่นฟิล์ม "Polipor" แกะสลักในรูปแบบของถ้วยที่ส่วนอื่น ๆ - บนจานเลี้ยงเชื้อโดยไม่ต้องภาพยนตร์ การเพาะปลูกดำเนินการในอาหาร FAD ประกอบด้วยส่วนผสมของ DMEM และ F12 ในอัตราส่วน 3: 1 เสริมด้วย 10% ซีรั่มวัวของทารกในครรภ์ 5 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรอินซูลิน (ซิกม่า) 0,5mkg / ml hydrocortisone hemisuccinate (ซิกม่า) 10 μg / ml ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง EGF (Institute of Cytology RAS, St. Petersburg) กลุ่มที่สองและสามของหนูที่มี 7 รายได้รับการผ่าตัด 6 วันหลังจากครั้งแรก โดยขณะนี้อาหารเลี้ยงเชื้อจากการหยุดชะงักของ keratinocytes เมล็ดรูปแบบพหุชั้นซึ่งได้รับการปลูกถ่ายหนู กลุ่มที่สองมีการปลูกถ่าย epidermocytes บนแผ่นฟิล์มกลุ่มที่สามซึ่งมีชั้นหลายชั้นโดยไม่มีพื้นผิว หลังจาก 7 วันส่งผลให้ชั้นหลาย allogichnyh keratinocytes (MPAlK) หว่านบน "Polipor" ภาพยนตร์ปลูกวัฒนธรรมโดยตรงบนพื้นผิวแผล ฟอยล์สูงสุดในการสั่งซื้อเพื่อหลีกเลี่ยงผ้ากอซหลายของ peelable ได้รับการแก้ไขและเย็บติดกับผิวของหนู

ก่อนที่จะย้ายปลูก keratinocytes กลุ่มที่สามของหนูปลูกโดยไม่ต้องสารตั้งต้นผลิตแยกของ PAC จากด้านล่างของการรักษาจาน Petri dispase ที่มีความสามารถในการเลือกที่จะทำลายการสื่อสาร Dermo-ผิวหนัง ภายใต้การกระทำของ dispase อ่างเก็บน้ำพหุทำลายการเชื่อมต่อของชั้นเซลล์แรกเริ่มที่ด้านล่างของจานเลี้ยงเชื้อและในระดับน้อยมากที่จะมีผลกระทบต่อการสื่อสารระหว่างเซลล์ซึ่งจะทำให้มันเป็นไปได้ที่ "ลบ" ชั้นทั้งหมด ความหนาแน่นของเซลล์ชั้นเนื้อเยื่อโดยการจำหน่ายได้กระทำดังนี้ จากจานเลี้ยงเชื้อผสมขนาดกลางขนย้ายแผ่นเซลล์ถูกล้างสามครั้งที่มีขนาดกลางที่มียาปฏิชีวนะโดยเฉพาะอย่างยิ่ง - gentamicin (0.2 mg / ml) ชั้น Multilayer ถูกเททางออกที่ 0125% dispase («ซิก») และวางไว้ในศูนย์บ่มเพาะที่พวกเขาได้รับการบ่มที่รับ t = 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20-30 นาที การปรากฏตัวของกลีบสีขาวปอกเปลือกรอบขอบของอ่างเก็บน้ำ - ตัวบ่งชี้ของการเริ่มต้นของกระบวนการของการแยกออกจากขอบและด้านล่างของจานเลี้ยงเชื้อ ไม่กี่นาทีหลังจากเริ่มกระบวนการแยกตัวสารละลายของ disaspase ผสานชั้นเยื่อบุผิวถูกล้างด้วยน้ำ 2-3 ครั้ง บนพื้นผิวของชั้นผิวหนังถูกนำไปใช้ตัดขนาดถ้วยชิ้นแผลปลอดเชื้อรวมทั้งการตกแต่ง "ลีธ์สีซึ่งเป็นที่ตัดแยกออกจากกันก่อ dispase, delamination เพิ่มเติมของด้านล่างของถ้วยด้วยไม้พาย. ใช้แหนบตาชั้นพร้อมกับการเคลือบผ้าเช็ดปากที่" ลีธ์สี "(รัสเซีย ) ผละออกจากด้านล่างของจาน Petri และระมัดระวังการถ่ายโอนไปยังพื้นผิวที่เตรียมของแผลเป็น. ผ้ากันเปื้อน "ลิตาสี" ที่มีในองค์ประกอบของมันและ eksolin gentamicin (สารสกัดคอลลาเจน) ซึ่งเมื่อสภาพแวดล้อมที่เปียกยังคงงอกในอนาคต เชมน้ำเกลือพองตัวและกลายเป็นเคลือบแผลที่ทันสมัยที่ให้การป้องกันที่ดีจากการติดเชื้อจากภายนอกและการรักษาอย่างรวดเร็วเนื่องจากความชื้นแฉะเริ่มแรกที่มีโครงสร้าง

ฟิล์ม Polyprop และผ้าเช็ดปาก Lita สีถูกปกคลุมด้วยผ้าพันแผลผ้าพันแผลที่ถูกเย็บบนผิวของหนูเพื่อยึดมั่นถาวรมากขึ้น หนูแต่ละตัวถูกสร้างขึ้นในกรงที่แยกต่างหากเพื่อสร้างสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการบำรุงรักษาและการผสมเกรนไทติเนียมที่ปลูก หนูผ้าพันแผลที่ปลูกระงับและพหุอ่างเก็บน้ำ epidermotsitov ยิง dispase ทุกวันวันละหลายครั้ง, ชุบน้ำเกลือฆ่าเชื้อในการสร้างเงื่อนไขที่ดีที่สุดเซลล์สำหรับ engraftment เมื่อพิจารณาว่าภาพยนตร์เรื่อง "Polypor" ไม่สามารถซึมน้ำได้หนูกลุ่มที่สองไม่ได้หล่อเลี้ยงแผลซึ่งเป็นข้อได้เปรียบเหนือการปลูกถ่ายโดยไม่ใช้ฟิล์ม หลังจาก 10 วันผ้าพันแผลถูกถอดออก ภาพทางคลินิกของแผลเป็นหลังจากการปลูกถ่ายเซลล์แตกต่างจากรอยแผลเป็นโดยไม่ต้องถ่ายเทยกเว้นการมีสีชมพูมากขึ้น (เนื่องจากการสึกกร่อน) และการปอกเปลือกมากขึ้น ความเป็นจริงนี้ชี้ให้เห็นว่า ว่าทันทีหลังจากการหายแผลด้วย IPC ไม่มีการเปลี่ยนแปลงเกิดขึ้นในกระเพาะอาหาร

การตรวจชิ้นเนื้อในหนู

หลังจาก 1, 2, 5 และ 9 เดือนหลังจากการถ่ายโอน keratinocytes alogic rat มายังรอยแผลเป็นที่หนองขาวของหนูขาววัสดุดังกล่าวถูกนำมาใช้ในการตรวจทางจุลกายวิภาควิทยาและกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน เป็นตัวอย่างการควบคุมของผิวหนังหนูปกติและแผลเป็นถูกถ่ายโดยไม่ต้องปลูกถ่ายเซลล์ การดมยาสลบในหนูได้รับการดมยาสลบด้วยอีเทอร์

หลังจากการระงับความรู้สึกแล้วจากพื้นที่ที่ทำเครื่องหมายไว้ว่าเป็นไครโนไทเซียที่ปลูกถ่ายที่เจาะเนื้อเยื่อที่มีเส้นผ่านศูนย์กลาง 2 มิลลิเมตร ชิ้นเนื้อเยื่อแผลเป็นถูกนำมาวางไว้ในสารละลาย glutaraldehyde 2.5% เพื่อเตรียมวัสดุสำหรับการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ชิ้นส่วนของเนื้อเยื่อนำสำหรับการตรวจสอบทางเนื้อเยื่อถูกวางไว้ในการแก้ปัญหาที่เป็นกลางฟอร์มาลิน 10% ตามด้วยแอลกอฮอล์ผ่านการเดินสายไฟและเติมเต็มในพาราฟินตามด้วยการตัดส่วนที่บางเฉียบและดูพวกเขาในกล้องจุลทรรศน์แสงออปติคอล

ควบคุม I. ผิวหนูตามปกติ

เพื่อดูความแตกต่างระหว่างภาพกล้องจุลทรรศน์ของผิวหนังแผลเป็นที่เปลี่ยนแปลงตามปกติของหนูและรอยแผลเป็นในบางช่วงเวลาหลังจากการปลูกถ่าย IPC ภาพและคำอธิบายต่อพวกเขาในทุกขั้นตอนของการศึกษานี้แสดงให้เห็น

หนังกำพร้าของผิวธรรมดาประกอบด้วย 7-9 ชั้นของเซลล์ ชั้นเงี่ยนหนาปานกลาง ในสถานที่ที่ประกอบด้วย 6-8 ชั้นของเครื่องชั่งมีเขา ชั้นพื้นฐานจะแสดงด้วยเซลล์รูปทรงกระบอกที่มีแสงขนาดใหญ่เป็นนิวเคลียสปกติและหลาย nucleoli การแสดงออกของ Desmosomal ระหว่างเซลล์และเมมเบรนพื้นฐานจะแสดงออกอย่างชัดเจน ภายใต้เมมเบรนพื้นฐานที่ทำเครื่องหมายไว้อย่างดีซึ่งมีโพรงเล็ก ๆ ในชั้นใต้ผิวหนังขนานกับมันเป็นกลุ่มของเส้นใยคอลลาเจนและอิลาสตินซึ่งมีรูปแบบของเส้นใยยาวเป็นเส้นเลือดเล็ก ๆ ในชั้นลึกการรวมกลุ่มของเส้นใยคอลลาเจนและอีลาสติจะอยู่ในทิศทางที่ต่างกัน ในหมู่พวกเขามีเรือจำนวนมากที่มีผนังบาง ๆ ที่มีขนาดเดียวกันองค์ประกอบของเซลล์ (ไฟโบรบลาสต์เซลล์เสาข้าว leukocytes) ในรูขุมขนมีจำนวนมากต่อมไขมัน

ควบคุมแผลของหนู 2 เดือน

ภาพทางคลินิก รอยแผลเป็นสีชมพูอ่อนกับการปอกเปลือกในสถานที่ที่เปลือกโลกยังคงอยู่ พื้นที่ของพวกเขาจะลดลงเนื่องจากการหดตัวของเส้นใยคอลลาเจนและกลายเป็นประมาณ 3.0-3.5 ซม. :ไม่มีสิ่งที่แนบมากับผิวหนัง

ภาพกล้องจุลทรรศน์ ชั้นหนังกำพร้าประกอบด้วยเซลล์ 3-5 ชั้นพับเก็บได้เป็นตัวแทนของเซลล์ที่มีรูปร่างกลมรูปทรงกลมหนึ่งแถวเรียงราย 1-2 แถวเม็ดเม็ดเล็ก ๆ ที่มีเมล็ด keratogialin ในชั้นบนมีส่วนของอาการบวมน้ำภายในเซลล์ ชั้นกระจกตามีการเปลี่ยนแปลงอย่างไม่เหมือนกันจากที่บางจนหนาขึ้น มีการพับของกระเพาะอาหารที่เกิดจากการหดตัวของเนื้อเยื่อแผลเป็น รอยพับทะลุไปที่ชั้น papillary และให้ความรู้สึกของ papillae ขอบเขตระหว่างผิวหนังชั้นหนังแท้และผิวหนังชั้นหนังแท้เป็นเส้นตรง ไม่สามารถตรวจสอบเมมเบรนพื้นฐานได้ทุกหนทุกแห่ง ในส่วนล่างของชั้น subepidermal และลึก - เรือที่มีผนังหนาหลวมหลายคนรกร้างกับปรากฏการณ์การชะงักงัน รอบเรือ - กลุ่ม macrophages, fibroblasts macrophages ล้อมรอบเม็ดเลือดแดงที่เกิดขึ้นจากเส้นเลือดฝอยและ phagocytize พวกเขา ในชั้นผิวเผินมากขึ้น - หลอดเลือดฝอยเล็ก ๆ เส้นใยคอลลาเจนจะหลวมภายใต้ผิวหนังชั้นนอก ในชั้นลึกของกลุ่มก้อนหยาบของเส้นใยคอลลาเจนซึ่งมีหลาย ๆ

รอยแผลเป็นของหนูหนึ่งเดือนหลังจากการปลูกถ่ายกระดูกอ่อนของหนู rat MPA

ภาพทางคลินิก แผลเป็นสีชมพูพื้นที่ของพวกเขาจะลดลงโดยเฉพาะอย่างยิ่งในเส้นผ่าศูนย์กลางเฉลี่ย 2.5-3 ซม. 2ผมและต่อมไขมันขาด

ข้อมูลจากการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของวัสดุที่ได้จากหนูที่มีการปลูกถ่าย MPALK บนแผ่นฟิล์มและ MPALK โดยไม่มีพื้นผิวเป็นเหมือนกันในทางปฏิบัติ อย่างไรก็ตามในทางเทคนิคทำงานกับ MPAlK ได้รับการสนับสนุนมากขึ้นยากและลำบากกว่าเมื่อเติบโตขึ้น MPAlK บนพื้นผิวเพื่อการศึกษาต่อไปของปัญหาในการปลูก kertainotsitov รอยแผลเป็นที่เราใช้เป็นพื้นฐานสำหรับการเพาะปลูก ( "สารตั้งต้น") สนามหญ้าชั้น

ภาพกล้องจุลทรรศน์ มีความหนาของหนังกำพร้าถึง 15-20 ชั้นเกือบจะตรงกลางของที่ keratinocytes มีรูปทรงแคบยาวในแนวตั้งและการจัดกะทัดรัด เซลล์ต้นกำเนิดจัดอยู่ในแนวราบ นิวเคลียสของพวกเขามีน้ำหนักเบาขนาดใหญ่กลมมีรูปร่างหนึ่งหรือสองนิวเคลียสซึ่งแสดงถึงกิจกรรมสังเคราะห์และการขยายตัวที่สูง ขอบเขตระหว่างผิวหนังชั้นหนังแท้และผิวหนังชั้นหนังแท้เป็นเส้นตรง ชั้นหนามมีการพัฒนาดีประกอบด้วย 3-5 ชั้นของเซลล์ที่มีรูปร่างกลมมี 2 เซลล์นิวเคลียส

ทันทีภายใต้เมมเบรนฐาน - การรวมกลุ่มบาง ๆ ของเส้นใยคอลลาเจนขนานกับพวกเขาเป็นจำนวนมากของภาชนะที่ว่างเปล่าเส้นใยคอลลาเจนลึกจะหยาบรวบรวมในกลุ่มหนาแน่น เซลล์เม็ดเลือดใหญ่จำนวนมาก (2-3 ในด้านการมองเห็น) macrophages leukocytes และหลอดเปล่าซึ่งผนังที่หลวมอยู่รอบ ๆ พวกเขาจะมีเส้นใยคอลลาเจนคลาย ในเรือบาง - ภาวะหยุดชะงัก, diapedesis ขององค์ประกอบสม่ำเสมอ รอบหลอดเลือด - ไฟโบรบลาสต์, lymphocytes เดี่ยว ไม่มีสิ่งที่แนบมากับผิวหนัง

เมื่อมีการถ่ายครรภ์ keratinocyte ไปยังแผลเป็นที่ขัดแล้วภาพกล้องจุลทรรศน์จะแตกต่างจากภาพก่อนหน้า ในสัตว์ส่วนใหญ่ - ชั้นหนังกำพร้ามีความบางประกอบด้วย 5-6 ชั้นของเซลล์ ชั้นล่างประกอบด้วยเซลล์ที่มีรูปร่างผิดปกติรูปหลายเหลี่ยมที่มีรูปทรงกลมเป็นรูปนิวเคลียสไม่สม่ำเสมอ สภาพของชั้น subepidermal คล้ายกับในกลุ่มสัตว์ที่ไม่มีการปลูกถ่าย

ในกรณีนี้เราสามารถพูดถึงความล่าช้าของกระบวนการที่มาพร้อมกับการปลูกถ่ายเซลล์หรือการสูญเสียขนาดใหญ่ของเซลล์ที่ปลูกในรูปแบบของการระงับ ดังนั้นจึงสรุปได้ว่าการแก้ไขรอยแผลเป็นโดยการปลูกถ่าย keratinocyte ในรูปแบบของการระงับไม่เหมาะสม

รอยแผลเป็นจากหนู 2 เดือนหลังการปลูกถ่ายไขกระดูกของหนูอัลมอนด์ (MPAl rat rat keratinocytes)

ภาพทางคลินิก แผลเป็นดูผอมบาง ในสถานที่ที่มี ecdysis เกล็ด

ภาพกล้องจุลทรรศน์ ชั้น corneum หนาขึ้นในสถานที่ - hyperkeratosis หนังกำพร้าจะหนาขึ้นประกอบด้วย 12-20 แถวของเซลล์ ขอบเขตระหว่างผิวหนังชั้นหนังแท้และผิวหนังชั้นหนังแท้เป็นเส้นตรง เส้นใยคอลลาเจนที่ละเอียดใต้หนังกำพร้านอนราบรื่น ในชั้นลึกของกระเพาะอาหารพวกเขาจะถูกเก็บรวบรวมในกลุ่มใหญ่หยาบ ในชั้น subepidermal การก่อตัวของเรือใหม่จะปรากฏขึ้น ในชั้นล่างของเนื้อเยื่อแผลเป็น - ภาชนะเปล่าจำนวนมากซึ่งอยู่ขนานไปกับผิวของหนังกำพร้า ไฟโบรบลาสต์ขนาดใหญ่กระจายอยู่อย่างสม่ำเสมอในความหนาของกระเพาะอาหารมียีนขนาดมหึมาจำนวนมาก

รอยแผลเป็นจากหนู 5 เดือนหลังการปลูกถ่ายสปอร์ของหนูขาว

ภาพทางคลินิก แผลเป็นดูเรียบเนียนโดยไม่ต้องปอกเปลือกมีผมคนเดียวของความหนาแน่นมากขึ้นของพวกเขาในรอบนอกของแผลเป็นซึ่งบ่งชี้ขอบรูขุมขนคุดในกระเพาะรูเมนและเนื้องอกของรูขุมขน พื้นที่รอยแผลเป็นยังคงลดลง

ภาพกล้องจุลทรรศน์ หนังกำพร้ายังคงหนา (15-20 ชั้นบางครั้งถึง 30) ในชั้นบนจะเต็มไปด้วยธัญพืช keratogialin เยื่อแผ่นรองพื้นสามารถมองเห็นได้ชัดเจน ภายใต้เส้นใยคอลลาเจนของเธอหลวม ในชั้นล่าง - คอลลาเจนมีประสิทธิภาพและแน่นขึ้น ในหมู่คานของคอลลาเจนที่มีเส้นเลือดฝอยมาก ๆ .. ในชั้นบนจำนวนของภาชนะที่ว่างเปล่าลดลง หนังกำพร้าและหนังแท้มีความหยักเล็กน้อย มีเนื้อเยื่อแผลพุพองลึกในเนื้อเยื่อแผลเป็น เส้นใยคอลลาเจนเป็นเส้นใยที่เกิดขึ้นใหม่ ปรากฏว่ามีรูขุมขนเพียงเส้นเดียวและต่อมไขมัน

รอยแผลเป็นจากหนู 9 เดือนหลังการปลูกถ่าย epidermocytes หนู rat

ภาพทางคลินิก รอยแผลเป็นมีขนาดเล็กมากเมื่อเทียบกับช่วงก่อนหน้านี้และค่าเฉลี่ยพื้นที่ของพวกเขาเกี่ยวกับ 1.5-2.0 ซม. 2แผลเป็นไม่สม่ำเสมอปกคลุมด้วยเส้นผมโดยเฉพาะรอบปริมณฑล ยังคงมีการปรับขนาดแผ่นเล็ก ๆ ไว้

ภาพกล้องจุลทรรศน์

หนังกำพร้ากลายเป็นทินเนอร์แสดงจาก 6-8 แถวของเซลล์ทำให้ระลึกถึงโครงสร้างผิวหนังของผิวหนังตามปกติของหนูมีเพียงความหนาแน่นของเซลล์ประมาณ 1 มม. สูงกว่าและมีขนาดเล็ก ชั้นฐานประกอบไปด้วยเซลล์ขนาดเล็กที่มีรูปร่างกลมกลม เมมเบรนพื้นฐานสามารถระบุได้ชัดเจน hemidesmosomes สามารถมองเห็นได้ชัดเจน การปรากฏตัวของ outgrowths ผิวหนังในชั้น subepidermal มีการระบุไว้ ชั้น papillary แสดงตามความยาวทั้งหมดของแผลเป็น ข้อเท็จจริงเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าในช่วงเวลานี้การยึดติดของ keratinocytes ที่ปลูกแล้วมีความหมายขึ้นอย่างมากกับเนื้อเยื่อพื้นฐานของกระเพาะอาหาร ดังนั้นการดูแลแผลเป็นของผู้ที่ย้าย MALC เป็นเวลา 9 เดือนหลังจากการปลูกถ่าย IPC เป็นแบบดั้งเดิม ภายใต้ผิวหนังชั้นหนังแท้เป็นเส้นใยคอลลาเจนละเอียดอ่อนกว่าชั้นลึก มีเรือจำนวนมากโดยเฉพาะอย่างยิ่งตั้งอยู่ ในเรือขนาดใหญ่ผนังจะหนาขึ้น รูขุมขนและต่อมไขมันในปริมาณมาก รูปแบบกล้องจุลทรรศน์คล้ายกับเนื้อเยื่อผิวหนัง

ผลการทดลองและการอภิปราย

ในระหว่างการทำงานนี้บนรอยแผลเป็นเทียมผิวของหนูหลังจาก Dermabrasion การดำเนินงาน keratinocytes ปลูกในหลาย formah- บนพื้นผิวแผลเช่นในการระงับลินินและการก่อชั้นโดยไม่ต้องสารตั้งต้น งานวิจัยนี้ทำเพื่อให้ได้ข้อมูลทางสัณฐานวิทยาเกี่ยวกับผลของ keratinocytes allogenic ที่ปลูกบนรอยแผลเช่นเดียวกับการกำหนดรูปแบบการปลูกถ่ายที่ดีที่สุด

พบว่าทั้งสามวิธีการปลูกถ่ายมีความเป็นจริง แต่การปลูกถ่าย IPAA โดยไม่มีพื้นผิวเป็นขั้นตอนที่ลำบากมากในระหว่างที่ IPAC อาจได้รับบาดเจ็บซึ่งส่งผลต่อผลของการปลูกถ่าย นอกจากนี้วิธีการปลูกถ่ายนี้ยังไม่รวมการทำงานบนพื้นผิวที่มีขนาดใหญ่

การปลูก keratinocyte ระงับ - เป็นวิธีการอย่างมีนัยสำคัญประหยัดมากขึ้นไม่ต้องใช้เซลล์เพาะเลี้ยงนานและง่ายในการศูนย์รวมปัจจุบันติดต่อโดยใช้ preforms ลินินหมันมิติซึ่งสอดคล้องกับมูลค่าของรอยแผลเป็น Backlog ผลการรักษาเมื่อปลูกระงับเซลล์ประมาณเดือนเมื่อเทียบกับ IPC บนวัสดุปิดแผล - ไม่ได้เป็นช่วงเวลาที่สำคัญเมื่อระยะเวลาของปริมาณการรักษาไปหลายเดือน เป็นที่ทราบกันดีว่าในระหว่างการย้าย IPC เพื่อเผาผลาญผู้ป่วยการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างผิวเกิดขึ้นอย่างค่อยเป็นค่อยไปและเป็นเวลาหลายปี การปลูกถ่ายวัฒนธรรม keratinocyte บนวัสดุแผลเป็นวิธีการที่สะดวกและมีแนวโน้มมากที่สุด แต่ก็มีราคาแพงกว่ามาก นอกจากนี้ยังกำหนดให้การค้นหาสำหรับวันนี้การปรับปรุงพันธุ์ไม้แปรรูปซึ่งควรจะยืดหยุ่นดูดความชื้นมีคุณสมบัติฆ่าเชื้อแบคทีเรียหรือเชื้อแบคทีเรียและเพื่อให้ทางชีวภาพที่เป็นกลางสำหรับเซลล์ ภาพยนตร์เรื่อง "Polipor" - รุ่นกลางของความคุ้มครองภาพยนตร์แผลในประเทศแม้จะมีข้อบกพร่องบางอย่างได้รับอนุญาตให้เราศึกษาหนูปลูก keratinocyte ทดลองบนแผลเป็นและการวาดข้อสรุปเกี่ยวกับประสิทธิผลของทิศทางนี้สถานที่เกิดแผลเป็น

ผู้แต่งที่ดำเนินการฝังเข็ม IPC ในบาดแผลที่ถูกเผาไหม้กล่าวว่าในช่วงสัปดาห์แรกหลังจากการปลูกถ่ายชั้นของผิวหนังชั้นหนังกำพร้าหลายชั้นบนแผลที่ได้รับการทำความสะอาดผิวชั้นหนังกำพร้าหนาขึ้นและแบ่งชั้น ทุกชั้นของหนังกำพร้าถูกกำหนดไว้อย่างชัดเจน เป็นที่น่าสนใจว่าจำนวนของเซลล์ชั้นในการปลูกถ่ายเป็น 10-30% มากกว่าในชิ้นเนื้อเยื่อผิวหนัง ผู้เขียนตั้งข้อสังเกตการปรากฏตัวของเม็ดของ keratogialin ในวันที่ 5 หลังจากการปลูกถ่าย MPA, basal membrane และ hemidesmosomes - แล้วในวันที่สาม

J.Rives et al. (L994), Paramonov BA (1996); NM คัซ et al. (1998) พบว่าในช่วงต้นดังต่อไปนี้ผู้ป่วยปลูกถ่าย BMD ที่มีข้อบกพร่องผิว polnosloynymi หลังจากการเผาไหม้, การสื่อสารระหว่างผิวชั้นหนังแท้และหนังกำพร้าจะอ่อนแอมากและเป็นเส้นตรงชั้น papillary ขาด เมื่อปลายเดือนที่ 2 การสร้างตับและส่วนตึงของผิวหนังเริ่มต้นขึ้นการเชื่อมต่อระหว่างผิวหนังชั้นหนังแท้และหนังกำพร้าจะมีความคงทนมากขึ้น ข้อมูลจากวรรณคดีกล่าวถึงการปลูกถ่ายเม็ดเลือดแดงที่มีลักษณะผิดปกติในบาดแผลของผู้ป่วยที่ถูกเผาเป็นวิธีที่มีแนวโน้ม แม้จะมีความจริงที่ว่าการปฏิเสธของ keratinocytes allogeneic เกิดขึ้นส่งโดยผู้เขียนต่าง ๆ ในช่วงเวลาตั้งแต่ 10 วันถึง 3 เดือน แต่พวกเขามีบทบาทในการรักษาของพื้นผิวแผลปล่อยปัจจัยการเจริญเติบโตและกลไกการปิดข้อบกพร่อง เป็นที่เชื่อกันว่า MPALK มีฤทธิ์ต้านเชื้อโรคลดลงเนื่องจากในระหว่างการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองเซลล์ Langerhans เสียซึ่งช่วยให้พวกเขามีชีวิตอยู่ได้เป็นเวลานานในร่างกายของผู้รับ นอกจากนี้วัฒนธรรมที่ได้รับจากผิวของคนหนุ่มสาวที่มีสุขภาพดีมีศักยภาพทางชีวภาพสูงกว่าวัฒนธรรม autologous ของผู้ป่วยหลังการบาดเจ็บ

เป้าหมายหลักของการศึกษาของเราคือการหาว่า keratinocytes allogenic จะอยู่รอดบนรอยแผลเป็นและสิ่งที่จะมีการเปลี่ยนแปลงในเนื้อเยื่อแผลเป็นภายใต้อิทธิพลของเช่น "การเคลือบแผล" ที่ใช้งานทางชีวภาพ ในกรณีที่มีผลบวกให้หาเทคโนโลยีที่มีประสิทธิภาพและใช้แรงงานน้อยที่สุดในด้านการฟื้นฟูสมรรถภาพนี้

ข้อมูลที่ได้รับจากเราในหลาย ๆ ด้านได้กลายเป็นข้อมูลทางวรรณคดีเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาที่เกิดขึ้นในผิวหนังมนุษย์หลังจากการถ่ายโอน keratinocytes allogenic เพื่อเผาผลาญ แต่มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทั้งในแง่ของพื้นผิวทางสัณฐานวิทยาที่ถูกปลูกและในแง่ของเทคโนโลยี ดังนั้น กระบวนการของการก่อตัวของเมมเบรนพื้นฐานและการเชื่อมต่อ dermo-epidermal (hemidesmosomes, papillae) เกิดขึ้นในวันหลัง ๆ มากกว่าการปลูกถ่าย keratinocyte ไปยังพื้นผิวแผลที่ไม่มีการเปลี่ยนแปลงของแผลเป็น นี้ดูเหมือนจะเป็นเพราะโภชนาการที่ไม่ดีของเนื้อเยื่อในกระเพาะอาหารเมื่อเทียบกับผิวหนังชั้นหนังแท้หรือกล้ามเนื้อ แผลเป็นโดยเฉพาะอย่างยิ่งเก่าเป็นเนื้อเยื่อเกี่ยวพันหนาแน่นที่มีจำนวนน้อยมากของเรือด้านล่างของแผลเป็นการเผาไหม้เป็นเนื้อเยื่อเม็ดที่อุดมไปด้วยหลอดเลือด ดังนั้นจึงเป็นที่ชัดเจนว่าเงื่อนไขที่การปลูกถ่ายและการเกิดขึ้นของ keratinocytes เกิดขึ้นแตกต่างกันอย่างสิ้นเชิง พื้นที่ของการปลูกถ่ายเซลล์มากขึ้นจะทำให้กระบวนการเหล่านี้ง่ายขึ้น จากข้อสรุปนี้มีข้อสรุปเกี่ยวกับการตั้งค่าสำหรับการทำงานกับรอยแผลเป็นเล็ก ๆ ซึ่งเนื้อเยื่อเกี่ยวพันยังคงหลวมและอุดมไปด้วยเส้นเลือด

อันเป็นผลมาจากการทดลองงานนี้พิสูจน์ให้เห็นว่า:

1. การปลูกถ่าย MALK ต่อรอยแผลเป็นเป็นไปได้ 
2. วิธีที่ดีที่สุดในการปลูกถ่ายคือการปลูก keratinocytes บนแผล
3. พื้นผิวของรอยแผลเป็นควรเป็นพื้นโดยใช้แผ่นหนังศีรษะผ่าตัดโดยใช้เลเซอร์ของ Schumann หรือเครื่องตัด
4. ภายใต้อิทธิพลของ MPALK จะทำให้เกิดการพ่นสีผิวของกระเพาะอาหารได้อย่างรวดเร็ว
5. เนื้อเยื่อแผลเป็นที่ดีขึ้นนั่นคือแผลเป็นที่มีอายุน้อยกว่าผลการปลูกถ่าย keratinocyte ดีขึ้น
6. เนื้อเยื่อแผลเป็นภายใต้อิทธิพลของ keratinocytes ปลูกจะค่อยๆเปลี่ยนและกลายเป็นผิวหนังเหมือน (เนื้อเยื่อแผลเป็นมากขึ้นกับส่วนที่เป็นของผิว)
7. การคลายตัวของแผลเป็นค่อยเป็นค่อยไปเริ่มต้นด้วยชั้น subepidermal ช่วยเพิ่มการหดตัวของเส้นใยคอลลาเจนของเส้นใยคอลลาเจนในส่วนบนและล่างของกระเพาะอาหารได้ดีกว่าสถานที่ที่น่ากลัวกว่าในเนื้อเยื่อแผลเป็นโดยไม่ต้องถ่ายเทเซลล์ มีรูขุมขนและต่อมไขมัน ผิวชั้นในในโครงสร้างของมันหลังจากผ่านช่วงของการเจริญเติบโตมากเกินไปจะเข้าสู่ผิวหนังชั้นหนังแท้
8. การเปลี่ยนแปลงที่สังเกตได้เกี่ยวข้องกับปัจจัยการเจริญเติบโตที่ได้มาจาก keratinocyte cytokines ซึ่งช่วยปรับปรุงการถือกำเนิดของเนื้อเยื่อแผลเป็นและช่วยในการเปลี่ยนเนื้อเยื่อเส้นใยหยาบให้หลวมขึ้นซึ่งจะนำไปสู่การปรับปรุงประเภทของแผลเป็น

ดังนั้นผลการศึกษานี้จึงสามารถสรุปได้ว่าผลดีของ keratinocytes ที่ปลูกในเนื้อเยื่อแผลเป็นซึ่งอาจมีความสำคัญในทางปฏิบัติสำหรับการฟื้นฟูสมรรถภาพของผู้ป่วยที่มีแผลเป็นประเภทต่างๆ

งานนี้ยังได้รับอนุญาตให้กำหนดความต้องการ ให้แผลที่แผลที่มีการเจริญเติบโต keratinocytes

รอยเปื้อนควรเป็น:

• biocompatible กับเซลล์,
• ระบายอากาศได้
• มีความยืดหยุ่นรูปแบบการสร้างฐาน,
• เป็น hydrophilic,
• เนื่องจากสารเติมแต่งสมุนไพรมีสารต้านแบคทีเรียและสารต้านอนุมูลอิสระไม่เป็นพิษต่อเซลล์เพาะเลี้ยง

ผลลัพธ์ทางคลินิกของการรักษาแผลเป็นด้วยเทคโนโลยีชีวภาพ

ก่อนหน้านี้ N. Carver et al. (1993) พบว่าแผลเป็น occlusive ที่ดีที่สุดสำหรับการยึดติดกับแผลและการอยู่รอดของ keratinocytes แต่ไม่อนุญาตให้มีการก่อตัวของชั้นหนังกำพร้า (ผู้ใหญ่) ในการสร้างผิวหนังชั้นผิวหนังเป็นสิ่งจำเป็น ดังนั้นหลังจากติดตั้งชั้นที่มีหลายชั้นแล้วแผลที่ปกคลุมด้วย occlusive ได้แนะนำหลังจาก 7-10 เพื่อลบและทำแผลภายใต้ผ้าพันแผลที่แห้งหรือขี้ผึ้งละลายน้ำ เราสามารถพูดได้ว่าคุณภาพและคุณสมบัติของ "พื้นผิว" ที่เซลล์มีการเจริญเติบโตมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อประสิทธิภาพของการปลูกถ่ายวัสดุเซลล์และผลที่ได้จากการทำงานของแพทย์ แต่แผลที่เหมาะสำหรับการแต่งกายสำหรับวันนี้ไม่ได้ทั้งๆที่มีความอุดมสมบูรณ์ของตัวเลือกที่นำเสนอ (หนังเทียม, ผ้าไม่ทอเซลลูโลส carboxymethyl เคลือบ fibrin ฟิล์มยูรีเทนกึ่งดูดซึม) ช่วงเวลาที่ไม่สำคัญในเรื่องนี้คือต้นทุนของ "พื้นผิว" (การเคลือบผิวพิเศษ) เนื่องจากต้นทุนที่สูงขึ้นทำให้ต้นทุนการรักษาด้วยเทคโนโลยีชีวภาพเพิ่มขึ้น

ประสิทธิภาพของเทคโนโลยีโทรศัพท์มือถือได้รับการพิสูจน์แล้วถึงวันที่ แต่น่าเสียดายที่เทคโนโลยีเหล่านี้มีราคาแพงมากโดยเฉพาะอย่างยิ่งในประเทศที่ไม่ได้จัดตั้งอุตสาหกรรมการผลิตส่วนประกอบของเซลล์ อย่างไรก็ตามประเทศเช่นสหรัฐอเมริกาได้สร้างอุตสาหกรรมขึ้นมานานสำหรับการผลิตวัสดุเคลื่อนที่เพื่อการปลูกถ่ายเผา โดยเฉพาะอย่างยิ่ง บริษัท BioSurface Technology Inc, ตั้งแต่ปี 1989 เพิ่มขึ้น 37,000 ชั้นลามิเนตของ keratinocytes ซึ่งได้รับการใช้สำหรับการรักษาของผู้ป่วย 240 ใน 79 ประเทศทั่วโลก (R.Odessey, 1992) กับ 1 ซม. ²การเพาะเลี้ยงเซลล์ค่าใช้จ่ายประมาณ 7-8 $ US

เทคโนโลยีในการรักษาโรคต่างๆและปัญหาผิวมีจำนวนแตกต่างกัน แต่หัวใจของการรักษาด้วยเซลล์ใด ๆ คือการผลิตวัสดุเซลล์ที่มีคุณภาพและการปลูกถ่ายของมัน

กระบวนการนี้ประกอบด้วยขั้นตอนต่อไปนี้:

• เลือกผิวจากผลกระทบ (หรือจากผู้บริจาค)
• การขนส่งของผิวหนัง flaps ไปยังศูนย์เทคโนโลยีชีวภาพ,
• การแยกเซลล์ของชั้นพื้นฐานและการคูณของพวกเขา,
• การสะสมของชั้นเรณู (IPC) หลายชั้น
• การเพาะเลี้ยงเซลล์

ปัญหาหลักในการรักษาด้วยการปลูกถ่ายชั้น keratinocyte หลายเซลล์เป็นความต้องการเซลล์ที่มีชีวิตได้ในทุกขั้นตอนของการปลูกถ่ายเซลล์ ชิ้นสกินสำหรับการแยกเซลล์ autologous หรือ allogenic ควรจะบางเท่าที่เป็นไปได้เนื่องจากในกรณีนี้พวกเขาจะง่ายต่อการแยกออกโดยใช้วิธีการทางกลและเอนไซม์และเพื่อให้ได้การระงับเซลล์ที่มีชีวิตสำหรับการเจริญเติบโต พวกเขาสามารถรับได้โดยการตัด dermatome หรือใช้ผิวของเปลือกตา, หนังหุ้มปลายลึงค์, พื้นผิวด้านในของไหล่ เนื่องจากเซลล์มีความไวต่อฮาโลเจน (คลอรีนไอโอดีน) ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์พวกเขาไม่สามารถใช้ในการรักษาผิวได้ในขณะที่รับสาร

ผลผลิตเชิงปริมาณและเชิงคุณภาพของเซลล์จากการปลูกถ่ายผิวหนังและประสิทธิภาพของการเพาะปลูกยังขึ้นอยู่กับสถานะสุขภาพและอายุของผู้บริจาค นอกจากนี้ควรส่งตัวอย่างเนื้อเยื่อผิวหนังไปยังห้องปฏิบัติการโดยเร็วที่สุดและในสภาพแวดล้อมที่เหมาะสม (สภาพแวดล้อมอุณหภูมิ) ที่ส่งไปยังห้องปฏิบัติการที่ได้รับการรับรองและได้รับการรับรอง

สาหร่าย Eagle ขนาดปานกลางถึงปานกลาง 199 ที่มีการเติมซีรั่มโควต้า 10%, อาหาร DMEM ที่เสริมด้วย 5% ของทารกในครรภ์มีซีรั่มและยาปฏิชีวนะสามารถจัดเก็บและขนส่งผิวหนังได้

ในห้องปฏิบัติการ cytological การตรวจชิ้นเนื้อครั้งแรกจะถูกแบ่งเป็นชิ้นเล็ก ๆ จากนั้นการประมวลผลชิ้นส่วนผิวจะกระทำโดยใช้เอนไซม์: trypsin, collagenase, dyspase ฯลฯ

ภายใต้การกระทำของเอนไซม์การทำลายโดย desmosomes เกิดขึ้นและ keratinocytes จะถูกปล่อยออกสู่สื่อเป็นเซลล์แยกหรือมวลรวมของเซลล์ที่แตกต่างกัน สำหรับการเพาะเลี้ยงพบว่ามีการใช้ keratinocytes พื้นฐานที่ปลูกในอาหารพิเศษในตู้อบที่มีส่วนผสมของ CO 5% ในอาหาร Petri หรือในขวดที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ภายใน 48 ชั่วโมงจะเห็นได้ถึงการก่อตัวของอาณานิคม keratinocyte ซึ่งจะค่อยๆบรรจบกันเป็น monolayer หลังจากได้รับจำนวนเซลล์เพียงพอการระงับผลจะกระจายอยู่บนผ้าคลุมแผลที่เตรียมไว้เพื่อวัตถุประสงค์นี้และวางลงในจาน Petri จากการระงับการเป็นครั้งแรกที่สร้าง monolayer แล้วสร้างชั้นของ keratinocytes หลายชั้น ในขั้นตอนการเพาะปลูก keratinocyte จะแสดงในรูปที่ 12 (33.43.54.65)

การก่อตัวของการเกิด keratinocyte หลายชนิดที่เหมาะสมสำหรับการปลูกถ่ายมักใช้เวลา 7-10 วัน บางครั้งระยะเวลานี้ยาวขึ้นซึ่งขึ้นอยู่กับคุณภาพของวัสดุต้นทาง (อายุสุขภาพของผู้บริจาคความถูกต้องของวัสดุคุณภาพของสื่อที่ใช้เป็นต้น) ถ้าชั้น multilayered overgrows แล้วบนพื้นผิวของมันอาจจะมีเซลล์ที่มีปรากฏการณ์ apoptosis ไม่เหมาะสมสำหรับการปลูกถ่าย จาน Petri ที่ปลูกในแผลโดยชั้น multerayered ของ keratinocytes (IPC) จะถูกส่งไปยังคลินิกในตู้คอนเทนเนอร์พิเศษที่อุณหภูมิไม่ต่ำกว่า + 15 องศาเซลเซียส

วิธีการปรับสีเขียวสำหรับการปลูก IPC

ในการทำงานของเราในฐานะการเคลือบบาดแผลเราใช้กล้องหลายชั้นที่ถอยหลังจากฟิล์ม polypore ซึ่งเราได้เริ่มทดลองกับหนู ดังนั้นชั้นชั้นหนังกำพร้าหลายชั้นจึงถูกปลูกโดยพวกเราก่อนและเป็นหมันที่เป็นหมันแม้ว่ามันจะไม่ใช่แผลที่ดีที่สุด

การศึกษาทางคลินิกได้ดำเนินการกับอาสาสมัครด้วยการปฏิบัติตามบรรทัดฐานทางจริยธรรมที่จำเป็น: การลงนามในสนธิสัญญาและการยินยอมที่ได้รับแจ้ง

1. วัฒนธรรมของตนเอง (autologous) และนำมาจากเซลล์เม็ดเลือด (allogenic) keratinocytes ถูกนำมาใช้
2. ได้รับเม็ดสี keratinocytes จากชิ้นส่วนที่ตัดผิวหนังจากด้านในของไหล่ของผู้ป่วย
3. การผ่าตัดแผลเป็นด้วยการใช้เทอร์โมคัปปิ้งดิสก์ไดรฟ์และเลเซอร์ erbium
4. กลุ่มผู้ป่วยที่มีแผลเป็น normotrophic, hypotrophic และ hypertrophic

กระบวนการเทคโนโลยีสำหรับการประยุกต์ใช้เทคโนโลยีโทรศัพท์มือถือเพื่อปรับปรุงประเภทของแผลเป็นผิวประกอบด้วยขั้นตอนต่อไปนี้:

1. การเลือกผู้ป่วย
2. อธิบายสาระสำคัญของการรักษาระยะเวลาในการได้รับผลลัพธ์ที่คาดหวังการลงนามในสนธิสัญญาและความยินยอมที่ได้รับแจ้ง
3. การแต่งตั้งผู้ป่วยเป็นเวลา 2-3 สัปดาห์ก่อนการผ่าตัด 3 ครั้งต่อวัน, zinkteral บน 1t 3 ครั้งต่อวัน
4. ใช้ชิ้นส่วนของผิวยาว 2.0 ซม. และกว้าง 0.7-1.0 ซม. จากพื้นผิวด้านในของไหล่สูงเกือบจะอยู่ที่ด้านล่างของบริเวณซอกใบเพื่อให้ได้ keratinocytes autologous
5. ในกรณีที่ผู้ป่วยปฏิเสธที่จะแยกแยะ keratinocytes ของตัวเองเนื่องจากความเป็นไปได้ที่จะเกิดรอยแผลเป็นแบบเส้นตรงบนพื้นผิวด้านในของไหล่วัสดุเซลล์จึงถูกนำมาจากธนาคารเซลล์ (keratinocytes allogenic)
6. Keratinocytes ถูกแยกและเติบโตขึ้นในสภาพห้องปฏิบัติการที่ได้รับการรับรองสำหรับงานประเภทนี้
7. หลังจากที่ได้รับ IPC เพียงพอสำหรับการปลูกถ่ายวันหนึ่งของการผ่าตัดได้รับการรักษาแผลเป็นที่คลินิกที่วัสดุถูกนำมาในภาชนะพิเศษในจาน Petri
8. การดำเนินการของ dermabrasion ของ rumen, haemostasis ได้ดำเนินการพื้นผิวถูกล้างด้วยน้ำเกลือที่ปราศจากเชื้อ, แห้ง, หลังจากที่ IPC ถูกปลูกถ่ายบน batiste "เซลล์ลง". นั่นคือเซลล์ที่อยู่ด้านบนของ MIC ต่ำกว่าอยู่ติดกับพื้นผิวที่ขัดเงา
9. ฟิล์มที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วถูกซ้อนทับอยู่ด้านบนซึ่งยึดติดกับผิวหนังด้วยผ้าพันแผลยืดหยุ่นหรือผ้าพันแผลที่ยืดหยุ่นของ Omnifix แทนที่จะเป็นฟิล์มเคลือบสารกันบูดที่มีซิลิโคนเช่น Mepitel, Mepiform แผ่นซิลิโคนเจลสามารถใช้งานได้

หลังจาก 5-7 วันฟิล์มหรือสารเคลือบซิลิโคนจะถูกลบออก โดยขณะนี้ keratinocytes ทั้งหมดต้องคลานเข้าไปในแผลเป็นที่ขัดแล้วและยึดติดกับผิวของมัน

10. สภาพแวดล้อมที่เปียกชื้นที่สร้างขึ้นภายใต้ฟิล์มและการเคลือบซิลิโคนมีส่วนร่วมอย่างมากในเรื่องนี้ ผู้ทำพิธีศีลจันทร์ที่เหลืออยู่บนรอยแผลเป็นจากจุดนี้สามารถชุบด้วยทิปหรือไคโตซานเจล ดังนั้นในวันที่ 2 จะมีการสร้างเปลือกหนาแน่นเพื่อความสะดวกของผู้ป่วยจึงควรทำการแก้ไขด้วยฉาบปูนแบบยืดหยุ่นและสามารถซึมผ่านอากาศได้เช่น Omnifix เปลือกที่ระบายอากาศได้ช่วยให้ผิวหนังชั้นหนังกำพร้าที่สร้างขึ้นใหม่สามารถแยกความแตกต่างและกลายเป็นผู้ใหญ่ได้

ขึ้นอยู่กับชนิดของแผลเป็นและความลึกของการบด, น้ำสลัดจะถูกปฏิเสธหลังจาก 8-10 วัน หนังกำพร้าในขณะนี้มีชั้นเซลล์มากกว่า 30-40% ในผิวธรรมดา เยื่อแผ่นรองพื้นไม่เกิดขึ้น Keratinocytes ของหนังหนาขึ้นปล่อยมวลของโมเลกุลที่ใช้งานทางชีวภาพในเนื้อเยื่อแผลเป็น

ความสำเร็จของการรักษาแผลเป็นด้วยเทคโนโลยีชีวภาพส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับวิธีที่พวกเขาได้รับการดูแลในช่วงหลังผ่าตัด วัฒนธรรมของเซลล์เป็น "ชนิดอ่อนโยน" ของแผลที่ปกคลุมและในช่วงแรก ๆ หลังจากการปลูกถ่าย BMD สามารถถอดออกจากเนื้อเยื่อต้นแบบได้ง่าย ดังนั้นผู้ป่วยจึงควรดูแลแผลเป็นหลังผ่าตัด สำหรับ 8-9 เดือนอย่าถูและทำงานได้อย่างง่ายดายด้วยน้ำเดือดเพื่อหลีกเลี่ยงการฉีกขาดของผิวหนังชั้นหนังกำพร้าที่เพิ่งสร้างขึ้นมาใหม่ซึ่งไม่ได้จับเนื้อเยื่อไว้แน่น

หมายเหตุ

ก่อนการผ่าตัดและในระหว่างการใช้ Dermabrasion ของอนุมูลอิสระฮาโลเจนและสารกันบูด (yodopiron, sulyodopiron, iodinol, yodinat, chlorhexidine, ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์) ได้รับอนุญาตก่อนที่จะปลูก kletok- ห้ามอย่างแน่นอนเนื่องจากผลกระทบพิษของพวกเขา เป็นพิษต่อเซลล์นอกจากนี้ยังมีเมทิลีนสีน้ำเงิน สีเขียวสดใส

เพื่อหลีกเลี่ยงการติดเชื้อโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อทำงานกับแผลเป็น hypertrophic ก็เป็นไปได้ที่จะรักษาเขตปฏิบัติการด้วย neomycin sulfate, polymyxin หรือ gentamicin พวกเขาไม่ได้ก่อให้เกิดผลกระทบ cytotoxic เมื่อ keratinocytes

อันเป็นผลมาจากการรักษานี้ผลสามจะทำได้

1. การจัดตำแหน่งของพื้นผิวของกระเพาะอาหาร
2. สร้างชั้นด้านบนของหนังกำพร้าใหม่ความหนาปกติ
3. แปลงสภาพของเนื้อเยื่อแผลเป็นใน dermopodobnuyu โดยการกระทำของ cytokines, ปัจจัยการเจริญเติบโตและโมเลกุลออกฤทธิ์ทางชีวภาพอื่น ๆ ที่หลั่งมาจากเซลล์ที่ปลูกและ keratinocytes กระตุ้นโดยพวกเขารบราและแมคโครฟาจ

แผลเป็นจะเห็นได้ชัดขึ้นยืดหยุ่นมากขึ้นรูขุมขนที่ปรากฏอยู่ในนั้นผมพัฟสีผิวสามารถเรียกคืนได้เนื่องจากมี melanocytes ในคณะกรรมการกฤษฎีกา

อย่างไรก็ตามทุกช่วงเวลาบวกเหล่านี้ใน cicatrix ไม่ได้มาทันที ในเรื่องนี้จำเป็นต้องเตือนผู้ป่วย ว่ากระบวนการของการเปลี่ยนแปลงของเนื้อเยื่อแผลเป็นที่ผิวหนังจะช้าและผลที่ดีที่สุดของการรักษาดังกล่าวสามารถคาดหวังไม่ก่อนหน้านี้กว่า 10-14 เดือน ทันทีหลังจากที่ตกแต่งได้รับการปฏิเสธพื้นผิวที่ขัดเงามีสีเด่นชัดยิ่งขึ้นกระบวนการบดเป็นอย่างไร ความเสียหายน้อยที่สุดต่อผิวหนังเกิดขึ้นเมื่อบดกรรไกร normotrophic ด้วยเลเซอร์ erbium สีของรอยแผลเป็นและผิวรอบ ๆ ได้รับการฟื้นฟูในช่วง 3-8 สัปดาห์ แม้จะมีข้อควรระวังดังกล่าวบางครั้งอาจมีอาการรอยดำที่เกิดขึ้นหลังผ่าตัดซึ่งสามารถดำเนินการได้อย่างอิสระเป็นเวลาหลายเดือน

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]